3、饱和硼砂溶液:称取5.0g硼酸钠,溶于100ml热水中,冷却后备用. 4、对氨基苯磺酸溶液:4g/l,称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100ml20%盐酸中,置于棕色试剂瓶中混匀,避光保存.
5、盐酸萘乙二胺溶液:2g/l,称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100ml水中,混匀后,置于棕色试剂瓶中,避光保存.
6、亚硝酸钠标准溶液:准确称取0.1000g与硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解入500ml容量瓶中,加水稀至刻度,混匀。此溶液相当于200ug的亚硝酸钠.
7、亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准溶液5.0ml置于200ml容量瓶中,加水稀至刻度,混匀。此溶液相当于5.0ug的亚硝酸钠. (2)仪器、
分光光度计;小型绞碎机
四、实验步骤:
1.样品处理:
称取5.0g经绞碎混匀的香肠试样,置于50ml烧杯中,加12.5ml饱和硼砂溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约300ml将试样洗入500ml容量瓶中,与沸水浴中加热15min取出后冷却至室温,然后一面转动,一面加入5ml亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5ml乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置0.5h,除去上层脂肪,清夜用滤纸过滤,弃去初滤液30ml,滤液备用。
2.测定: 吸取
40ml
上述滤液与
50ml
帯塞比色管中,另吸取
0.00ml,0.20ml,0.40ml,0.60ml,0.80ml,1.00ml,1.50ml,2.00ml,2.50ml亚硝酸钠标准使用液(相当于0ug,1ug,2ug,3ug,4ug,5ug,7.5ug,10ug,12.5ug亚硝酸钠),分别置于50ml带塞比色管中。与标准管与试样管中分别加入2ml对氨基苯磺酸(4g/l),混匀,静置3—5min后各加入1ml盐酸萘乙二胺溶液(2g/l),加水至刻度,混匀,静置15min。用2cm比色杯,以零管调节零点,在波长538nm处测吸光度,绘制标准曲线比较,同时做试剂空白。
五、结果处理 1. 绘制标准曲线
9
吸光度值0.250.20.150.10.05y = 0.092xR2 = 0.9899 00.511.5标准使用液体积22.53吸光度值线性 (吸光度值)
02.结果计算
Ⅹ﹦m1×1000÷[m×﹙V2/V1﹚×1000] = 0.8913×1000÷[5.0×﹙40/500﹚×1000] =2.2283mg/kg
其中Ⅹ为样品中亚硝酸盐的含量;m为样品质量5g;m1为测定样液中亚硝酸盐的质量m1=0.082/0.092=0.8913(0.082为样品吸光度值);V1为样品处理液总体积500ml;V2为测定用样液体积40ml。
项目七:乳粉中蛋白质含量的测定
一、实验原理:
将样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分离,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨,再与硫酸结合形成硫酸铵,此过程叫做消化。加入碱液,使氨游离出来,在通过水蒸气蒸馏,使氨流出,用硼酸吸收形成硼酸铵溶液,再用盐酸标准溶液滴定,根据消耗的盐酸标准溶液的体积即可算出蛋白质的含量。
二、实验试剂:
40%氢氧化钠溶液,0.1当量的盐酸溶液,浓硫酸,2%硼酸溶液,硒粉,消化管,定氮仪,消化电炉,电子天平,移液管,量筒。
三、实验步骤:
1、干燥:将清洗后的消化管放入干燥箱中干燥至内外比均无水珠即可。 2、消化:秤取2克乳粉和0.5克硒粉放入消化管中,加入10毫升浓硫酸,密封好放在消化炉中加热消化45分钟,放冷后备用。
3、蒸馏:向消化管中加入50毫升40%氢氧化钠溶液和10毫升水,放在定
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氮仪的长管下关口伸到页面下,固定好。清洗好一个锥形瓶加入50毫升2%硼酸溶液,再加入2到3滴指示剂,放在