内蒙古第四医院 检验科 BIO-RAD iCycler荧光编号：CG-JY-Sop-12 定量PCR检测仪的使用、日期：2009年7月1日 维护及校准标准操作程版本：2009-1 序 共2页 1.目的：确保该仪器正确使用及正常运作 2.负责人：王宇飞
3.操作程序：
3.1接通电源，打开iCycler扩增仪、蓄电池及电脑的开关。 3.2扩增仪预热至少30min。
3.3从开始菜单中选择Icycler，进入循环编辑。
3.4如使用已编辑好的循环条件，点Protocol Library，点View Protocol，双击目录中的Icycler选择您的循环名称。如新编程序则点Edit，编辑、命名后保存。
3.5点View plate Setup选择您的反应管板面设置。如重新编辑则点Edit。荧光性Flurorescence选择Fam系统，命名后保存。 3.6 在View Plate Setup窗口下点Run，在Run Prep
窗口下检查循环条件及反 应
管板面设置文件名后，输入反应体系，点Begin Run循环开始。 3.7循环状态时可在Run Time central中查看运行状况。
3.8循环结后，点PCR View/Save Date，在Data Run File栏中输入结果文件名后点save键保存。
3.9返回PCR Quantification窗口，在Base Line栏中选择PCR Base Line Subtraction；在Threshold cycle calculation栏中选择2到15个循环， 20倍方差，点Recalculate键重新分析。
3.10如果为定量PCR，在文件分析模式下点PCR Standard Curve显示标准曲线及标准品拟合度。
3.11返回PCR View/Save Date窗口，在Viewing栏中选Threshold cycle可显示CT值，选Calculated Concentration可显示标本拷贝数，选Standard Quantities可显示标准品拷贝数。
3.12使用完毕后关闭电源。
4.维护程序：
4.1控制iCycler的电脑必须专用，电脑的控制程，信息收集、计算软件不得改变设置
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或删除；不能确定无病毒的软件不得上机运行。
4.2电脑中保存的检测结果占用较大内存时应及时拷贝另存。
4.3设备周围应有足够空间便于空气流动散热，环境温度高于25℃时应开启室内空调。 4.4放入或取出反应管时注意轻柔推拉扩增仪上盖，防止过强的振动造成光路改变。 4.5每周二用棉棒蘸无水乙醇清洁扩增仪加热槽的96孔板。
5.校准
核酸扩增荧光检测仪为复杂精密仪器，其校准工作需由专业工程师进行。除与仪器厂家达成协议定期校准以外，以实验判断仪器校准状态也可为何时进行仪器校准提供信息。通过对室内质控图的分析，我们可以及时发现系统误差的出现。经过分析排除了试剂和人员误差后，应怀疑是否仪器出现了检测偏差需要校准。 注意事项：
a）仪器应放置在水平坚固的平台上，外界电源系统电压要匹配，并要求有良好的接地线。
b）环境温度保持在20℃左右，湿度保持在40～60％左右。 c）仪器应配备功率≥3000W的稳压器。 d）仪器应定期清洁维护。
e）仪器使用时应严格遵守上述使用步骤。
6. SOP的变动程序:
本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，报上级负责人，如通过则公布实行。
所引用图表：
附表12. BIO-RAD iCycler荧光定量PCR检测仪的使用记录表 附表13.仪器维护记录表 编写人 王宇飞 批准人 张惠彬 生效日期 2009-7-1 46
内蒙古第四医院 检验科 编号：CG-JY-Sop-13 日期：2009年7月1日 UPS使用标准操作程序 版本：2009-1 共1页 1.目的：保证UPS的安全使用
2.范围：本实验室使用的C2K-2KVA型UPS。 3.负责人：王宇飞 4.操作程序：
4.1 接市电UPS开机
4.1.1 确定电源配接正确后，先将后盖板的旁路断路器扳至ON，此时风扇会转，UPS经由旁路
对负载供电，此时UPS工作于旁路模式下。
4.1.2 持续按开机键0.5秒以上进行开机，即开启逆变器。
4.1.3 开机时UPS先进行自检，此时面板上负载指示灯会亮，并逐一熄灭，几秒钟后逆变指示
灯亮，旁路指示灯熄灭。到此，UPS已处于逆变模式一运行。 4.2 未接市电UPS直流开机
4.2.1 无市电输入，按开机键0.5秒以上启动UPS。
4.2.2 启动过程中UPS的动作与接市电时相同，只是市电指示灯不亮，电池指示灯亮。 4.3 有市电时UPS关机
4.3.1 持续按关机键0.5秒以上，进行关机，即关闭逆变器。
4.3.2 关机时UPS进行自检，此进负载指示灯会全亮，并逐一熄灭，逆变指示灯熄灭，旁路指
示灯会亮，此时UPS工作于旁路模式下。
4.3.3 以上执行完关机后，UPS仍有输出，若要使UPS不输出，只要将市电断开即可。此时UPS
会先进行自检，负载指示灯会全亮并逐一熄灭，最后面板无显示，UPS无输出电压。 4.4无市电时UPS 直流关机
4.4.1 持续按关机键0.5秒以上，进行关机。
4.4.2 关机时，UPS会先进行自检，此时负载指示灯全亮并逐一熄灭，最后面板无显示，UPS
无输出电压。
编写人 王宇飞 批准人 张惠彬 生效日期 2009-7-1 47
内蒙古第四医院 检验科
可移动紫外灯使用维护标准操作程序 编号：CG-JY-Sop-14 日期：2009年7月1日 版本：2009-1 共1页 1.目的：保证紫外灯的灭菌效果。
2.范围：本实验室使用的可移动紫外灯 3.负责人：王宇飞 4.操作和维护程序：
接通电源即可使用可移动紫外灯；每星期清洁紫外灯架的外表，去除尘埃；用75％酒精棉球擦拭紫外灯（清洁时应断开电源）。记录紫外灯的使用情况，定期请医院预防保健科的人员进行紫外灯灭菌效果的监测，如不合格则更换新的紫外灯管。
5. SOP的变动程序：
本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，报上级负责人，如通过则公布实行。 编写人 王宇飞 48
批准人 张惠彬 生效日期 2009-7-1