预防医学专业《流行病学》实习指导
实习六 公共卫生应急案例讨论及环境消毒效果评价
一、目的：
1.通过案例讨论和观看录像，学习突发公共卫生事件的现场处置方法和步骤，包括个人防护、样品采集、现场检测和卫生处理等操作技能；
2.掌握常用消毒剂的配制方法、消毒方法、验证消毒剂对空气和一般物体表面自然菌的消毒效果。 二、时间：4学时。 三、内容
（一）公共卫生应急案例讨论
某年某月某日某乡镇卫生院收治一名病人，该病人症状为喉咙痛、发烧、腋下淋巴结肿痛，该症状疑似鼠疫病人，加之该病人从事皮毛收购工作，最近又曾去过牧区，所以医生判断可能为鼠疫感染者，并第一时间向当地疾控中心报告。当地疾控中心接到报告后迅速报告给当地卫生局和市级地病中心，市级地病中心又上报给本市卫计委和省级地方病防治研究中心，省级地方病地方病防治研究中心又立即上报给省级卫计委。省级卫计委高度重视，要求省市县三级地方病防治中心和疾控中心立即组成鼠疫防控应急小组赶赴现场。市级地病中心在做好疫情报告的同时第一时间启动了突发卫生公共事件应急机制，组成应急小组，全体应急人员迅速集结完毕赶赴现场，开始应急处置。 思考题：
1.应急小组应包括哪些人员？
2.应急小组进入现场后应按何种顺序采取应急处置？请将下列事件进行合理排序。你认为还有没有需要补充程序？
A.将该乡医院设置为警戒区，医院周围拉起警戒线防止无关人员进入； B.全体应急小组成员在进入疫区前做好个人防护；
C.消杀人员配置5％来苏儿消毒液或含氯制剂，并配置0.05％菊酯类灭蚤液； D.对隔离区和疫点进行全面消毒和灭蚤；
E.流行病学组进入现场对患者进行流行病学调查及体征检查；
F.流调材料及样品消毒后密封保存，流调人员进行全身消毒后离开现场； G.流调人员告知检验人员的取材和部位； H.检验人员对患者进行样本采集；
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I.将采集到的血液、淋巴液、痰、咽分泌物等装入送检盒，装入外包装，外包装消毒后由送检车送入实验室检验； J.检验人员对患者陪同者取样； K.检验人员全身消毒后离开现场；
L.流调组留下一组协助医生进行首次特效药治疗，其他流调小组继续对密切接触着调查和流行病学追踪；
M.所有应急小组人员严格进行全身表面消毒后退出现场； N.所有应急小组人员严格按规定程序脱防护服； 3.防护服应该按怎样的穿脱顺序进行？
4.对环境消毒应按怎样方向进行？先上还是先下？先室内还是先室外？
5.流行病学组应该调查哪些内容？
（二）消毒剂的配制、消毒及消毒效果鉴定试验 1.消毒剂：来苏儿 2.实验器材 （1）喷雾器
（2）稀释液：胰蛋白胨生理盐水溶液（TPS） （3）培养基：胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）
（4）规格板：不锈钢材质，中央5.00cm×5.00cm的空格为采样部位 （5）无菌棉试 （6）电动混匀器
（7）容积为15ml的血糖管 3.试验步骤：
（1）消毒剂的配制，在使用现场，配制5％来苏儿。
（2）在物体表面（桌面、台面或门等）用规格板标定两个相邻区域分别为消毒前采样区和消毒后采样区；
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（3）将无菌棉试在含有10ml稀释液的血糖管中浸湿，于管壁上挤干，在消毒前采样区横竖往返8次涂抹取样，然后无菌操作将采样端剪入原血糖管，电动混匀20秒或手掌震打200次，适当稀释，做阳性对照组样本。 （4）同时采用自然沉降法，用TSA检测空气中自然菌数量；
（5）将配制好的消毒剂注入喷雾壶中对室内空气、墙壁、门窗、桌椅、衣柜、地面等表面进行全面喷雾消毒；
（6）检测人员进入室内检测前要用相同的消毒剂对全身进行消毒； （7）在实验区（消毒后采样区），同步骤（2）取样，做为实验组样本。 （8）同时采用自然沉降法，用TSA检测空气中自然菌数量；
（9）将平面采集的两组样本各取1.0ml TSA倾注法接种平皿，每个样本设一个平行对照实验，37℃培养48小时，每日观察并记录最终结果。 （10）空气中采集的样本，每个样本设一个平行对照实验，直接放入37℃培养48小时，每日观察并记录最终结果。 （11）本次试验未用完的中和剂溶液、稀释液、棉试、培养基等分别作为阴性对照。
对照组活菌浓度平均值-实验组活菌浓度平均值平均杀灭率= 对照组活菌浓度平均值 ×100％ （结果取小数后两位，第三位不进位，除给出平均值还应写出重复实验中所得的最高值和最低值） 实验结果判定
计算各样本的平均杀灭率（阴性对照组无菌生长，阳性对照组有较多菌生长，消毒样本的平均杀灭对数值≧1.00，判定为消毒合格） 附：
1.TSA（胰蛋白胨大豆琼脂培养基）配方
胰蛋白胨1.5％，大豆蛋白胨0.5％，氯化钠0.5％，琼脂1.6％，蒸馏水配置，pH6.8~7.2,121℃灭菌20分钟。 2.TPS（胰蛋白胨生理盐水）配方
胰蛋白胨1.0g，氯化钠8.5g，900ml蒸馏水溶解，调pH6.8~7.2,补水至1000ml，121℃灭菌20分钟。
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