答案：机体抗肿瘤的免疫机制包括非特异性抗肿瘤免疫和特异性抗肿瘤免疫。前者包括补体的溶细胞作用以及NK细胞、巨噬细胞和??T细胞等非特性细胞的杀瘤作用；后者包括CD4Th1、CD8T细胞介导的细胞免疫应答和CD4Th2 细胞辅助B细胞产生抗肿瘤抗原的特异性抗体介导的体液免疫应答。值得注意的是：对于多数免疫原性较强的肿瘤，特异性免疫应答起主要作用，而且以T细胞介导细胞免疫机制为主，体液免疫机制并非重要； 对于免疫原性较弱的肿瘤，非特异性免疫可能具有更重要的意义。 3．肿瘤如何逃避机体免疫系统的攻击？
答案：与肿瘤细胞诱发机体产生免疫应答的情况相对应，分肿瘤细胞和机体免疫系统方面来阐述。其中肿瘤方面包括：肿瘤抗原性质的改变或被“封闭”、肿瘤抗原的加工、处理和提呈障碍、肿瘤细胞表面其他膜分子如MHC- I 、B7分子表达减少，而FasL分子表达增加，以及肿瘤细胞本身分泌一些抑制免疫应答的细胞因子；而机体免疫系统方面主要是免疫功能低下，缺陷或免疫耐受状态等。详见内容提要p？。 4．简述肿瘤的免疫学诊断和治疗原则。 答案：
（1）肿瘤的免疫诊断
主要是通过对肿瘤抗原的检测，辅助肿瘤的诊断，例如甲胎蛋白检测用于诊断肝癌。还可用于肿瘤的免疫组化检查和免疫成像诊断。
另外利用分化抗原的检测，能够对肿瘤细胞的诊断和分型
（2）肿瘤的免疫学治疗包括肿瘤的主动免疫治疗和被动免疫治疗。
肿瘤的主动免疫治疗：利用各种特异性肿瘤疫苗或应用卡介苗（BCG）等非特异性免疫调节剂激发机体免疫系统对肿瘤产生免疫应答。目前临床与科研中应用和研究的特异性肿瘤疫苗包括各种肿瘤细胞性疫苗、肿瘤抗原肽或基因修饰的APC疫苗、分子疫苗和DNA疫苗。
肿瘤的被动免疫治疗：给肿瘤患者输入各种免疫效应物质（抗体、免疫细胞、细胞因子等），使之发挥抗肿瘤效应。其中肿瘤的抗体靶向治疗就是利用针对肿瘤细胞表面的各种靶分子如TSA、TAA、某些细胞因子受体的抗体为载体，偶联各种抗肿瘤药物、放射性核素、酶或其他效应物质，达到特异性、高效性地杀伤肿瘤细胞；给肿瘤患者输入抗肿瘤的免疫细胞包括过继免疫治疗（包括输入TIL或LAK细胞）和免疫重建。而免疫重建如骨髓移植，不仅能够重建由于肿瘤、放疗、化疗所损伤的免疫系统，而且在同种异体骨髓（或造血干细胞）移植时，尚有移植物抗白血病（肿瘤）反应有利于清除肿瘤细胞。
第二十一章 免疫学检测原理
第一部分 学习习题
一、填空题
1．抗原抗体反应的最大特点是_________。
2．颗粒性抗原与相应抗体结合后，可以发生_________反应；可溶性抗原与相应抗体结合后，在比例合适的情况下，可以发生_________反应。
3．细胞因子的检测可以分为_________、_________、_________三类。 二、多选题
[A型题]
1．抗原-抗体反应所不具有的特征是：
A．分子表面的可逆结合 B．具有高度特异性
C．出现肉眼可见的反应需要适当的比例 D．二者结合后，立即出现可见反应
E. 二者反应受电解质、酸碱度和浓度的影响 2．检测可溶性抗原不能用：
A．ELISA B．单向琼脂扩散 C．直接凝集反应 D．反向间接凝集反应 E．协同凝集试验
3.不属于抗原抗体反应的是：
A. 酶联免疫吸附试验（ELISA） B．锡克试验
C．抗球蛋白试验 D．放射免疫分析法（RIA） E．E花环试验
4．乳胶妊娠诊断试验属于：
+
+
+
A．协同凝集反应 B．反向间接凝集反应 C．直接凝集反应 D．间接凝集反应 E．间接凝集抑制反应
5．下列免疫学测定方法敏感性最高的是： A．沉淀反应 B．凝集反应 C．ELISA D．放射免疫测定 E．补体结合试验 6．抗原抗体反应最适宜的PH值为：
A. 5—4.5 B．4.5—5 C．5—6 D．6—8 E．8—9
7．用免疫荧光技术间接法检测组织中的抗原，应将荧光素标记：
A. 抗原 B相应抗 C．抗免疫球蛋白抗体 D．抗原-抗体复合物 E．抗C3抗体
8．用ELISA双抗体夹心法检测抗原A时，固相载体的包被物是：
A. 酶标抗A抗体 B．未标记的抗A抗体 C．酶标抗原A D．未标记的抗球蛋白抗体 E．酶标抗球蛋白抗体
9．用免疫荧光技术直接法检测病原微生物时，荧光素应标记在：
A. 微生物上 B．抗人Ig抗体上
C．抗原-抗体复合物上 D.抗微生物抗体上
E．抗C3抗体上
10．诊断DTH的皮肤试验，在前臂内注射少量可溶性抗原后，观察时间为： A．10分钟 B.30分钟 C.6小时 D．12小时 E.72小时
11．可以用于对抗原进行免疫组化定位的方法是：
A．Northern Blot B．Western Blot C．溶血空斑试验 D．免疫荧光技术 E．混合淋巴细胞反应
12．不能刺激T细胞增殖分化的物质是：
A. 结核杆菌纯蛋白衍生物（PPD） B.刀豆蛋白A（Con A） C．植物血凝素（PHA） D．细菌的脂多糖（LPS） E．美洲商陆（PWM）
13．用ELISA双抗体夹心法检测血清中甲胎蛋白（AFP），应选择的固相包被物是：
A．已知AFP B．酶标记AFP C．抗AFP抗体 D．酶标记抗AFP抗体 E．待检血清 14．能够定量测定待检物的免疫学试验方法是： A．环状沉淀实验 B．单向琼脂扩散 C．抗球蛋白实验 D．补体结合试验 E．对流免疫电泳
15．用于检测细胞免疫功能的皮肤试验是： A．青霉素皮试 B．锡克试验
C．结核菌素试验 D．破伤风抗毒素皮试 E．白喉抗毒素皮试 [B型题]
A．Western Bloting B．细胞毒实验 C．溶血空斑实验 D．E花环实验 E．PHA淋巴细胞转化实验 1．测T细胞数量
2．测定抗体生成细胞数 3．测定NK细胞杀伤活性
4．测定非特异性细胞免疫功能
A．测定Tc细胞的效应功能 B．IgG测定
C．SmIg测定 D．T细胞亚群测定 E．淋巴细胞转化实验 5．PHA可用于 6．免疫比浊法可用于 7．流式细胞仪可用于 8．细胞毒实验可用于 [X型题] 1．ELISA
A．酶与相应底物作用产生颜色
B．抗原或抗体可以特异性吸附于固相载体上 C．可以用酶标测定仪作定量分析 D．蛋白酶是其标记酶
E．双抗体夹心法可以检测未知抗体 2．能测定抗原的实验包括
A．絮状沉淀试验 B．间接凝集试验
C．火箭电泳 D．酶联免疫吸附试验 E．荧光免疫技术 三、名词解释 1．酶联免疫吸附试验 2．放射免疫分析法 3．免疫荧光技术 4．凝集反应 5．直接凝集反应 6．间接凝集反应
7．对流免疫电泳 四、问答题
1、从外周血分离淋巴细胞的方法有哪些？ 2、简述细胞毒试验的原理 3、简述细胞因子的检测原理
第二部分 参考答案
一、填空题 1．特异性
2．凝集、沉淀
3．免疫学检测法、生物活性检测法、分子生物学检测法 二、多选题 [A型题]
1. D 2. C 3.E 4.E 5.D 6.D 7.C 8.B 9.D 10.E 11.D 12 .D 13.C 14．B 15.C
[B型题]
1.D 2.C 3.B 4.E 5.E 6.B 7.D 8.A [X型题]
1.ABCD 2.ABCDE 三、名词解释
1．酶联免疫吸附试验（ELISA）：将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面上进行，用洗涤方法使固相上的抗原抗体复合物与液相中游离抗原或抗体分开。用于抗原或抗体的定量检测。
2．放射免疫分析法（RIA）：用放射性核素标记抗原或抗体进行的免疫学检测。常用于微量抗原或抗体的定量检测。 3．免疫荧光技术：用荧光素与抗体连接成荧光抗体、再与待检标本中的抗原反应，在荧光显微镜下观察抗原抗体反应的部位，用于抗原的定位检测。
4．凝集反应：颗粒性抗原（如细菌、细胞等）与相应的抗体结合后形成肉眼可见的凝集块。 5．直接凝集反应：将细菌或红细胞与相应抗体直接反应，出现细菌或红细胞凝集的现象。
6．间接凝集反应：将可溶性抗原包被（结合）在无关载体颗粒表面，再与相应抗体反应后，出现载体颗粒凝集的现象。
7．对流免疫电泳：在琼脂糖电泳凝胶的正负极端打孔，并分别加入抗体和抗原，在电场的作用下，抗体和抗原作定向扩散，其中抗体由于电渗作用，扩散方向为正极向负极，而抗原则由于电泳作用，扩散方向为负极向正极，在二着比例适当的位置出现沉淀线。用于抗原或抗体的定性检测。 四、问答题
1. 从外周血分离淋巴细胞的方法有哪些？ 答案
（1）依靠淋巴细胞物理特征的分离方法
* 葡聚糖-泛影葡酸（Ficoll）等密度梯度离心法，根据淋巴细胞的比重将其与其他血细胞成分分离。 * 尼龙绵分离法：根据B淋巴细胞粘附于尼龙棉的特性，将B细胞与T细胞分开。
（2）依靠表面标记的分离方法
* E花环分离法：T细胞表面的CD2是绵羊红细胞（SRBC）受体，能使T细胞与SRBC结合形成E花环，因花环形成后比重变大，采用密度梯度离心即可将T细胞从其他淋巴细胞中分离出来。
* 免疫磁珠分离法：将某种表面标记特异性抗体包被在磁性微珠上，与磁珠交联的抗体能够特异性结合具有这种表面标记的细胞结合，然后用强磁场可将具有这种表面标记的细胞分离出来。
* 流式细胞术分离法：利用各种荧光素标记的表面标记特异性抗体，使不同表面标记的细胞结合上不同的荧光素，借助荧光活化细胞分选仪（FACS）将各种细胞分离开来。 2. 简述细胞毒试验的原理
答案：
（1）对于可溶性物质（如抗体、补体、肿瘤坏死因子等）导致的靶细胞破坏，可以采用简单的染色法来进行检测，原理是当靶细胞破坏时，其胞膜完整性被破坏，当用染料（如台盼蓝、酚红、结晶紫等）染色时，损伤的细胞浆将会着色，而未受损的靶细胞因胞膜完整，会拒染。结合光密度的测定，能够进行定量检测。
（2）对于效应细胞（如CTL、NK等）对靶细胞的损伤，可以采用同位素释放法、酶释放法来进行测定。其原理如下： 515151
* Cr释放法：用Na2CrO4标记靶细胞，若效应细胞损伤靶细胞，Cr将释放进入上清，检测上清中的放射活性，即可计算出效应细胞对靶细胞的杀伤活性。
* 酶释放法：靶细胞内具有多种酶，当靶细胞受损时，这些酶将从胞内释放至上清，通过上清中酶活性的检测，可以计算出效应细胞杀伤靶细胞的活性。最常用的酶是乳酸脱氢酶。
（3）细胞凋亡检测法：某些因素能够诱导靶细胞发生凋亡，也是免疫应答杀伤靶细胞的一种形式。凋亡是细胞内源性DNA酶被被激活，将染色体DNA酶解，使细胞发生程序性死亡。可以采用DNA ladder法、TUNEL法等方法来检测靶细胞的凋亡事件，从而评估对靶细胞杀伤的效应。 3. 简述细胞因子的检测原理 答案：见“网络课件内容”
第二十二章 免疫学在医学中的应用
第一部分：学习习题
一、 填空题：
1．习惯上人们将________、________和________称为常规疫苗，将________称为第二代疫苗，而将________称为第三代疫苗。
2．免疫治疗根据其治疗效果可分为________疗法和_______疗法。根据其免疫学原理可分为_________治疗和__________治疗。
3．特异性免疫的获得方式有自然免疫和人工免疫两种。人工免疫是人为地使机体获得特异性免疫，包括_________和____________。
二、多选题 [A型题]
1．下列哪项属于人工主动免疫？ A.接种卡介苗预防结核
B.注射免疫核糖核酸治疗恶性肿瘤 C.静脉注射LAK细胞治疗肿瘤 D.注射丙种球蛋白预防麻疹