包括: 激素(甲状腺,性激素,胰岛素等),酶,药物(苯巴比妥,庆大霉素等),蛋白,抗体,肿瘤标志物 病原微生物,细胞因子等;,
国内有数十种试剂盒供应(参考标准品,标记抗原,专一抗体,分离剂)
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第五节 酶免疫分析法enzyme immunoassay EIA 一.分类 酶免疫分析:
——均相酶免疫测定(EMIT), ——非均相酶免疫测定(ELISA) ——固相酶免疫测定 ——液相酶免疫测定 二,基本原理 1, 均相酶免疫测定
酶扩大免疫测定技术(enzyme-multiplied immunoassay technique EMIT) 酶标半抗原 抗体 (小抗原)
E—◆ + >— = E—◆>— ◆x + >— = x◆>— 待测半抗原 (小抗原)
因抗原较小,酶与抗原接触紧密,抑制酶活性.无需相分离 特点: 1. 竞争性
2. 均相,结合前后酶受抑制
3. 主要测抗原的方法,抗原要小,小抗原或半抗原
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2,固相酶免疫测定
酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay) ELISA
① 直接法-测抗原或抗体 ⑴ 测抗原——非竞争,非均相
待测物包被 酶标抗体 ⑵ 测抗体
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S
加底物—检测
光度 荧光 电化学 化学发光
S
② 间接法-测抗体(最常用方法) 常用的测抗体方法, 非竞争
S
试剂抗原包被, 待测抗体 酶标第二抗体 加底物 固相抗原 抗抗体
③双抗体夹心法-测大分子抗原(最常用方法) sandwich
S
试剂抗体包被 待测抗原 酶标抗体(同类)
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