微生物学复习题和参考答案

4.答案亚硝酸可使DNA中的碱基发生氧化脱氨作用。使

,C

,从而发生转换。

酮式次黄嘌呤HK。

而营养缺陷型细胞不能在基本培养基上生长,故制霉菌素不能杀死营养缺陷型细胞。

9.答案青霉素能抑制细菌细胞壁的合成,因而能杀死正在生长繁殖的细菌。

野生型细菌在基本培养基上能生长繁殖,故可被青霉素杀死,达到淘汰野生型的目的。

而营养缺陷型细胞不能在基本培养基上生长,青霉素不能杀死呈休止状态的细胞,因而它存活保留下来。

10.答案原理:野生型菌株可在基本培养基上迅速生长,缺陷型则不能生长。后者只能在完全培养基上生长。因此凡在基本培养基上生长的菌落应该是野生型。

步骤:把经诱变处理后的细胞涂布在平板上。 待长成单个菌落后,用灭菌牙签把这些单菌落逐个分别转接至基本培养基和完全培养基平板上。

经培养,如在完全培养基平板上长出菌落,而在基本培养基相应位置上不长,说明这是一个营养缺陷型。

11.答案转化:受体菌直接吸收外源DNA片段,通过交换把它整合到自己的基因组中,再经复制就使自己变成一个转化子,这种受体菌接受外源DNA片段而获得部分新遗传性状的现象称为转化。

具体过程:

转化因子与感受态细胞结合:双链DNA片段与感受态受体菌细胞表面特定位点相结合。

转化DNA被酶解:吸附位点上的DNA被核酸内切酶分解成适当大小DNA片段。

单链DNA进入宿主细胞:外源DNA片段与受体细胞核染色体组发生同源配对、交换、取代,形成杂合DNA区段。

染色体DNA复制、分离:受体菌染色体组进行复制与分离。

形成转化子:细胞分裂后,一个子细胞为转化子,另一个子细胞为非转化子。

12.答案转化:受体菌直接吸收外源DNA片段,通过交换,并把它整合到自己基因组中,再经复制就使自已变成一个转化子。

转化的必要条件:

烯醇式次黄嘌呤

DNA第一次复制时HK与C配对。 DNA第二次复制时C与G配对。 使原来

,从而引起突变。

5.答案5-BU是T的代谢类似物。当把微生物培养在含5-BU培养液中时,细胞中一部分新合成的DNA5-BU以酮式存在时可与A配对。的T被5-BU所取代。

而以烯醇式存在时可与G配对。使碱基对由原来AT→GC对。

5-BU的掺入也可使G=C回复到A=T。 5-BU只对正在进行新陈代谢和繁殖的微生物才起作用。而对休止细胞、游离噬菌体粒子或离体DNA分子都不起作用。

6.答案紫外线的诱变机制:使同链DNA相邻嘧啶间形成嘧啶二聚体,引起DNA双链扭曲变形,阻碍碱基正常配对,从而引起突变或死亡。

光复活作用:把经紫外线照射后的微生物立即置可见光之下,可明显降低其死亡率的现象。

光复活作用机制:在暗处,光激活酶与胸腺嘧啶二聚体结合形成复合物,在可见光下,此酶利用可见光提供能量,将二聚体拆开,酶从复合物中释放出来。

7.答案理论依据:凡能引起回复突变的因素,一般也能引起正向突变。凡有致突变效应的因素,一般都有致癌效应,因此艾姆斯试验利用微生物营养缺陷型的回复突变检测样品中的化学致癌剂。

主要步骤:将样品与鼠肝匀浆保温,吸入滤纸片中,

-将滤纸片置于含有鼠伤寒沙门氏菌的his菌株的基本培

养基上,保温后观察结果。

实践意义:广泛用于检测食品、饮料、药物、饮水等试样中的致癌物,此法快速、准确、费用省。

8.答案制霉菌素属于大环内酯类抗生素,可与真菌细胞膜上的甾醇作用,从而引起细胞膜的损伤。

野生型细胞在基本培养基上能生长繁殖,故可被制霉菌素杀死,达到淘汰野生型的目的。

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外源DNA:一般分子量为转化率最高。

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。呈质粒形式DNA点两侧之一少数宿主基因(gal基因或bio基因)连接到噬菌体DNA上,(而噬菌体一般也将相应一段DNA留 在宿主染色体上)形成部分缺陷噬菌体(λdgal或λdbio)。

LFT产生原因: 由于不正常切离的频率极低(~10-5),因此裂解物中所含部分缺陷噬菌体的比例极低(10~10),故这种裂解物称低频转导裂解物。

17.答案转导:通过完全或部分缺陷噬菌体作为媒介,把供体菌DNA小片段携带到受体菌中,通过交换与整合,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。

普遍转导:通过完全缺陷噬菌体对供体菌任何DNA小片段的误包,使受体菌获得供体菌的部分遗传性状。

局限转导:通过部分缺陷温和噬菌体把供体菌少数特定基因携带至受体菌,从而使受体菌获得部分供体菌的遗传性状。

18.答案当Hfr和F-菌株发生接合时,Hfr的①染色体双链中的一条链在F因子的oriT处(转移起始区)发生断裂;②DNA转移也从 oriT处开始,整段线状染色体(单链)以5'端引导,等速转移至F细胞;③这一过程全部完成约需100分钟;④这么长线状DNA常常在转移过程中发生断裂;⑤由于F因子的主要部分(tra区,与接合有关)位于线状DNA末端,因而进入F细胞机会极少,故F变成F机会也极少。

19答案Hfr菌株和F-菌株接合后重组频率比F+与F-接合后重组频率高出数百倍;

F+与F-接合后,F-变为F+,而Hfr与F-接合,大多数情况下F仍是F。

20.答案

转性 F-菌株变成F+菌株 转移供体菌基因 ---+

---4

-6

受体菌必须处于感受态,例如利用CaCl2处理E.coli,即可使其呈感受态。

13.答案转化:受体菌直接吸收外源DNA片段,通过交换,把它整合到自己基因组中,再经复制就使自己变成一个转化子。

转染:用噬菌体或其他病毒的DNA(或RNA)去感染感受态的宿主细胞,并进而产生正常的噬菌体或病毒后代。

转染与转化不同之处: 没有提供遗传基因的供体菌。

中间不发生任何遗传因子的交换或整合。 不产生具有杂种性状转化子。

14.答案转导:通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体作为媒介,把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中,通过交换与整合,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。

转染:用噬菌体或其他病毒的DNA(或RNA)去感染感受态的宿主细胞,并进而产生正常的噬菌体或病毒后代。

转染与转导不同之处: 没有提供遗传基因的供体菌;不需要噬菌体作为媒介;中间不发生任何遗传因子的交换。

15.答案诱导双重溶源菌: 用外界理化因子处理溶源菌,使其发生高频裂解。

部分缺陷噬菌体产生: 当双重溶源菌(在宿主染色体上同时整合λ与λdgal)被诱导时,λ与λdgal两种 -dgal噬菌体同时获得复制(这是由于正常λ的基因补偿F+与Fλ接合 F-获得F因子全部遗传性状所缺失部分基因功能)。

Hfr与F-接合 F-菌株一般不发生转性 F-菌株变成次生F'菌株 F-获得Hfr的部分染色体基因HFT裂解物产生原因: 由双重溶源菌所产生的裂F'与F-接合 解物中含等量λ和λdgal粒子称为HFT(高频转导)裂解物。

16.答案诱导溶源菌: 用外界理化因子处理溶源菌,使其发生高频裂解。

部分缺陷噬菌体形成: 当溶源菌因诱导而被裂解时,有极少数前噬菌体发生不正常切离,结果将插入位

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F-获得F'因子及其上携带的少数染色21.答案若以质粒DNA或噬菌体DNA作为载体时: 重组载体通过转化(或转染)进入E.coli感受态细胞;用电穿孔法将重组载体DNA直接导入E.coli细胞(不需制备感受态细胞)。

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