生物化学期末复习题------ 答案

成内膜内外的电化学势梯度(由质子浓度差产生的电位梯度)。

4)线粒体F1-F0-ATPase复合物能利用ATP水解能量将质子泵出内膜,但当存在足够高的跨膜质子电化学梯度时,强大的质子流通过F1-F0-ATPase进入线粒体基质时,释放的自由能推动ATP合成。

30. NADH?H+穿梭进入线粒体的方法和机制?

答:甘油酸-3-磷酸穿梭途径,苹果酸-天冬氨酸穿梭途径

(1.磷酸甘油穿梭系统:这一系统以3-磷酸甘油和磷酸二羟丙酮为载体,在两种不同的α-磷酸甘油脱氢酶的催化下,将胞液中NADH的氢原子带入线粒体中,交给FAD,再沿琥珀酸氧化呼吸链进行氧化磷酸化。因此,如NADH通过此穿梭系统带一对氢原子进入线粒体,则只得到2分子ATP。

2.苹果酸穿梭系统:此系统以苹果酸和天冬氨酸为载体,在苹果酸脱氢酶和谷草转氨酶的催化下。将胞液中NADH的氢原子带入线粒体交给NAD+,再沿NADH氧化呼吸链进行氧化磷酸化。因此,经此穿梭系统带入一对氢原子可生成3分子ATP)

31. tRNA的三级结构形状? 答:倒L型 32. hnRNA是指什么 ?

答:最初转录生成的RNA称为不均一核RNA3 33. 酶的专一性有哪几种?

答:1.结构专一性 2.立体异构专一性:a.旋光异构专一性 b.几何异构专一性 34. 丙二酸是琥珀酸脱氢酶的什么类型抑制剂? 答:竞争性抑制剂 35. 有机磷农药致中毒机理?

答:这些有机磷化合物能抑制某些蛋白酶及酯酶活力,与酶分子活性部位的丝氨酸羟基共价结合,从而使酶失活。这类化合物强烈地抑制对神经传导有关的胆碱酯酶活力,使乙酰胆碱不能分解为乙酸和胆碱,引起乙酰胆碱的积累,使一些以乙酰胆碱为传导介质的神经系

统处于过渡兴奋状态,引起神经中毒症状。 36. Sanger试剂是指什么?

答:二硝基氟苯(DNFB\\FNDB)

37. 参与EMP途径激酶有哪些?比如葡萄糖激酶、己糖激酶、果糖磷酸激酶、丙酮酸激酶等?哪些步骤不可逆?产生ATP和NADH+H步骤是哪些?

答:参与EMP途径激酶有己糖激酶,磷酸果糖激酶,磷酸甘油酸激酶,丙酮酸激酶。磷酸果糖激酶,磷酸甘油酸激酶,丙酮酸激酶参与的过程不可逆。产生ATP和NADH+H步骤是磷酸甘油酸激酶,丙酮酸激酶。

38.糖原中一个糖基转变为2分子乳酸,可净得几分子ATP? 答:2分子ATP

39. 多核苷酸之间的连接方式如何? 答:通过3ˊ5ˊ磷酸二酯键相连 40. 酶的特异性是指什么?

答:酶的特异性是指酶对它所催化的反应以及底物结构有严格选择性,一种酶只对一种物质或一类结构相似的物质起作用。

41. 竞争性可逆抑制剂、非竞争性可逆抑制剂、不可逆抑制剂和反竞争性可逆抑制剂的作用示意图?

答:图见P370,P373

42.利用稳态法推导米氏方程时,引入了的假设是什么?快速平衡法呢? 答:酶的中间复合物学说

43. 作为乙酰CoA羧化酶的辅酶的维生素是哪个? 答:泛酸(B5)

+

+

44. 真核生物mRNA的帽子结构中,mG如何与多核苷酸链连接? 答:mG经焦磷酸与mRNA的5ˊ末端核苷酸相连 45. TCA循环中发生底物水平磷酸化的化合物有哪些? 答:琥珀酰-CoA→琥珀酸

46. 米氏方程是什么?告诉你底物浓度,反应速度等如何求Km或Vmax?

答:v=(Vmax×[S]) /(Ks+[s])或者(Vmax×[S]) /(Km+[s])。分别将两组数据的V和【S】分别带入(Vmax×[S]) /(Km+[s])中,联立方程组即可得到Km和Vmax 47. 蛋白质α螺旋要点? DNA双螺旋要点?氢键在稳定这两种结构中的作用? 答:α-螺旋的结构要点:

①肽链以螺旋状盘卷前进,每圈螺旋由个氨基酸构成,螺圈间距(螺距)为;

②螺旋结构被规则排布的氢键所稳定,氢键排布的方式是:每个氨基酸残基的N—H与其氨基侧相间三个氨基酸残基的C=O形成氢键。这样构成的由一个氢键闭合的环,包含13个原子。因此,α-螺旋常被准确地表示为螺旋。

螺旋的盘绕方式一般有右手旋转和左手旋转,在蛋白质分子中实际存在的是右手螺旋。 DNA双螺旋的结构要点:

1. 两条反向平行的多核苷酸围绕同一中心轴相互缠绕;两条链均为右手螺旋。

2.嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内测。磷酸与核糖在外侧,彼此通过3ˊ,5ˊ-磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。碱基平面与纵轴垂直,糖环的平面则与纵轴平行。多核苷酸链的方向取决于核苷酸间磷酸二酯键的走向,习惯上以Cˊ3→Cˊ5为正向。两条链配对偏向一侧,形成一条大沟和一条小沟。

3.双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻的碱基对之间相距的高度,即碱基堆积距离为,两个核苷酸之间的夹角为36度。因此,沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸。每一转的高度为. 4.两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相联系而结合在一起。A只能与T相配对,形成两个氢键;G与C相配对,形成3个氢键。 48. 谷胱甘肽和酪氨酸的化学结构式?

7

7

答:P168 P126

49. 还原型谷胱甘肽及巯基乙醇与二硫键反应的比例关系? 答:1:2

50. 已知DNA的260/280值为,RNA的260/280为.今有一不含蛋白等杂质的核酸纯品,其260/280值为,是问一克该样品中RNA和DNA各含多少?(注:1OD260的DNA为53微克,1OD260的RNA为40微克)

51. 现有五肽,在280nm处有吸收峰,中性溶液中朝阴极方向泳动;用FDNB测得与之反应的氨基酸为Pro; carboxy-peptidase进行处理,的质地一个游离出来的氨基酸为Leu; 用胰凝乳蛋白酶处理得到两个片段,分别为两肽和三肽,其中三肽在280nm处有吸收峰;用CNBr处理也得到两个片段,分别为两肽和三肽;用胰蛋白酶处理后游离了一个氨基酸;组成分析结果表明,五肽中不含Arg.试定该短肽的氨基酸序列. 答:Pro-Met-Trp-Leu-Lys

52.举出三种蛋白质分离方法,原理、应用。

答:1. 1、透析与超滤。透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。常用的半透膜是玻璃纸,火棉纸(celloidin paper)和其它改型纤维素材料。超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。

2. 凝胶过滤法。是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。蛋白质溶液加于柱之顶部,任其往下渗漏,小分子蛋白质进入孔内,因而在柱中滞留时间较长,大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出,因此不同大小的蛋白质得以分离。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶(Sephadex gel)和琼脂糖凝胶(agarose gel)。

3. 离子交换层析法。离子交换剂有阳离子交换剂(如:羧甲基纤维素;CM-纤维素)和阴离子交换剂(二乙氨基乙基纤维素;DEAE等,当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改变pH或离子强度办法将吸附的蛋白质洗脱下来。主要有离子交换层析,凝胶层析,吸附层析及亲和层析等,其中凝胶层析可用于测定蛋白质的分子量。 蛋白偶联的受体及其信号传导。

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