组蛋白的装配 —————————— 需要组蛋白全保留装配，5种组蛋白形成八聚体核小体
6. 简述DNA损伤修复的机制。
答：DNA损伤以后可以生物体可通过多种修复机制进行修复。
① 直接修复：又称光复活修复，可见光可以激活光复活酶，由光复活酶识
别嘧啶二聚体并与之结合形成复合物，在可见光照射下，酶获得能量，将环丁烷胸腺嘧啶二聚体的丁酰环打开和6-4光化物还原成单体，另外甲基转移酶使O-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤，防止G-T配对，使之完全修复。
② 切除修复，包括碱基切除修复和核苷酸切除修复。碱基切除修复：DNA
糖苷水解酶能特异性识别常见的DNA损伤位点，并特异地切除受损核苷酸上的N-β-糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称AP位点；由AP磷酸内切酶将受损核苷酸的糖苷-磷酸键切开；利用DNA聚合酶Ⅰ切除损伤部位，补上核苷酸；再由DNA连接酶将切口连接。核苷酸切除修复：该修复机制由两种不同的酶来发动，一种是核酸内切酶，另外一种是DNA糖苷酶。特异性的核酸内切酶或DNA糖苷酶识别DNA受损部位，并在该部位的5ˊ端作一切口；由核酸外切酶从5ˊ→3ˊ端逐一切除损伤的单链；在DNA聚合酶的催化作用下，以互补链为模板，合成新的单链片段以填补缺口；由DNA连接酶催化连接片段封闭缺口。
③ 重组修复：重组修复发生在DNA复制之前，而当DNA发动复制时尚未
修复的损伤部位，DNA复制时，损伤部位导致子链DNA合成障碍，形成空缺；此空缺诱导产生重组酶，该酶与空缺区结合，并催化子链空缺与对侧亲链进行重组交换；对侧亲链产生的空缺以互补的子链为模板，在DNA聚合酶和连接酶的催化下，重新修复缺口；亲链上的损伤部位继续保留或以切除修复方式加以修复。 ④ 易错修复和应急反应（SOS反应），诱导修复是细胞DNA受到严重损伤
或DNA复制系统受到抑制的紧急情况下，为求得生存而出现的一系列诱导性修复，SOS反应诱导的修复系统包括避免差错的修复和倾向差错的修复。避免差错的修复：SOS反应能诱导光复活切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生，从而加强光复活切除修复和重组修复的能力。倾向差错的修复：SOS反应还能诱导产生缺乏校对动能的DNA聚合酶，它能在DNA损伤部位进行复制而避免了死亡，可是却带来了高的突变率。
- 5 -
第三章
一、填空题
1、转录的底物是四种 NTP ，原核生物RNA聚合酶可受 利福霉素 抑制，后者与该酶的 β 亚基结合。
2、真核生物的三类RNA聚合酶对α-鹅膏蕈碱的敏感度不同， RNA聚合酶Ⅱ 最敏感， RNA聚合酶Ⅰ 不敏感， RNA聚合酶Ⅲ 具有种属特异性。
3、通常原核生物的终止子在终止点之前均有一个 富含GC碱基的二重对称区 ，其产生的RNA可形成 发夹式结构 。
4、DNA结构基因中存在被转录也被翻译的序列称为 外显子 ，被转录但是不被翻译的序列称为 内含子 。
5、真核生物的mRNA加工过程中,5?端加上 帽子 ，在3?端加上 poly(A) ，后者由 催化。如果被转录基因是不连续的，那么， 一定要被切除，并通过 过程将 连接在一起。
6、–10位的 5′-TATAATG-3′区和–35位的5′-TTGACA-3′ 区是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力。 7、决定基因转录基础频率的 DNA 元件是 ，它是 的结合位点。
8、原核生物 RNA 聚合酶核心酶由 2个a亚基、一个β亚基、一个βˊ亚基和一个ω亚基 组成，全酶由 2个a亚基、一个β亚基、一个βˊ亚基、一个ω亚基和一个σ亚基 组成。
二、选择题
1、下列有关TATA盒的叙述,哪个是正确的:（ BB ） A.它位于第一个结构基因处 B.它和RNA聚合酶结合 C.它编码阻遏蛋白 D.它和反密码子结合 2. 转录需要的原料是: ( D)
A. dNTP B. dNDP C. dNMP D. NTP E . NMP 3、DNA模板链为 5?-ATTCAG-3 ? , 其转录产物是: ( D ) A. 5 ? -GACTTA-3 ? B. 5 ? -CTGAAT-3 ? C. 5 ? -UAAGUC-3 ? D. 5 ? -CUGAAU-3 ?
4、 DNA复制和转录过程有许多相同点,下列描述哪项是错误的? ( DD ) A.转录以DNA一条链为模板,而以DNA两条链为模板进行复制 B. 在这两个过程中合成均为5`-3`方向 C. 复制的产物通常情况下大于转录的产物 D. 两过程均需RNA引物
5、下列哪种RNA的剪切需要剪切体参与（ AA）。
A：真核细胞mRNA B：线粒体mRNA C：rRNA D：tRNA 6、参与转录终止的因素是（DD）。
A：σ因子 B：ρ因子 C：转录产物3?端发夹结构 D：ρ因子或转录产物3?端发夹结构 7、常见内含子的剪切位点具有的特征（ AA ）。
A：5?-GU, 3?-AG B：5?-AG, 3?-GU C：5?-GA, 3?-UG D：5?-UG, 3?-GA 8、真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是（A ）。
A：RNA聚合酶α B：RNA聚合酶β C：RNA聚合酶γ D：RNA聚合酶δ 9、下面那一项不属于原核生物mRNA的特征（ CC ）
- 6 -
A：半衰期短 B：存在多顺反子的形式
C：5?端有帽子结构 D：3?端没有或只有较短的多聚（A）结构 10、真核细胞中的mRNA帽子结构是（ AA ）
A. 7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸 B. 7-甲基尿嘧啶核苷三磷酸 C. 7-甲基腺嘌呤核苷三磷酸 D. 7-甲基胞嘧啶核苷三磷酸 12、下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述（ B ） （A）σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物 （B）全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物 （C）三个全酶在转录起始点形成的复合物 （D）σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物
三、名词解释
CAAT盒:真核生物转录起始位点上游的极端保守DNA序列，被一组转录因子识别，调控转录的起始频率 TATA盒：真核生物RNA聚合酶Ⅱ转录起始位点上游大约25核苷酸处的富含AT的保守区，其功能涉及RNA聚合酶Ⅱ转录的正确起始。 内含子：在原始转录物中通过RNA剪接反应而被去除的RNA序列或基因中与这种RNA序列相对应的DNA序列。
外显子：在原始转录物中通过RNA剪接反应将内含子去除后而保留下来的RNA序列或基因中与这种RNA序列相对应的DNA序列
启动子：DNA分子上结合RNA聚合酶并形成转录起始复合物的区域，通常位于5′上游区域。在多数情况下还包括促进转录起始的调节蛋白的结合位点。
RNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，通过核苷酸的替换、插入或删除初生转录物特定部位的碱基而改变其中的核苷酸序列，它导致了DNA所编码的遗传信息的改变，因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。
σ因子：原核生物RNA聚合酶的一个亚基，是转录起始所必需的因子，主要影响RNA聚合酶对转录起始位点的正确选择。
四、问答题
1、简述真核细胞与原核细胞基因的不同结构特征，阐明由此造成的不同转录后加工过程。 答：真核生物的基因结构由单顺反子构成，具有内含子和较多的重复序列。转录和翻译分别在细胞质和细胞核中进行。原核生物的基因结构是由多顺反子组成，无内含子，重复序列较少。因此真核生物进行转录后的加工需要在mRNA5′端加帽子和3′端加poly（A）尾巴，以保持mRNA的稳定性。同时，还要进行RNA的剪接和修饰以切除内含子。而原核生物的多顺反子多形成一个操纵子，完成各项功能。其转录和翻译是紧密连接的，不需要进行加尾和加冒的过程，由于没有内含子，也无需剪接步骤。 2、试比较真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点，各结构单元的功能是什么？
答：启动子是RNA聚合酶特异结合和转录起始所需的保守序列。在这段序列内，有一些对于启动子功能很关键的保守短序列。
原核生物启动子的结构特点：启动区长约40bp，-10序列是几乎所有的启动子都含有的一个6bp的序列，该六聚体通常位于转录起点上游10bp处，共有-10序列是TATAAT，通常称为Pribnow框，是RNA聚合酶的紧密结合位点。-35序列是另一个在大多数启动子中都可以找
- 7 -
到的6bp序列，该六聚体一般位于转录起始点上游35bp处，共有-35序列TTGACA，是RNA聚合酶对启动子的识别有关序列，对转录起始频率影响很大。
真核生物启动子的结构特点：真核生物启动子位于转录起始点上游-25~-30bp处的共同序列TATAAA，也称为TATA区（Hogness框），相当于原核生物的-10序列的功能；在起始位点上游-70~-80bp处还有另一段共同序列CCAAT，这是与原核生物-35bp区的序列相对应，称为CAAT区（CAAT框）；
比较原核与真核生物转录起始点上游区的结构，发现：①原核基因启动区范围较小，一般情况下 ，TATAAT（Pribnow区）的中心位于-10~-7，上游-70~-10区为正调控因子结合序列，-20~+1区为负调控因子结合序列。真核基因的调控范围较大，TATAA/TA区位于-30~-20，而-110~-40区为上游激活区。②原核生物基因启动子上游只有TTGACA区（-40~-30）作为RNA聚合酶的主要结合位点，参与转录调控。真核基因除了含有与之相对应的CAAT区之外，大多数基因还拥有GC区和増强子区。原核生物RNA聚合酶不需要大量多肽参与，一种RNA聚合酶能识别不同的结构基因。
3、比较DNA复制与转录的异同点。
答：相同点：都以DNA链作为模板，合成的方向均为5ˊ→3ˊ，聚合反应均遵循碱基配对原则，通过核苷酸之间形成的3ˊ,5ˊ-磷酸二酯键使核苷酸链延长。 不同点： 模板 原料 酶 产物 配对 引物
复制 两条链均被复制 dNTP DNA聚合酶 A-T;G-C RNA引物 转录 模板链转录（不对称转录） NTP RNA聚合酶 A-U;G-C;T-A 无 子代双链DNA（半保留复制） mRNA、tRNA、rRNA - 8 -