第一章：蛋白质的结构与功能
一、名词解释
1.构象 2．构型 3．氨基酸的等电点 4．二面角 5．肽单位 6．蛋白质一级结构 7．蛋白质二级结构 8．蛋白质三级 结 构 9．蛋白质四级结构10．超二级结构 11．结构域 12．蛋白质的等电点 13．盐溶 14．蛋白质的变性作用 15
蛋白质的复性 16．盐析 17．蛋白质的变构效应 18．沉降系数 19．电泳 20. 偶极离子
二、填空题
1.肽链的N末端可以用（ ）法、（ ）法、（ ）法和（ ）法测定，而（ ）法和（ ）法则是测定C末端氨基酸最常用的方法。
2.已知蛋白质的超二级结构的基本组成方式有（ ）、（ ）和（ ）。
3.确定蛋白质中二硫键的位置，一般先采用（ ），然后用（ ）技术分离水解后的混合肽段。 4.因为（ ），（ ）和（ ）等三种氨基酸残基的侧链基团在紫外区具有光吸收能力，所以在（ ）nm波长的紫外光吸收常被用来定性或定量检测蛋白质
5.带电氨基酸有（ ）氨基酸与（ ）氨基酸两类，其中前者包括（ ）、（ ）后者包括（ ）、（ ）、（ ）。
6.在蛋白质元素组成中，氮的含量相当恒定，平均为（ ）%。
7.当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以（ ）离子形成存在；当pH＞pI时，氨基酸以（ ）离子形式存在。
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8.氨基酸具有两性解离特性，因此它既可被（ ）滴定，又可被（ ）滴定。丙氨酸的PKα-COOH=2.34，PKα-NH3=9.69，其pI=（ ），在pH=7时，在电场中向（ ）极方向移动。
9．有两种蛋白质,一种经末端分析得知含两个N-末端，用SDS电泳显示两条带，说明此蛋白质含有（ ）个（ ）亚基；另一蛋白质用巯基乙醇处理后，SDS电泳显示一条带，则该蛋白质的结构特点是（ ）。 10.我国科学家于1965年首次用（ ）方法人工合成了（ ）蛋白质。
11.蛋白质中存在（ ）种氨基酸，除了（ ）氨基酸外，其余氨基酸的α-碳原子上都有一个自由的（ ）基及一个自由的（ ）基。
12.α-螺旋中相邻螺圈之间形成链内氢键，氢键取向几乎与（ ）平行。氢键是由每个氨基酸的
（ ）与前面隔三个氨基酸的（ ）形成的，它允许所有的（ ）都能参与氢键的形成。
13．能形成二硫键的氨基酸是（ ），分子量最小的氨基酸是（ ）。 14．稳定蛋白质胶体状态的因素是蛋白质分子上的（ ）及（ ）。 15．蛋白质根据分子形状可分为（ ）和（ ）两种。
16. 用胰蛋白酶水解蛋白或多肽时，由（ ）和（ ）的羧基所形成的肽键最易被水解。 17．丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸的极性是由侧链基团的（ ）基提供的，天冬酰胺和氨酰胺的极性是由其（ ）引起的，而半胱氨酸的极性则是因为含（ ）的缘故。 18．已知下列肽段：
（1）-Ala-Phe-Tyr-Ala-Arg-Ser-Glu- （2）-Lys-Glu-Arg-Gln-His-Ala-Ala- （3）-Gln-Cys-Leu-Ala-Ser-Cys-Ala- （4）-Gly-Leu-Ser-Pro-Ala-Phe-Val-
其中在pH=7条件下向负极移动快的多肽是（ ）；在280nm有最大吸收的是（ ）；可能形成二硫键桥的是（ ）；α-螺旋中断的是（ ）。
19.Pauling等人提出的蛋白质α-螺旋模型中，每圈螺旋包含（ ）个氨基酸残基，高度为（ ）。每个氨基酸残基沿轴上升（ ）并旋转100°。
20．血红蛋白与氧的结合过程呈现（ ）效应，这是通过血红蛋白的（ ）作用来实现的。 21.天然蛋白质分子中的α-螺旋都属于（ ）手螺旋。
22.维持蛋白质一级结构的化学键有（ ）和（ ）。维持二级结构主要靠（ ），维持三级结构的作用力除了以上几种外还需（ ）、（ ）和（ ）。
23.氨基酸顺序自动分析仪是根据（ ）反应原理设计的，多肽链的氨基末端与（ ）试剂反应生成（ ）然后在无水的酸中经环化裂解成（ ）。
24.蛋白质主链构象的结构单元包括（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。 25.维系蛋白质四级结构的最主要作用力是（ ）。
26.常用的测定蛋白质分子量的方法有（ ）、（ ）和（ ）等。
27.GSH表示（ ），它由（ ）、（ ）和（ ）通过（ ）键连接而成，活性基团是（ ）。
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28.（ ）花费10年时间，利用（ ）反应首先弄清、（ ）的一级结构。它由（ ）条多肽链组成，各条多肽链分别包括（ ）和（ ）个氨基酸残基，链内和链间有（ ）个（ ） 键。
29.α-螺旋和β-折叠结构属于蛋白质的（ ）级结构，稳定其结构的作用力是（ ）。若某肽链的分子量为22000，（氨基酸的平均分子量为110），则全为α-螺旋 时肽链的长度为（ ）nm，全为β-折叠时肽链的长度（不考虑β-折叠的双链）为（ ）nm。
30.盐析法是分离提纯蛋白质过程中常用的方法之一，常用的主要盐析试剂是（ ）、（ ）和（ ）。
三、选择题
1． 胰蛋白酶的作用点是:（ ）
A．精氨酰-X B．苯丙氨酰-X C.天冬氨酰-X D.X-精氨酸 （X代表氨基酸残基）
2. 胶原蛋白组成中出现的不寻常氨基酸是:（ ）
A.乙酰赖氨酸 B.羟基赖氨酸 C.甲基赖氨酸 D.D赖氨酸 3. 破坏α螺旋结构的氨基酸残基之一是:（ ）
A.亮氨酸 B.丙氨酸 C.脯氨酸 D.谷氨酸 4． 茚三酮与脯氨酸反应时，在滤纸层析谱上呈现:（ ）色斑点 A.蓝紫 B.红 C.黄 D.绿 5． 用Sepharose 4B柱层析来分离蛋白质，这是一种:（ ） A.离子交换柱层析 B.吸附柱层析 C.分子筛（凝胶过滤）柱层析 D.配柱层析
6. 有个天然肽的氨基酸顺序为：Pro-Ala-Phe-Arg-Ser，你要证实N端第二位Ala的存 在， 最好的试剂选择是:（ ）
A.FDNB B.PITC C.无水肼 D.羧肽酶 7. 双缩脲反应主要用来测定:（ ）
A.DNA B.RNA C.胍基 D.肽
8．在天然蛋白质组成中常见的一个氨基酸，它的侧链在pH7.2和pH13都带电荷，这个 氨基酸是:（ ）
A.谷氨酸 B.组氨酸 C.酪氨酸 D.精氨酸 9．牛胰岛素由A、B两条链组成，其中B链是:（ ） A.30肽 B.31肽 C.20肽 D.21肽 10．胶原蛋白中最多的氨基酸残基是:（ ）
A.脯氨酸 B.甘氨酸 C.丙氨酸 D.组氨酸
11．在混合氨基酸中，酪氨酸可借下列哪一种试剂来检定：（ ） A.水合茚三酮反应 B.桑格反应 C.米伦反应 D.阪口反应 12. 与茚三酮反应不呈兰紫色的氨基酸是：（ ）
A.Phe B.Pro C.Glu D.Met 13．下列有关蛋白质叙述哪项是正确的：（ ） A. 通常蛋白质的溶解度在等电点时最大 B．大多数蛋白质在饱和硫酸铵中溶解度增大
C．蛋白质分子的净电荷为零时的pH是它的等电点 D．以上各项全不正确
14．盐析法沉淀蛋白质的原理是：（ ） A. 降低蛋白质溶液的介电常数 B．中和电荷，破坏水膜
C．与蛋白质结合成不溶性蛋白 D．调节蛋白质溶液pH到等电点
15．凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的蛋白质是：（ ） A．分子量大的 B．分子量小的 C.带电荷多的 D.带电荷少的 16．SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术最常用的指示剂为：（ ）
A.亚甲基兰 B.石蕊 C.碘乙醇 D.溴酚兰 17．蛋白质的基本组成单位是：（ ）
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A.肽键平面 B核苷酸 C肽 D.氨基酸 18．含有两个羧基的氨基酸是：（ ）
A.Lys B.Asn C.Gln D.Glu 19．下列哪种氨基酸为环状亚氨基酸：（ ）
A.Gly B.Pro C.Trp D.Try 20．下列氨基酸中，哪种是天然氨基酸：（ ）
Ａ.Orn（鸟氨酸） Ｂ.Cit（瓜氨酸） Ｃ.Pro(脯氨酸) Ｄ.HyPro（羟脯氨酸） 21．氨基酸在等电点时，应具有的特点是：（ ）
Ａ.不具正电荷 Ｂ.不具负电荷 Ｃ.a+b Ｄ.在电场中不泳动 22．氨基酸不具有的化学反应是：（ ）
Ａ.双缩脲反应 Ｂ.茚三酮反应 Ｃ.DNFB反应 Ｄ.PITC反应 23．蛋白质的一级结构指的是：（ ）
Ａ.蛋白质的α-螺旋结构 Ｂ.蛋白质分子的无规则卷曲
Ｃ.蛋白质分子内氨基酸以肽键相连接 Ｄ.蛋白质分子内氨基酸的排列顺序 24．维持蛋白质二级结构的主要化学键是：（ ） Ａ.氢键 Ｂ.二硫键 Ｃ.疏水键 Ｄ.离子键 25．在一个肽平面中含有的原子数为：（ ） Ａ.3 Ｂ.4 Ｃ.5 Ｄ.6
26．关于蛋白质中β-折叠的叙述，下列哪项是正确的：（ ） Ａ.β-折叠中氢键与肽链的长轴平行 Ｂ.氢键只在不同肽链之间形成 Ｃ.β-折叠中多肽链几乎完全伸展 Ｄ.β-折叠又称β-转角
27．可使二硫键氧化断裂的试剂是：（ ） Ａ.尿素 Ｂ.巯基乙醇 Ｃ.溴化氰 Ｄ.过甲酸 28．典型的α-螺旋是：（ ）
Ａ.2.610 Ｂ.3.613 Ｃ.4.015 Ｄ.4.416
29．下列哪一种说法对蛋白质结构的描述是错误的：（ ）
Ａ.都有一级结构 Ｂ.都有二级结构 Ｃ.都有三级结构 Ｄ.都有四级结构 30．具有四级结构的蛋白质特征是：（ ） Ａ.分子中必定含有辅基
Ｂ.含有两条或两条以上的多肽链
Ｃ.每条多肽链都具有独立的生物学活性 Ｄ.依赖肽键维系蛋白质分子的稳定
31．关于蛋白质亚基的下列描述，哪条是正确的：（ ） Ａ.一条多肽链卷曲成螺旋结构 Ｂ.两条以上多肽链卷曲成二级结构 Ｃ.两条以上多肽链与辅基结合成蛋白质 Ｄ.每个亚基都有各自的三级结构
32.的α亚基与O2结合后产生变构效应，从而：（ ） Ａ.促进其它亚基与CO2结合 Ｂ.促进其它亚基与O2结合
Ｃ.促进α亚基与O2结合，抑制β亚基与O2结合 Ｄ.抑制α亚基与O2结合，促进β亚基与O2结合 33．血红蛋白的氧合曲线形状为：（ ）
Ａ.双曲线 Ｂ.抛物线 Ｃ.S-形曲线 Ｄ.直线 34．下列哪条对蛋白质变性的描述是正确的：（ ） Ａ.蛋白质变性后溶解度增加
Ｂ.蛋白质变性后不易被蛋白酶水解 Ｃ.蛋白质变性后理化性质不变
Ｄ.蛋白质变性后丧失原有的生物活性
35．加入哪种试剂不会导致蛋白质的变性：（ ） Ａ.尿素 Ｂ.盐酸胍 Ｃ.SDS Ｄ.硫酸铵
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36．下列哪一项因素不影响蛋白质α-螺旋的形成：（ ） Ａ.碱性氨基酸相近排列 Ｂ.酸性氨基酸相近排列 Ｃ.脯氨酸的存在 Ｄ.丙氨酸的存在
37．在凝胶过滤（分离范围是5000～400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来：（ ）
Ａ.细胞色素C（13370） Ｂ.肌球蛋白（400000） Ｃ.过氧化氢酶（247500） Ｄ.血清清蛋白（68500）
四、是非题
1.分子病都是遗传病。
2.一个蛋白质样品，在某一条件下用电泳检查，显示一条带，因此说明，该样品是纯的。 3.蛋白质的SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳和圆盘电泳是两种完全不同的技术。 4.等电点不是蛋白质的特征参数。
5.在蛋白质和多肽分子中，连接氨基酸残基的共价键除肽键外，还有就是二硫键。
6.蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中，将向阴极移动。 7.电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法。 8.天然存在的氨基酸就是天然氨基酸。
9.用纸电泳法分离氨基酸主要是根据氨基酸的极性不同。
10.在天然氨基酸中只限于α-NH2能与亚硝酸反应，定量放出氮气。 11.由于静电作用，在等电点时氨基酸溶解度最小。
12.氨基酸在水溶液中或在晶体状态时都以两性离子形式存在。
13.两性离子氨基酸在溶液中，其正负离子的解离度与溶液pH无关。 14.氨基酸的等电点可以由其分子上解离基团的解离常数来确定。 15.溶液的pH可以影响氨基酸的pI值。 16.天然蛋白质α-螺旋为右手螺旋。
17.多肽链能否形成α-螺旋及螺旋是否稳定与其氨基酸组成和排列顺序直接有关。
18.具有四级结构的蛋白质，当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质原有的生物活性。 19.渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法都是利用蛋白质的物理化学性质来测定蛋白质分子量的。 20.蛋白质的变性是蛋白质分子立体结构被破坏，因此常涉及肽键的断裂。
21.当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0。 22.一般说来，蛋白质在水溶液中，非极性氨基酸残基倾向于埋在分子的内部而不是表面。 23.蛋白质中一个氨基酸残基的改变，必定引起蛋白质结构的显著变化。
24.在每一种蛋白质多肽链中，氨基酸残基排列顺序都是一定的，而不是随机的。 25.蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。 26.蛋白质变性后，其分子量变小。
27.蛋白质的氨基酸顺序（一级结构）在很大程度上决定它的三维构象。 28.蛋白质的亚基（或称亚单位）和肽链是同义词。
29.氨基酸的等电点是算出来的，同样蛋白质的等电点也可以算出来。 30.所有蛋白质都具有一级、二级、三级、四级结构。
31.蛋白质构象是蛋白质分子中的原子绕单键旋转而产生的蛋白质分子中的各原子的空间排布。因此，构象并不是一种可以分离的单一立体结构形式。
32.蛋白质中的稀有氨基酸在遗传上是特殊的，因为它们没有三联体密码，所有已知稀有氨基酸都是从其前体经化学修饰产生的。
33.当氨基酸处于等电点状态时，由于静电引力的作用，氨基酸的溶解度最小，容易发生沉淀。 34.一氨基一羧基氨基酸pI为中性，因为-COOH和-NH2解离度相同。 35.蛋白质分子酰胺平面中除-C=O外，其余的单键都能自由旋转。 36.用强酸强碱变性后的蛋白质不沉淀。
五、问答题
1.简述血红蛋白的结构?其结构与功能有什么关系？血红蛋白和氧的结合受那些因素的影响？
2.有一个肽段，经酸水解测定，由四个氨基酸组成。用胰蛋白酶水解成为二个片段，其中一个片段在280纳米（nm）有强的光吸收，并且Pauly反应和坂口反应都是阳性。另一个片段用CNBr作用释放出一个氨基酸与茚三酮反应呈黄色，试写出这个肽的氨基酸组成及排列顺序。
3.有人纯化了一个未知肽，其氨基酸组成为：Asp1，Ser1，Gly1，Ala1，Met1，Phe1和lys2，又做了一系列分析，结果如下：
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