四.时间分辨荧光免疫分析(time resolved fluorescence immunoassay) 1.原理:
血清成份——蛋白,其它组分,本底荧光,荧光寿命 1-10 ns <20 ns Eu铕螯合物标记 10 ?s-1ms 时间分辨荧光仪 脉冲光源 4000次/s,氙灯
2.方法:与通常酶ELISA差不多,如夹心法 3.特点:消除非特异性本底荧光0.2-1ng/ml, 降低检出限1-2数量级
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第七节 化学发光免疫测定 CLIA(Chemiluminescence immunoassay)
一.原理:
化学发光试剂——标记物——标记抗原抗体. 一般免疫反应原理:非均相 (竞争,非竞争) 还有生物发光免疫 二.标记 1. 标记物:
——鲁米诺类(luminol) ——咪唑类
——吖啶酯类(acridinium ester) ——苯酚 ——草酸酯类
——吡啶钌Ru(bpy)3——电致化学发光 条件:
——参与发光反应 ——结合稳定
——不影响化学发光效率,不影响免疫活性
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