合能够出现凝集反应的原理，用已知RhD（IgM）类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应，若出现凝集现象，表明被检红细胞膜上有与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。 7.程序
（1）平板法（玻片法）
①加1滴抗D试剂于玻片上。 ②再加1滴3%-5%受检者红细胞悬液。
③在圆形的玻片区域中混匀，前后缓慢摇动玻片。2分钟左右
肉眼判断结果。
④如果是阴性，需用试管法重做一边实验。 （2）试管法
①加1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中。 ②再加1滴约3%-5%被检者红细胞悬液与试管中，混匀。 ③离心，3400rpm 15s或1000rpm 1min。
④检查是否有溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），
然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来。
⑤观察凝集情况，并立即记录结果。必要时可借助显微镜。 ⑥若是阴性结果，需在37℃孵育15-30分钟，然后再离心观
察结果。结果若是阴性需进一步确认是否是弱D。 ⑦结果判断 阳性反应：出现红细胞凝集，为RhD阳性。阴性反应：红细胞不出现凝集，为RhD阴性。
8.结果发出 根据实验结果，填写实验记录、血型鉴定报告单，审核
无误后，发出报告单。
9.注意事项
（1）试剂如出现混浊则不能使用，若开瓶使用时间较长后，最好用
已知RhD阳性、RhD阴性红细胞检查结果是否符合，以防止试剂污染、变质失效而造成鉴定错误。
（2）如果长时间储存在高温或反复冻融会使试剂失去活性。 10. Rh血型鉴定的临床意义
输血前检查 为了保证安全输血，输血前也应做Rh血型鉴定及交叉
配血，以避免由于Rh抗体引起的溶血性输血反应。
新生儿溶血病的诊断 由于IgG类Rh抗体易通过胎盘，从而破坏胎
儿相应抗原红细胞，引起严重的新生儿溶血病。
协助治疗 当实验证实有少量Rh阳性红细胞进入Rh阴性受血者时，
可用大剂量Rh免疫球蛋白来防止Rh阳性红细胞的免疫作用。
10.参考文献：
（1）人民卫生出版社 2003年7月（第一版） 高峰主编：输血与输血技术
（2）人民卫生出版社 2003年6月（第二版） 罗春丽主编：检验基础 （3）科学出版社 1999年11月（第一版） 孙连明等主编：临床输血手册
（4）Rh（IgM）血型定型试剂说明书
授权人签字 姓名 日期 操作人员 部门负责人 质量负责人
西安市中心医院 输血科 不规则抗体筛查SOP 文件编号:A4 执行日期:2006-01-01 编辑版本:第2版 不规则抗体筛查标准操作规程
1.目的 筛查样本中是否含ABO系统以外的抗体，减少输血不良反应。 2.适用范围 发血室，血型血清学实验室。
3.职责 具有初级以上职称（检验），在血型鉴定和交叉配血工作岗位的工作人员有权执行本规程。出现鉴定结果本人无法判定，不能发出实验结果时，应当向上一级职称的检验人员或直接向本部门负责人报告并寻求技术上指导和帮助。
4.监督 本试验审核者及实验室负责人监督工作人员是否遵从此项规 程。 5.材料
（1）ⅠⅡⅢ标准抗体筛查细胞（0.8%） （2）达亚美抗体筛查卡 （3）被检者血清
（4）ID-Centrifuge 12， ID-Incubator37
6.原理 达亚美微量定性系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术 和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。当抗原抗体反应，抗人球 试验时，血细胞发生凝集。离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝 胶上层，呈阳性反应；未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝 胶管底部，呈阴性反应。 7.程序
（1）三管中分别加入抗体筛查ⅠⅡⅢ细胞50ul （2）三管中均加入25ul待检样本血浆或血清 （3）孵育15分钟
（4）离心10分钟，判断结果，记录 注：
1+至4+为抗体筛查阳性（抗人球法），样本含ABO系统以外的抗体，需进一步作抗体鉴定。（－）为抗体筛查阴性。 8.注意事项
（1）每日实验前，先取出小瓶2号稀释液及标准细胞，放置一段时
间至室温，以防冷凝集。
（2）凡符合下列条件者需做抗体筛查：交叉配血不合者；有输血史、
妊娠史或短期内需要接受多次输血者。
（3）DiaMed卡封口有损坏时，管中干涸或有气泡时，卡不可使用。 （4）必须用2号稀释液保证反应结果可靠，细胞浓度要在0.8%左右，
不可太浓太稀。
（5）纤维蛋白可吸附部分红细胞，应将血样离心。 （6）液体应加至卡反应室中。
（7）严格按标准程序操作可检出弱抗原抗体反应、弱凝集。 （8）某些药物、疾病可导致血液不配合。 （9）细菌及异常血清蛋白可影响结果。 （10）必须标记卡。
9.结果发出 根据实验结果，填写实验记录，审核无误后发出报告单。