湘雅医学院生物科学与技术学院07 A卷
一、填空题： （每空1分，共20分）1. 分子生物学是从 分子水平 研究生命现象、生命的本质。生命活动及其规律的科学。2. 人类基因组包括两个部分DNA即 染色体DNA （或单倍体DNA）（核内DNA 0.5分） 和 染色体外DNA（线粒体DNA）（核外DNA0.5分） 。3. 主要的DNA修复方式： 重组修复 、 切除修复 和SOS修复。4. 真核生物转录水平的调控主要是通过 顺式作用元件 、 反式作用因子 和RNA聚合酶的相互作用来完成。5. 可用于分析基因转录水平变化的技术有Northern blot (DNA芯片)（核酸分子杂交0.5分） 和 RT-PCR 。6. 反义RNA 是指能与mRNA互补配对的RNA分子。7. 基因突变主要是DNA一级结构的改变，其分子机制可以是替换、 插入 或 缺失 等。8. 基因治疗的策略： 基因添加（增补） 、 基因干预 、 基因置换 、导入自杀基因、基因修饰。9. 在特定环境信号刺激下，有些基因的表达表现为开放或增强，这种表达方式称为诱导表达 ，相反，有些基因的表达表现为关闭或下降，这种表达方式称为 阻遏表达 。10. 写出三种真核细胞转染的方法 磷酸钙共沉淀法 、 电穿孔法 、 DEAE葡聚糖法 、 显微注射法 、 脂质体介导法 。 二、单项选择题： （每题1分，共10分）
1.增强子的作用是 （ B ） A.增强DNA复制 B.增强基因转录 C.增强基因稳定性 D.增强RNA的稳定性 2.反式作用因子的激活方式不包括 （ D ） A.表达式调节 B.共价修饰 C.蛋白质相互作用 D.DNA成环
3.以下哪项不是目前使用的研究转录子组的主要方法 （ D ） A.基因芯片技术 B.表达系列分析 C.差异显示PCR D.Western blot
4.无义突变是 （ B ） A.产生另一种氨基酸序列不同的蛋白质 B.突变后产生缩短的多肽链 C.产生的一种氨基酸序列相同的蛋白质 D.突变毫无意义
5.质粒是 （ A ） A.环状双链DNA B.线性双链DNA C.环状单链DNA D.线性单链DNA 6.可检测基因拷贝数变化的是 （ C ） A.生物质谱技术 B.双向电泳 C.Southern blot D.RNAi
7.以下哪种因素不直接影响转录的是 （ D ） A.启动子 B.阻碍蛋白 C.基因激活蛋白 D.SD序列
8.限制性核酸内切酶可对 （ A ） A.双链DNA的特异部位进行切割 B.单链DNA的特异部位进行切割 C.多肽链的特异部位进行切割 D.mRNA的特异部位进行切割
9.以下哪项是原核生物基因组的结构特点 （ C ） A.由DNA或RNA组成 B.有单链、双链之分 C.操纵子结构 D.与组蛋白结合
10.以下哪项属于启动子和上游启动子元件 （ C ） A.内含子 B. 外显子 C.TATA盒 D.终止子
三、简答题:（每题5分，共40分）
1. 简述基因组的概念
一种生物（1分）的一整套（1分）遗传信息（1分）的遗传物质（1分）的总和（1分）。
或者一套（1分）完整（1分）单倍体（1分）的遗传物质（1分）的总和（1分）。
或者基因组泛指（1分）一个细胞（1分）或病毒（1分）的全部（1分）遗传信息（1分）。
2.简述乳糖操纵子的结构 有三个结构基因Z、Y、A，（1分），启动子（P）、（1分），操纵元件（O）、（1 分） CAP结合位点、（1 分），启动子、操纵元件和CAP结合位点一起构成糖操纵子的调控区、（1 分）（如果不写调控区，写I基因是调节基因，编码阻遏蛋白。可给1分）。
3.什么是SOS修复?
指DNA损伤严重时，应急而诱导产生的修复作用，称为SOS修复。（1）当DNA双链发生高密度大片段损伤, 原有的DNA聚合酶活性减低。（1）细胞紧急启动应急修复系统，诱导产生新的DNA聚合酶或修饰原有的DNA聚合酶。（1） 这种新的DNA聚合酶或修饰的DNA聚合酶活性低， 识别碱基的精度差，无校对功能，（1）因此易造成DNA复制错误，甚至引起基因突变。（1）
4.什么是错义突变?
由于DNA分子中碱基的取代（1）,经转录产生mRNA后,相应的密码子发生了变化1分, 使决定某一氨基酸的密码子变为另一种氨基酸的密码子, （1） 能使它所编码的蛋白质的氨基酸组成和排列顺序都发生了改变1分。这种基因突变叫错义突变。（1）
5.What is RNA interference (RNAi) ? RNAi 即RNA干扰（涉）。（1）是将一段短双链的RNA 1分序列导入机体或细胞中, （1）诱导机体或细胞中与之有同源的序列mRNA发生降解，（1）导致基因的表达受到抑制,甚至表达受到完全抑制的现象。（1）
6.简述PCR的应用？
进行DNA 1分体外扩增1分 , 基因克隆 1分, 分析基因拷贝数1分, 基因诊断1分。 其他答案不计分。
7.What is gene therapy?
基因治疗（1分）是将目的基因1分导入靶细胞内（1分），成为宿主细胞遗传物质的一部分（1分），目的基因表达产物对疾病起治疗作用（1分）。
8.简述人类基因组计划的研究目标及研究内容
研究目标： 阐明构成人类的全部DNA的结构（1分）； 阐明基因的编码方式和分布特点（1分）； 理解基因及其调控序列之间的相互关系（1分）； 理解DNA全部序列所蕴藏的意义（1分）。
研究内容：完成遗传图谱、物理图谱、序列图谱、转录图谱分析（1分）。
四、论述题:（每题15分，共30分）
1.已知一个基因的cDNA序列，现在要把该基因插入质粒载体中，论述其基因克隆的过程。 获得目的基因（1分）.根据该基因的cDNA序列从cDNA文库中获得（1分）; 人工合成（1分）; 提取mRNA,RT-PCR扩增获得目的基因（1分）. 选择合适的载体(1分).DNA分子的体外连接(1分). 粘性末端法；平端连接（1分）;人工接头法;同聚体尾法;（1分）.将重组DNA导入宿主细胞(1分).用转化法（1分）; 转染法（1分）.目的基因的筛选和鉴定(1分).遗传学方法(或答抗生素法.或蓝白筛选) （1分）;免疫学方法; 核酸杂交法; PCR技术（1分）; 酶切鉴定.回答问题清晰（1分）.
2. 论述核酸分子杂交(Southern blot 和Northern blot)的基本原理及其在基因诊断中的应用。
核酸分子杂交是分子生物学研究的基础技术之一，从整体上可分为Southern blot和Northern blot两大类（1分）。
Southern blot用于基因DNA分子的检测（1分）。如果基因拷贝数发生变化（增多或减少），但基因序列没有改变，就可以根据基因序列合成探针（1分）；利用同源互补序列可以退火形成异源双链（1分）的原理，探测染色体上能与探针结合的DNA序列（1分）。 如果将两部分综合起来作答，需紧扣“探针”、“同源互补序列”、“异源双链”等关键点，如用“同源/互补序列”给1分；如答“不同来源的互补核酸序列”给1分）。 Southern blot在基因诊断中多用于检测特异性DNA的存在（1分），包括DNA片段的定位和测定分子量（1分）；进行限制性酶谱分析（1分）及基因突变分析（1分）。 Northern blot则用于RNA分子的检测，其原理和操作基本过程与Southern blot相似（1分）。在基因诊断中用于RNA的定性及相对定量（1分；如答“分析RNA相对水平、在转录水平上分析RNA等，给1分）分析。 回答问题清晰（1分） B卷题
一、 填空题： （每空1分，共20分）11. 主要的DNA修复方式：切除修复 、 重复修复 和 SOS修复（诱导修复） 。12. 真核生物转录水平的调控主要是通过 顺式作用元件（启动子） 、 反式作用因子（转录因子） 和RNA聚合酶的
相互作用来完成。13. 反义RNA是指能与 mRNA 互补配对的 RNA 分子。14. 基因突变主要是DNA一级结构的改变，其分子机制可以是替换、 插入 或 缺失（倒位） 等。5.Southern blot可用于检测DNA ，Northern blot可用于检测 RNA , Western blot可用于检测 蛋白质 。6.人类基因组计划要完成的图谱有 遗传图谱、物理图谱、序列图谱 和转录图谱。7.基因组学是指阐明整个 基因组（遗传物质） 的结构、结构与功能的关系以及基因之间相互作用的科学。8.在基因治疗中常用的抑制基因表达的方法是 反义RNA 、 RNAi（基因敲除） 、核酶或者三链DNA技术。9.基因诊断的主要技术有 核酸分子杂交 、 PCR扩增（RT-PCR）、 DNA序列测定、DNA芯片技术。 10.目前肿瘤基因诊断的主要策略有：检测肿瘤染色体异位及融合基因，检测癌基因和 抑癌基因 ，检测肿瘤相关病毒，检测 肿瘤标志物 或mRNA等。四、
二、 单项选择题： （每题1分，共10分） 1.能导致蛋白质翻译提前终止的基因突变是_B______
A．错义突变； B.无义突变； C．同义突变； D．移码突变；
2.可检测基因拷贝数变化的是 A
A. Southern blot B.双向电泳 C. 酵母双杂交 D. RNAi
3.生物质谱技术常用于 D 的研究中。
A.基因组学 B.RNA组学 C.转录子组学 D.蛋白质组学
4.限制性核酸内切酶可对__A_____
A双链DNA的特异部位进行切割 B.单链DNA的特异部位进行切割 C.多肽链的特异部位进行切割 D. mRNA的特异部位进行切割
5．遗传病的间接基因诊断是检测与致病基因连锁的____C______ A.基因突变 B.多态性 C.遗传标志 D.基因重排
6.以下哪项不是基因诊断的特点 D
A.高灵敏度 B.结果稳定 C.早期诊断 D.依赖表型改变
7.将特定的目的基因导入特定的细胞，通过定位重组，矫正原有的缺陷基因的基因治疗策略是 A
A.基因置换 B.基因添加 C.基因干预 D.基因修饰
8.在基因治疗中基因转移的生物学方法是以 B 作为基因转移系统， A.质粒载体 B.病毒载体 C.脂质体 D.粘粒
9.适合制备单链DNA的载体是 B
A.粘性质粒 B.M13噬菌体 C.逆转录病毒 D.腺病毒
10分子生物学是从 D 研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。 A.细胞水平 B.转录水平 C.翻译水平 D.分子水平
三、 简答题:（每题5分，共40分） 1. What is gene diagnosis?
基因诊断（1分）是利用分子生物学技术, 从DNA或RNA水平（1分）检测基因的存在（1分）、分析结构的变异和表达状态（1分），应用基因重组、PCR、核酸杂交、基因芯片的各种分子生物学技术对疾病或症状进行诊断（1分）。
基因突变（1分）指遗传物质发生的可遗传的变异（1分）。基因的核苷酸序列组成及数目发生改变（1分）。常涉及DNA的一级结构（1分）；其分子机制可以是替换，插入，缺失，重排等（1分）。
3. 简述切除修复的大致过程。
切除修复是修复DNA损伤最为普遍的方式。修复过程需要多种酶的一系列作用（1分），基本步骤如下：①首先由核酸酶识别（1分）DNA的损伤位点，在损伤部位的5'侧切开磷酸二酯键。不同的DNA损伤需要不同的特殊核酸内切酶来识别和切割；②由5'→3'核酸外切酶将有损伤的DNA片段切除（1分）；③在DNA聚合酶的催化下，以完整的互补链为模板，按5'→3'方向DNA链，填补已切除的空隙（1分）；④由DNA连接酶将新合成的DNA片段