C．蛋白质的一级结构决定高级结构
D．氨塞酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部
答案: (A，B，C) 一般来说，蛋白质的一级结构决定了它的高级结构。二硫键在稳定蛋白质构象方面起重要作用。带电荷的氨基酸侧链有暴露于蛋白质分子表面的趋势，而疏水侧链则有避开水埋于蛋白质分子内部的趋势。
4.含有卟啉环的蛋白质是：( )。
A．血红蛋白 B．肌红蛋白 C．细胞色素 D．过氧化氢酶
答案: (A，B，C，D) 各种卟啉是从四个吡咯环衍生而来的。卟啉环能与许多离子包括铁、铜、锌和钴形成金属螯合物。卟啉环与铁离子形成的络合物称铁卟啉。血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素和过氧化氢酶中均含有铁卟啉。
5.下列有关肌红蛋白的叙述，哪些是正确的：( )。 构
B．多肽链含有高比例的α-螺旋构象 C．血红素位于二个组氨酸残基之间
D．大部分非极性基团位于此球状结构的外部
A．肌红蛋白是由一条多肽链和一个血红素连接而成的紧密球状结
答案: (A，B，C) 肌红蛋白是由一条多肽链和一个血红素辅基连接而成的紧密球状结构。多肽链中75％是α-螺旋构象。血红素位于二个组氨酸残基(F8，E7)之间，其中一个组氨酸残基(F8)与血红素中的铁离子以配位键相连，另一个组氨酸残基(E7)不与血红素相连。肌红蛋白的大部分非极性基团在球状结构的内部。
6.蛋白质变性是由于：( )。
A．氢键破坏
B．肽键断裂 C．亚基解聚
D．破坏水化层和中和电荷
答案: (A，C) 蛋白质的变性是指天然蛋白质受物理或化学因素的影响，使蛋白质原有的特定的空间结构发生改变，从而导致蛋白质性质的改变和生物活性的丧失。亚基解聚和氢键破坏都会使蛋白质的空间结构发生改变，使蛋白质变性。蛋白质变性时，次级键断裂，肽键并不断裂，肽键的断裂则是蛋白质的降解。破坏水化层和中和电荷会使蛋白质胶体溶液不稳定，使蛋白质容易沉淀，但沉淀的蛋白质并不就是变性的蛋白质，如盐析后的蛋白质通常并不变性。
7.镰刀形红细胞贫血病患者血红蛋白β-链上第六位的谷氨酸被缬氨酸取代后，将产生哪些变化：( )。
A．在pH 7.0电泳时，增加了异常血红蛋白向阳极移动的速度 B．导致异常脱氧血红蛋白的聚合作用 C．增加了异常血红蛋白的溶解度 D．一级结构发生改变
答案: (B，D) 在生理pH时，血红蛋白β-链上第六位谷氨酸的γ-羧基是解离的，因此带负电荷，而被缬氨酸取代以后，负电荷数减少了，因而在pH7.0电泳时，向阳极的移动速度也就减慢了。第六位上缬氨酸取代原有的谷氨酸后导致一级结构的改变，它使镰刀状红细胞的脱氧血红蛋白不溶解，有利于该蛋白质的聚合作用，这样就使红血球挤扭成镰刀状，并产生贫血。
8.下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的：( )。
A．四个血红素基各自独立地与氧结合，彼此之间并无联系 B．以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图，曲线呈S形 C．氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳强
D．氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化
答案:(B, D) 血红蛋白是由四个亚基组成的蛋白质.由于分子中四个氧结合位的协同作用使其饱和曲线呈S形。氧与血红蛋白结合并不引起亚铁离子价数的变化。一氧化碳和和氰化物与血红蛋白的亲和力比
氧大。
9.下述原因中哪些会导致血红蛋白与氧亲和力的下降：( )。
A．提高红细胞内2，3-二磷酸甘油酸的水平 B．酸中毒 C．提高CO2的水平
D．一分子氧和脱氧血红蛋白分子四个结合位中的一个结合
答案: (A，B，C) 血红蛋白除了能运输O2和CO2外，还可依靠每条β-链上第146位组氨酸来缓冲血液中突然的酸碱变化。然而，组氨酸上咪唑基的质子化导致血红蛋白的脱氧作用。因此酸中毒的情况下，血红蛋白与氧的结合能力就下降。而2,3-二磷酸甘油酸(2,3－DPG)能够和血红蛋白β-链上带正电荷的残基以盐键的形式相连，使脱氧形式的血红蛋白更加稳定，导致了与O2亲和力的下降。每分子氧加到血红蛋白分子上需要打开盐键，当第一个O2与血红蛋白结合后，随后的O2再与血红蛋白结合时，需要打开的盐键要少些，因此一旦第一个O2与血红蛋白结合后就增加了随后的O2与血红蛋白的亲和力，这就是所谓的协同效应。CO2可逆地与血红蛋白分子中亚基的N-末端反应生成氨基甲酰血红蛋白，氨基甲酰血红蛋白带负电荷，并形成了稳定脱氧血红蛋白的盐键，因此CO2降低了血红蛋白与氧的亲和力。
10.打开蛋白质分子中的二硫键：( )。
A．可用8mol/L尿素处理 B．用HCOOOH处理 C．用水解的方法 D．用HSCH2CH2OH处理
答案: (B，D) 打开蛋白质分子中的二硫键可用过甲酸(HCOOOH)氧化的方法，也可用β-巯基乙醇(HSCH2CH2OH)还原的方法。尿素是蛋白质变性剂不能打开二硫键。水解的方法主要是水解肽键。
四、问答题：
1.根据氨基酸的pK值，指出G1y、Asp、Lys和His在(1)pH1.0 (2)pH2.1 (3)pH4.0 (4)pH10时可能带的静电荷(用-、0或+表示)。
答案： 先根据各氨基酸的pK值求出其等电点。然后根据溶液pH小于、等于或大于等电点来判断氨基酸所带的净电荷是+、0或-。结果列表
如下：
氨基酸 等电点 溶液pH pI 1.0 2.1 4.0 10.0 Gly 5.97 + + + - Asp 2.97 + + - - Lys 9.74 + + + 0/- His 7.59 + + + -
2.假定有1mmol的五肽，酸水解生成2mmol谷氨酸，1mmol赖氨酸，没有能够定量回收其它氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段，在pH7.0进行电泳，一个肽段移向阳极，另一个则移向阴极。用FDNB处理胰蛋白酶水解的一个肽段，再用酸水解，生成DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶处理原来五肽生成两个肽段及游离谷氨酸。试从上述实验结果写出该五肽的氨基酸顺序。
答案： (1)1mmol五肽酸水解生成2mmol Glu，1mmol Lys，没有能够定量回收其它氨基酸。在酸水解时，色氨酸容易破坏而不能定量回收，所以该五肽的氨基酸组成为 2Glx，2Trp，1Lys。 (2) 用胰蛋白酶水解五肽得两个肽段，说明Lys不是末端氨基酸，即……Lys……。 (3) 用胰凝乳蛋白酶水解五肽生成两个肽段及游离的Glu，因胰凝乳蛋白酶可水解Trp的羧基形成的肽键，所以可推知该肽的氨基酸顺序为： X-Trp-Y-Trp-G1u(X、Y为未知氨基酸) (4) 由(2)和(3)可知该肽的顺序为：X-Trp-Lys-Trp-Glu (5) 根据该肽氨基酸组成及FDNB处理胰蛋白酶水解的一个片段继以酸水解后生成
DNP-Glu，可知该五肽
为:Glx-Trp-Lys-Trp-Glu (6) 用胰蛋白酶水解五肽得两个肽段，即为:Glx-Trp-Lys和Trp-Glu。在pH7.0时电泳，Trp-Glu带负电荷，向阳极移动,根据题意，Glx-Trp-Lys向阳极移动，在pH7.0时此肽向阴极移动说明Glx是Gln而不是Glu。 因此该肽的氨基酸顺序为：Gln-Trp-Lys-Trp-Glu
3.用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、β-巯基乙醇、胰蛋白酶、过甲酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L盐酸、茚三酮、苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶。 (1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序 (2)鉴定小于10
-7
克肽的N-端氨基酸
(3)使没有二硫键的蛋白质可逆变性。如有二硫键，应加何种试剂？ (4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键 (5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键 (6)水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键
答案： (1) 苯异硫氰酸 (2)丹磺酰氯 (3) 尿素，如有二硫键应加β-巯基乙醇使二硫键还原。 (4) 胰凝乳蛋白酶 (5)溴化氯 (6) 胰蛋白酶
4.有一球状蛋白质，在pH 7的水溶液中能折叠成一定的空间结构。通常非极性氨基酸侧链位于分子内部形成疏水核，极性氨基酸侧链位于分子外