第三章 高效液相色谱分析
一、选择题
1. 在液相色谱分析中，提高色谱柱柱效的最有效的途径是（ A ）。 A. 减小填料粒度 B. 适当升高柱温 C. 降低流动相的流速 D. 降低流动相的粘度 2.下列检测器中属于液相色谱通用型的检测器的是（ C ）。
A．热导池检测器 B. 紫外检测器 C. 示差折光检测器 D. 电导检测器 3.一般而言，液相色谱最适宜的分析对象是（ B ）
A.低沸点小分子有机化合物 B.高沸点大分子有机化合物 C.沸点范围宽的化合物 D.极性范围宽的化合物 4. 在液相色谱分析中，下列那个不是流动相脱气的手段( A )。
A. 通氧气 B.超声波 C. 加热 D.抽真空 5. 在液相色谱中，范第姆特方程中的哪一项对柱效的影响可以忽略（ B ）。
A．涡流扩散项 B．分子扩散项
C．流动区域的流动相传质阻力 D．停滞区域的流动相传质阻力 6. 与气相色谱相比，在液相色谱中（ B ）。
A. 涡流扩散项很小，可忽略不计，速率方程式由两项构成 B. 分子扩散项很小，可忽略不计，速率方程式由两项构成
C. 传质阻力项很小，可忽略不计，速率方程式由两项构成 D. 速率方程式同样由三项构成，两者相同
7．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（ D ）。 A. 柱前压力高 B.流速比GC的快 C．流动相黏度较小 D.扩散系数小
8.对于反相液相色谱法，先出峰的物质为极性( B )的物质。 A. 小 B. 大 C. 不确定 D. 无先后 9.对于反相液相色谱法，是指流动相的极性( B )固定液的极性。
A. 小于 B. 大于 C. 等于 D. 以上都不是
10．在液相色谱中，为了改善分离的选择性，下列措施（ A ）是有效的？ A． 改变流动相种类 B． 改变固定相类型 C． 增加流速 D． 改变填料的粒度
11．吸附作用在下面哪种色谱方法中起主要作用（ B ）。 A． 液一液色谱法 B． 液一固色谱法 C． 键合相色谱法 D． 离子交换法
二、填空题
1.在液－液分配色谱中，对于疏水固定液采用 亲水 流动相，即流动相的极性____大于_____固定相的极性称为反相分配色谱。
2．在液－液分配色谱中，对于亲水固定液采用 疏水 流动相，即流动相的极性 ______小于_______固定相的极性称为正相分配色谱。
3.由液相色谱速率理论，提高柱效能地最有效途径是 减小粒径 。
4. 在反相色谱中， 流动相 的极性大于 固定相 的极性，分析物质的出峰顺序是极性 大 的先出峰，极性 小 的后出峰。
5. 液相色谱分析中，为改善复杂试样的分离效果，可采用 梯度洗提 方法，改变 流动相的极性 来实现。
6. 高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件之一，按其工作原理分为 往复式柱塞泵和 气动放大泵 两大类。
7. 高效液相色谱分析中，为避免固定液流失现象，一般采用__化学键合___固定相。 8. 高效液相色谱中的___梯度洗提____技术类似于气相色谱中的程序升温，不过前者连续改变的是流动相的___极性____，而不是温度。
三、判断题
1. 液相色谱流动相在使用前应先经0.45μm滤膜过滤。（?）
2. 在液相色谱法中，当流动相的线速度大于0.5cm/s时，纵向扩散项对色谱峰扩展的影响可以忽略。（?）
3. 在液液正相色谱中，极性小的先出峰。（?）
4. 通过改变流动相的极性，可以使沸点范围宽的试样在液相色谱中分离的效果更好。（?） 5.根据速率方程理论，当增大样品的分配比，会使色谱峰变窄。（?） 6.色谱柱的总分离效能指标，可选用分离度R。（?）
7.与GC相比，HPLC中，当流动相流速大于0.4cm/s时，其纵向扩散项可忽略。（?） 8.紫外吸收检测器是离子色谱法通用型检测器。 （?）
9. 离子色谱中，在分析柱和检测器之间增加了一个“抑制柱”，以降低洗脱液本底电导。
（?）
10. 示差折光检测器是属于通用型检测器，适于梯度淋洗色谱。 （ ? ）
四、简答题
1. 液相色谱法主要有几个类型？它们的保留机理是什么？
答：液-液分配色谱，是通过组分在固定相和流动相间的多次分配进行分离（溶解平衡）。
液-固吸附色谱，是通过组分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的（吸附平
衡）。
离子交换色谱，是通过组分与固定相间亲合力差别而实现分离的。 离子对色谱，通过对离子改变离子极性，从而实现不同溶解平衡。 离子色谱法，同离子交换色谱。 空间排阻色谱是利用凝胶固定相的孔径与被分离组分分子间的相对大小关系而分
离。
2．简述液相色谱流动相脱气的主要手段。 答：加热、抽真空、通惰性气体、超声波振荡 3. 试述化学抑制型离子色谱的基本原理。
答：例如在阴离子分析中，试样通过阴离子交换树脂时，流动相中待测阴离子（以Br为例）与树脂上的OH离子交换。洗脱反应则为交换反应的逆过程：
--
-式中 R 代表离子交换树脂。在阴离子分离中，最简单的洗脱液是NaOH，洗脱过程中OH离子从分离柱的阴离子交换位置置换待测阴离子Br。当待测阴离子从柱中被洗脱下来进入电导池时，要求能检测出洗脱液中电导的改变。但洗脱液中OH离子的浓度要比试样阴离子浓度大得多才能使分离柱正常工作。因此，与洗脱液的电导值相比，由于试样离子进入洗脱液而引起电导的改变就非常小，其结果是用电导检测器直接测定试样中阴离子的灵敏度极差。若使分离柱流出的洗脱液通过填充有高容量H型阳离子交换树脂的抑制柱，则在抑制柱上将发生两个非常重要的交换反应：
+
--
由此可见，从抑制柱流出的洗脱液中，洗脱液（NaOH）已被转变成电导值很小的水，消除了本底电导的影响；试样阴离子则被转变成其相应的酸，由于H的离子淌度7倍于Na，这就
+
+
大大提高了所测阴离子的检测灵敏度。
3.在液相色谱中提高柱效的最有效途径是什么，是从什么理论推导得出的结论？ 答：减小粒度是提高柱效的最有效途径；速率理论。 4.试叙述液相色谱仪由哪几部分组成，说明各部分的作用。
答：五个部分：（贮液器）、高压输液系统（梯度洗提）、进样系统、色谱柱、检测系统、记录仪、（馏分收集器）。
贮液器中贮存的载液（常需除气）经过过滤后由高压泵输送到色谱柱入口。当采用梯度洗提时一般需用双泵系统来完成输送。试样由进样器注入载液系统，而后送到色谱柱进行分离。分离后的组分由检测器检测，输出信号供给记录仪或数据处理装置。如果需收集馏分作进一步分析，则在色谱柱一侧出口将样品馏分收集起来。 5.试比较程序升温与梯度洗提有何异同？
答：相同：作用相同：程序升温和梯度洗提都是用于色谱中多组分宽范围物质的分离。 不同：原理不同：程序升温是气相色谱中根据组分的沸点不同，通过改变柱温使组分分离，梯度洗提是液相色谱中根据组分的极性不同，通过改变流动相极性使组分分离；对象不同：程序升温应用于气相色谱中沸点范围较宽的组分，梯度洗提应用于液相色谱中极性相差很大的组分；方法不同：程序升温通过改变改变柱温分离组分，梯度洗提通过改变流动相极性分离组分。