色（即将（1）（2）的ON-OFF都OFF掉）（3）atma；rga；zg；

八、对于没有标准实验、没有脉宽和功率的杂核如何入手做？以B11为例。 1、首先查询该杂核的旋磁比、天然丰度，对于天然丰度太低的要求浓度高些，或者很难做出来。

Help→NMR Guid→eNMR Encyclopedia→NMR Application→NMR penddic Table→点击要做的元素查看旋磁比和天然丰度。

2、先借用C谱的标准实验，新建一个实验，当旋磁比为正时标准实验选择C13CPD，当旋磁比为负时标准实验选择C13IG。点ok。 3、更改参数

查看Acqpar参数（都是C13的参数）→getprosol（读取C的脉宽和功率）→输入edsp命令→把F1维中的C13改为B11,F2维不变→Default→Save→再次回到Acqupars参数中→NS（扫描次数）、SW(谱宽，尽量设宽些400)，O1P（先赋予0）+-200位置找峰，D1（经验值）2S，对0也适合，（事先查D1值，太大可加弛豫试剂）→lock，topshim→输入atmm（不能用atma，手动调谐，第一次做核时必须用手动调谐。）→出现Tuning对话框，若点》《找不到会动的倒峰，则点击▽图标，放大范围，都调好后点①File②Save position③Exit→输入atma；rga；zg，弹出rga对话框，点OK，输入密码Bruker，接着弹出zg警告→halt8，efp；apk→输入sref弹出警告，close（将O1P放在最佳位置）→edmac（宏命令）+空格+名称（随意命名）。 校准背景信号，第一段（第一行，absf1+空格+最大值；第二行，absf2+空格+次大值；第三行，absf）；第二段（第一行，absf1+空格+最大值；第二行，absf2+空格+次大值；第三行，absf）；Notice：下一段的开始是上一段的结束，进入鼓包区域后区间要变小，节点值不能正好落在峰的最高点，从最左端分多段编辑到最右端。编辑好后保存。→输入BL命令 4、如何创建标准实验模板？

输入wpar→在user下，不能存在par上面→点击write new→输入实验名称，OK→OK→close→new→不能getprosol（90%重水10%水叠代钠标样，可以用来建立O的标准实验，也可以用来建立Na的标准实验，需要做Pt的标准实验室，可打电话让工程师过来设置，另外做其他杂核的定量需用到C13IG脉冲系列，需要请工程师调90度脉冲的脉宽和功率，请工程师来做核。） 九、部分二维实验

温馨提示：二维谱实验最重要的就是控温。 （一）、实验一

1、New建立一个新实验，标准实验选择COSYGPMFSW：用梯度场进行相关路径的选择。其中GP表示梯度；MF表示多量子粒波，SW表示方波，标准波形。多量子粒波的好处：可以从对角峰上看到单峰的性质，简化对角峰，易于解析。 2、lock

3、atma；topshim；getprosol，调谐的目的是为了接收线圈的频率与中心频率保持一致，提高灵敏度。DS空扫16次。Pulseprog：查看脉冲系列。TD,F2维2000左右；F1维，大于256（设高一点可以提高分辨率）。采采样模式：QF；与采样相关的参数：TD、NS、DS、SW、O1P。其中NS、DS的设置可以参考限定值。 输入命令ased，可以查看与脉冲系列相关的参数，基本不需要自行修改。 4、rga；zg 5、谱图处理

（1）输入命令xfb进行变换，其中xf表示加窗函数，b表示两个维度。 （2）调进一维谱

①选中一维谱，右击，选择display As 2D projection。②选F1+F2 （3）点等高线调整图标（一个没有底边的三角弧形，中间几条平行线穿过）进行等高线调整。Level increment：1.2-1.3即可；Number of levels（等高线数）：32；Fill→Apply→OK。或者可以输入命令clev+32可得到等高线数目。 （4）校准（即定标）放大谱图进行定标。

（5）去除噪音，选中噪音，输入命令proj，选择UP data rows/cols from display→ok→再选择最上面的calculate positive projection→输入sub2（对正峰和负峰都去除噪音） （二）、实验二

1、New，标准实验选择：MLEVPHSW,PH表示相位；MLEV表示自旋锁定或自旋传递；SW表示方波，形状脉冲SP；①查看与脉冲系列相关的参数，其中NS=8*n，DS=16*n；②TD(F2=2048，F1≥256)③SW,O1P;④D9：自旋锁定时间，默认值为0.08S，即混合时间（设短的话可能会无法调整相位） 2、lock

3、atma；topshim；getprosol； 4、谱图处理

（1）输入命令xfb变换谱图 （2）调等高线

（3）调相位，先调0级相位，再调1级相位。 （4）校准 （三）实验三

1、New→NOESYPHSW→适用于大分子

2、①NS：8*N；DS:16*N;②D8混合时间，空间＜5à，峰的强度与距离的六次方成正比。对于大分子，D8=0.1～0.3S；对于小分子：D8=0.6～0.8。

Notice：分子量越大，弛豫时间越短，分子量越小，弛豫时间越长，温度越高弛豫时间越短。 3、lock 4、getprosol

5、atma；topshim；rga；zg （四）实验四

1、new，标准实验选择ROESYPHSW,PH：通过相位循环可以减掉一些峰。 2、具体实验步骤与前面的实验步骤大致相同，通过查看与脉冲系列相关的参数对参数进行设置。接着LOCK,getprosol；atma；topshim；rga；zg

3、Notice：输入Set命令，选中Enable automatic command spooling方框内□打钩。可以针对一个样品的自动排列做多个实验。 （五）实验五：J-Resolved同核实验。 1、new→cosy45sw（先借用）

2、Pulprog：jresqf（消除化学位移，保留耦合常数） 3、NS:4*N；DS：16；

4、F2维（化学位移）；F1维（耦合常数）

SW=20，SWH=50HZ，O1P只针对F2设定值，F1不用设。 5、getprosol 6、lock

7、atma；topshim；rga；zg； （六）实验六H-C相关的二维谱

1、New，选择标准实验：HSQCETGPSISP,ET表示采样模式为回波反回波采样；GP梯度；SI灵敏度增强；SP形状脉冲，让激发更均匀。 2、输入命令eda，进行采样参数设置：NS=1*N,DS≥16,TD,SW谱宽(F2为H谱谱宽，F1为C谱谱宽)； 输入命令ased可进行与脉冲系列有关的参数设置，①CNST2：单位为HZ,C和H直接耦合常数的平均值。②GPZ2，C:20.1%，N15，8.1%，若有些杂核没有显示，则改核后可以输入命令gradratio查看 3、lock

4、getprosol；atma；topshim 5、rga；zg

（七）实验七

1、New→HMBCGPND，ND表示在采样时间内不进行去耦。 2、（1）采样参数设置NS=2，DS=16,O1P=?,SW=?

（2）与脉冲系列相关的参数设置，CNST13，远程耦合常数，系统默认一般为8HZ,可以适当地减小，当看不到交叉峰时，可能该值设大了，也可能是因为二面角的原因。，通过耦合常数可以计算二面角的大小。 3、lock

4、atma；topshim；rga；zg

Notice：HMBC谱图中可能存在HSQC的残余峰。 （八）实验八，在HMBC二维谱中去除HSQC的残余峰。 1、new→HMBCGPND,Ttitle：J-Filter HMBC 2、更改脉冲系列及参数 将Pulprog→HMBCGPL2ndqf

（1）输入命令eda，更改采样参数，NS=2*N,DS=16，QF，TD(分F1，F2)，O1P （2）输入命令ased，更改与脉冲系列相关的参数，CNST6:120HZ;CNST7180HZ,在该区间内HSQC残余峰去除。CNST13，百分比根据右侧提示填写。 3、getprosol 4、lock

5、atma；topshim；rga；zg 十、完整的二维谱图处理过程 1、输入xfb，谱图变换； 2、调入一维谱，选择F1+F2，→ok 3、clev32，修改等高线。

4、校正相位（NOESY、ROESY、TOCSY、HSQC需要校正相位，其他的不需要）点相位校正图标，选几个点，ADD，先校正红线所在的位置。 5、定标：先定好一维谱，读出化学位移，再点击定标图标，找出中心位置进行定标。 6、去除噪音，（T1噪音的去处），左边没有信号的投影。

Proj→edit→update→ok→第一个正峰第二个负峰，输入sub2。

7、可以通过选择性预测提高F1的分辨率，edp→procpars→founer→ME_mod→选择LPfr（LP表示线性预测，fr表示向前的）→NCOEF（HH相关选100，HC相关选32）。此处理的缺点是可能产生鬼峰。