生物化学王境岩第三版课后习题答案

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2.下列变化对肌红蛋白和血红蛋白的O2亲和力有什么影响?(a)血浆的pH从7.4降到7.2;(b)肺中CO2分压从45torr(屏息)降到15torr(正常);(c)BPG水平从4.5mmol/L(海平面)增至7.5mmol(高空)。[对肌红蛋白:(a)无;(b)无;(c)无。对血红蛋白:(a)降低;(b)增加;(c)降低]

3.在37℃,pH7.4,CO2分压40 torr和BPG正常胜利水平(4.5mmol/L血)条件下,人全血的氧结合测定给出下列数据: p(O2) %饱和度(=100×Y) 10.6 10 19.5 30 27.4 50 37.5 70 50.4 85 77.3 96 92.3 98 (a)

根据这些数据,绘制氧结合曲线;估算在(1)100torr p(O2)(肺中)和(2)30

torr p(O2)(静脉血中)下血的氧百分饱和度。 (b) (c)

肺中[100 torr p(O2)]结合的氧有百分之多少输送给组织[30 torr p(O2)]? 如果在毛细血管中pH降到7.0,利用图6-17数据重新估算(b)部分。

[(a)(1)98%,(2)58%;(b)约40%;(c)约50%] 解:(a)图略,从图中克知分别为98%和58%;

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(b)98%-58%=40%,故约40%;

(c)当pH降到7.0时,据图6-17可知:96%-46%=50%。

4.如果已知P50和n,可利用方程(6-15)Y/(1-Y)=[ p(O2)/ P50]n计算Y(血红蛋白氧分数饱和度)。设P50=26 torr,n=2.8,计算肺(这里p(O2)=100 torr)中的Y和毛细血管(这里p(O2)=40 torr)中的Y。在这些条件下输氧效率(Y肺-Y毛细血管=ΔY)是多少?除n=1.0外,重复上面计算。比较n=2.8和n=1.0时的ΔY值。并说出协同氧结合对血红蛋白输氧效率的影响。[n=2.8时,Y肺=0.98,Y毛细血管=0.77,所以,ΔY=0.21,n=1.0时,Y肺=0.79,Y毛细血管=0.61,所以,ΔY=0.18,两ΔY之差0.21-0.18=0.03,差值似乎不大,但在代谢活跃的组织中p(O2)<40 torr,因此潜在输氧效率不小,参见图6-15]

解:Y肺/(1-Y肺)=[100/26]2.8 Y肺=0.98 Y毛/(1-Y毛)=[40/26]2.8 Y毛=0.77 ΔY=0.98-0.77=0.21

当n=1.0时,同理,Y肺=0.79 Y毛=0.61 ΔY=0.18

5.如果不采取措施,贮存相当时间的血,2.3-BPG的含量会下降。如果这样的血用于输血可能会产生什么后果?[贮存过时的红血球经酵解途径代谢BPG。BPG浓度下降,Hb对O2的亲和力增加,致使不能给组织供氧。接受这种BPG浓度低的输血,病人可能被窒息。]

6.HbA能抑制HbS形成细长纤维和红细胞在脱氧后的镰刀状化。为什么HbA具有这一效应?[去氧HbA含有一个互补部位,因而它能加到去氧HbS纤维上。这样的纤维不能继续延长,因为末端的去氧HbA分子缺少“粘性”区。]

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7.一个单克隆抗体与G-肌动蛋白结合但不与F-肌动蛋白结合,这对于抗体识别抗原表位能告诉你什么?[该表位可能是当G-肌动蛋白聚合成F-肌动蛋白时被埋藏的那部分结构。]

8.假设一个Fab-半抗原复合体的解离常数在25℃和pH7时为5×10-7mol/L。(a)结合的标准自由能(25℃和pH7时)是多少?(b)此Fab的亲和力结合常数是多少?(c)从该复合体中释放半抗原的速度常数为120S-1。结合的速度常数是多少?此说明在结合半抗原时抗体中的结构变化是大还是小?[(a)ΔG0ˊ=35.9kJ/mol;(b)Ka=2×106mol-1L;(c)结合速度常数k=2×108mol-1S-1L,此值接近于小分子与蛋白质相遇(结合)的扩散控制限制(108至109mol-1S-1L)]

解:(a)ΔG0ˊ=-RTlnKa=-8.31×298×ln2000000=-35.9kJ/mol (b)Ka=1/Keq=1/5×10-7=2×106mol-1L

9.抗原与抗体的结合方式与血红蛋白的氧结合相似。假设抗原是一价,抗体是n价,即抗体分子有n个结合部位,且各结合部位的结合常数Ka值是相同的,则可证明当游离抗原浓度为[L]时,结合到抗体上的抗原浓度[Lp]与抗体的总浓度[Pr]之比值:N =[Lp]/[Pr]=(nKa [L])/(1+Ka [L]),N实际上表示被一个抗体分子结合的抗原分子平均数。 (a)证明上面的方程可重排为N /[L]=Kan-KaN

此方程式称Scatchard方程,方程表明,N /[L]对N作图将是一条直线。 (b)根据Scatchard方程,利用下列数据作图求出抗体-抗原反应的n和Ka值。 [L] mol/L 1.43×10-5

N 0.5

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2.57×10-5 6.00×10-5 1.68×10-4 3.70×10-4

0.77 1.20 1.68 1.85

[(a)第一个方程两边各乘(1+Ka [L]),然后两边各除以[L],并重排第2个方程;(b)根据第二方程, N /[L]对N作图的斜率是-Ka,N /[L]=0时的截距给出n。利用数据作图得Ka =2.2×10-4 mol/L,n=2.1。因为结合部位数目只可能是整数,所以n=2]

10.一个典型的松弛肌节中细丝长约2μm,粗丝长约为1.5μm。 (a) (b)

估算在松弛和收缩时粗丝和细丝的重叠情况。

一次循环中肌球蛋白沿细丝滑行“一步”移动约7.5nm,问一次收缩中每个肌动蛋

白纤维需要进行多少个步? [(a)约0.75nm,(b)约67步] 解:(a)根据P281图6-35A所示,

当松弛时重叠总长度为:(1+1)-(3-1.5)=0.5μm 0.5/2=0.25μm 当收缩时重叠总长度为:(1+1)-(2-1.5)=1.5μm 1.5/2=0.75μm (b)(3-2)÷2×103÷7.5≈67步

第7章 蛋白质的分离、纯化和表征

1.测得一种血红素蛋白质含0.426%铁,计算最低相对分子质量。一种纯酶按重量计算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%,问其最低相对分子质量是多少?[13110;15870]

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