72．下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的 A．对底物有高度特异亲和性 B．酶具有多个亚基 C．酶能被抑制剂抑制 D．最适温度高 73．关于酶的抑制作用的叙述，正确的是
A．可逆抑制作用是指加入大量底物后可解除抑制剂对酶活性的抑制 B．不可逆抑制作用是指用化学手段无法消除的抑制作用
C．非专一性不可逆抑制剂对酶活性的抑制作用可用于了解酶的必需基团的种类 D．非竞争性抑制属于不可逆抑制作用 74．有机汞化合物能抑制：
A．羟基酶 B．巯基酶 C．胆碱酯酶 D．碱性酶 75．关于酶的抑制剂的叙述正确的是 A．酶的抑制剂中一部分是酶的变性剂 B．酶的抑制剂只与活性中心上的基团结合 C．酶的抑制剂均能使酶促反应速度下降 D．酶的抑制剂一般是大分子物质
76．关于酶的激活剂的叙述错误的是：
A．激活剂可能是无机离子，中等大小有机分子和具蛋白质性质的大分子物质 B．激活剂对酶不具选择性
C．Mg2+是多种激酶及合成酶的激活剂
D．作为辅助因子的金属离子不是酶的激活剂
77．下列有关温度对酶反应速度的影响作用的叙述中，错误的是：
A．温度对酶促反应速度的影响不仅包括升高温度使速度加快，也同时会使酶逐步变性 B．最适温度是酶的特征常数
C．最适温度不是一个固定值，而与酶作用时间长短有关 D．一般植物酶的最适温度比动物酶的最适温度稍高
78．在下列pH对酶反应速度的影响作用的叙述中，正确的是： A．所有酶的反应速度对pH的曲线都表现为钟罩形 B．最适pH 值是酶的特征常数
C．PH不仅影响酶蛋白的构象，还会影响底物的解离，从而影响ES复合物的形成与解离 D．针对pH对酶反应速度的影响，测酶活只要严格调整pH为最适pH，而不需缓冲体系 79．磺胺药的治病原理是： A．直接杀死细菌
B．细菌生长某必需酶的竞争性抑制剂 C．细菌生长某必需酶的非竞争性抑制剂 D．细菌生长某必需酶的不可逆抑制剂
80．证明过氧化氢酶与H2O2形成酶一底物中间产物的证据是： A．分子量增大 B．吸收光谱出现特征性改变 C．对温度的耐受性增强 D．反应速度明显加快 四、 是非题 1． 对于变构酶来说，Km值随酶浓度的变化而变化 2． 在结构上与底物无关的各种代谢物有可能改变一些酶的Km值 3． 酶促反应初速度与底物浓度无关 4． 酶的纯度不直接用含量而用比活力表示 5． 激酶在酶的系统分类中属于合成酶类 6． 本质Pr的酶活性中心常出现的残基有Asp、Thr、Ser、Clu等 7． 酶的最适pH值只取决于酶Pr本身结构 8． 所有别构酶都是寡聚蛋白 9． 酶别构作用破坏的是共价键
10．酶的催化机理完全可用酶与底物相互契合的“锁钥学说”阐明 11．就化学本质而言，酶原激活的过程就是蛋白质水解的过程 12．米氏常数就是底物的解离常数
13．当一种酶有几个底物时，就有几个不同的Km值
14．不可逆抑制是抑制剂以共价键与酶结合，因而不能用一般透析除去 15．丙酮酸脱氢酶中含有TPP
16．酶合成速度的快慢决定于酶活力的大小
17．只要在酶分子上共价连接一个磷酸基团酶分子就被激活 18．AMP不仅是构成核酸的成分，而且是构成多种辅酶的成分
19．在非竞争性抑制剂存在下，加入足够量的底物，酶促反应能够达到正常Vmax
20．某些调节酶的V-[S]的S形曲线表明酶与少量底物的结合增加了后续底物分子的亲和力 21．测定酶活力时，底物浓度不必大于酶浓度
22．当底物处于限速浓度时，酶促反应速度将随时间而降低
23．诱导酶是指当细胞中加入特定诱导物后，诱导产生的酶，这种诱导物往往是该酶的产物
24．二异丙基氟磷酸（DIFP）因能与活性中心含-OH的酶以共价键结合而不可逆地抑制乙酰胆碱酯酶 25．有的抑制剂虽不与底物竞争酶的结合部位，但仍表现为竞争性抑制
26．辅酶与辅基的区别只在于它们与蛋白质结合牢固程度不同，并无严格的界限 27．竞争性抑制剂不影响酶对底物的Km
28．某些酶的Km由于代谢产物的存在而发生改变，而这些代谢产物在结构上与底物无关
16
29．Pr磷酸化和去磷酸化是可逆反应，该可逆反应是由同一种酶催化完成的 30．代谢中代谢物浓度对代谢的调节强于酶活性对代谢的调节
31．ATP是磷酸果糖激酶的底物，因而高浓度ATP可加快磷酸果糖激酶催化F-6-P生成F-1，6-2P的速度 32．能荷水平之所以影响一些代谢反应，仅仅因为ATP是一些酶的底物或产物 33．别构酶又称变构酶，催化反应物从一种构型变为另一种同分异构体
34．代谢物是沿糖酵解方向降解还是沿糖异生的方向代谢，主要取决于磷酸果糖激酶与果糖二磷酸酶的相对活性
35．天冬氨酸转氨甲酰酶是嘧啶核苷酸合成途径的限速酶，该途径的终产物CTP是它的别构抑制剂，ATP为其别构激活剂 36．AMP和果糖2,6-二磷酸是磷酸果糖激酶最重要的别构激活剂，同时又是果糖二磷酸酶主要的抑制剂 37．只有多聚体的酶才具有协同效应
38．细胞内代谢的调节主要是通过调节酶的作用而实现的 39．磷酸化是最常见的酶促化学修饰反应，一般是耗能的 40．真核细胞基因表达的调控单位是操纵子 41．辅酶Ⅰ（NAD+）分子中含有高能磷酸键
42．磷酸化酶激酶从ATP获得一份磷酸，而变得活化 43．蛋白激酶使蛋白质磷酸化的部位都是丝氨酸残基 44．某些酶能催化不发生共价键断裂或生成的反应
45．共价修饰调节酶被磷酸化后活性增大，去磷酸化后活性降低
46．碘乙酸因可与活性中心-SH以共价键结合而抑制巯基酶，因此，碘乙酸存在时糖酵解途径受阻
47．对于一些调节酶来说，酶反应速度与底物浓度之间的关系呈S形曲线，曲线的上升部分表明当底物浓度增加时，酶对底物的亲和力减弱 48．在酶的催化部位，只有侧链带电荷的氨基酸残基才能直接参加酶的催化反应
49．辅酶和辅基都是酶活性不可少的部分，它们与酶促反应的性质有关，与专一性无关 50．对于绝大多数酶而言，分子量都大于50×103 51．所有的酶在生理pH时活性都最高
52．将具有绝对专一性的酶与底物的关系，比喻为锁和钥匙的关系还比较恰当 53．所有酶的米氏常数都可被看成是酶与底物的结合常数（Ks） 54．能催化蛋白质磷酸化反应的酶，称为磷酸化酶 55．同工酶就是指一种酶同时具有几种功能
56．蛋白激酶属于磷酸转移酶类，催化磷酸根共价转移到蛋白质分子上的反应 57．溶菌酶和胰凝乳蛋白酶都没有四级结构
58．非竞争性抑制使Vmax降低意味着ES→E+P反应速度常数K2降低 59．新合成的羧肽酶原A不经酶原的激活过程就没有活性 60．脲酶的专一性很强，除尿素外不作用于其它物质
61．许多多酶体系的自我调节都是通过其体系中的别构酶实现的 62．同工酶的最适pH值相同
63．改变酶促反应体系中的pH，往往影响到酶活性部位的解离状态，故对Vmax有影响，但不影响Km 64．酶影响它所催化反应的平衡
65．米氏常数是酶的特征常数，与酶的底物无关 66．酶原激活作用是不可逆的
67．对共价调节酶进行共价修饰是由非酶蛋白质进行的
68．对于多酶体系，正调节物一般是别构酶的底物，负调节物一般是别构酶的直接产物或代谢序列的最终产物 69．酶原激活过程实际就是酶活性中心形成或暴露的过程
70．作为辅因子的金属离子，一般并不参与酶活性中心的形成 五、 问答题
1．米氏常数的意义及应用 2．变构酶有何特点？
3．什么是可逆抑制与不可逆抑制？二者有何特点？ 4．何谓竞争性抑制与非竞争性抑制？二者有何特点？ 5．以胰凝乳蛋白酶原为例，说明酶原激活过程。
6．测定酶活力时为什么要测定初速度，且一般以测定产物的增加量为宜。 7．什么是共价调节酶？举例说明。 8．酶水平的调节可分为哪几种？
9．以乳糖操纵子为例简述操纵子的作用机理。
10．举例说明同工酶存在的生物学意义？同工酶在哪些领域已得到应用。 11．绝大多数酶溶解在纯水中会失活，为什么？ 12．测定酶活力时：（1）酶和底物为什么必须用缓冲液配制？（2）酶和底物先分别保温，然后混合，还是先混后合保温，为什么？ 13．某酶的Km=2.4×10-4mol/l，在底物浓度为0.05mol/l时，该酶的反应速度为128μmol/min，求在底物浓度为6.3×103mol/l和1×10-4mol/l时该酶的反应速度分别是多少？
14．某酶的Km=1.0×10-5mol/l，当[S]=0.1mol/l时，V0=37μmol/min，然而当[S]=0.01mol/l时，V0仍然等于37μmol/min，用计算法说明为会么底物浓度相差10倍，反应速度却不变？
15．称取25mg蛋白酶粉配制成25ml酶液，从中取出0.1ml，以酪蛋白为底物用Folin-酚比色法测定酶活力，结果表明每小时产生1500μg酪氨酸，另取2ml酶液用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg，若以每分钟产生1μg酪氨酸的酶量为一个活力单位，求（1）1ml酶液中蛋白的含量及活力单位；（2）1g酶制剂的总蛋白含量及总活力；（3）酶的比活力。 16．用10种反应液测定酶活性[S]与V0的关系如下： 编号 [S]mol/l V0（μmol/min） 1 5×10-2 0.28 2 5×10-3 0.28 3 5×10-4 0.28 4 5×10-5 0.28
17
5 5×10-6 0.071 6 5×10-7 0.0096 (1) 该酶促反应的Vmax是多少？ (2) 该酶促反应的Km是多少？ (3) 这个反应遵守米氏动力学方程吗？ (4) [S]= 5×10-6 mol/l时，在反应最初5分钟内产生的总量是多少？ (5) 假如在反应液中浓度增加4倍，Km是多少？Vmax是多少？[S]= 5×10-6 mol/l时反应初速度是多少？
17．一引起酶的稀释液经激烈振荡会产生泡沫，此时，即使酶的分子量没有变化，一些酶也会失去活性，这是为什么？ 18．对于变构酶来讲，加入低浓度的竞争性抑制剂，能起到激活作用，为什么？ 19．试比较溶菌酶、羧肽酶A和胰凝乳蛋白酶 a. 在催化反应中，哪一个酶需要金属离子？ b.哪些酶是一条肽链？
c.哪一个酶会被DIPF迅速地失活？
d.哪个酶被一种酶切割，其酶原形成有活性的酶？
20．米氏方程的实际意义和用途是什么？它有什么局限性？
21．在酶的纯化过程中通常会丢失一些活力，但偶尔也可能在某一纯化步骤中酶活得率可超过100%，产生这种活力增高的原因是什么？ 22．如果你从刀豆中得到了一种物质，很可能是脲酶，你怎样确定它是蛋白质，如何判断它是否是酶？
23．某酶制剂的比活力为42单位1mg蛋白，每ml含12mg蛋白质，计算当底物浓度达到饱和时，1ml反应液中含：（1）20μl酶制剂；（2）5μl酶制剂时的反应初速度（单位为国际活力单位）；（3）该酶制剂在使用前是否需要稀释？
24．某酶制剂2ml内含脂肪10mg ，糖20 mg，蛋白质25mg，其酶活力与市售酶商品（每克含2000酶活力单位）10mg相当，问酶制剂的比活力是多少？
25．焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸，它的分子量为120000Da，由六个相同的亚基组成，纯酶的比活力为3600U/mg酶，它的一个酶活力单位（U）规定为：在标准的测定条件下，37℃，15分钟内水解10μmol焦磷酸所需要的酶量。问： （1） 每mg酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物？ （2） 每mg酶中有多少mol的活性中心？（假设每个亚基上有一个活性中心） （3） 酶的转换数是多少？ 26．简要叙述原核生物基因表达的调节。
27．提纯醇脱氢酶，用55%饱和度的硫酸铵沉淀，沉淀溶解于水中，其蛋白质浓度为1.5g/L，500倍稀释后，取10μl酶溶液测定活性（总体积为3.0ml的pH9.2的缓冲液中，用过量的乙醇和NAD+，测定在340nm光吸收变化），初速度为0.11OD/min，硫酸铵沉淀后上请液的蛋白质浓度为2.0g/l，1000倍稀释后也取10μl溶液按上述方法测活，初速度为 0。08OD/min，计算两个组分的比活性（ε340（NADH-NAD+）=6.2×103mol/l），请你对该提纯步骤作出评价，上述的实验是否有不足之处？如果有，请你指出。
第四章 习题 一、 名词解释 1． 回补反应 2． 糖酵解 3． 糖异生作用 4． 三羧酸循环 5． 磷酸戊糖途径 6． 激酶 7． β-氧化 8． 脂肪酸合成酶系统 9． 呼吸链 10．底物磷酸化 11．氧化磷酸化 12．能荷 13．D酶 二、 写出下列缩写符号的中文名称
UDPG TCA HMP EMP BCCP ACP 三、 填空
1．EMP在 中进行，TCA在 中进行，而电子传递链在 上进行。
2．一分子葡萄糖酵解时净产生 分子ATP；一分子葡萄糖有氧呼吸共有 次底物水平磷酸化，一分子丙酮酸彻底氧化可产生 分子ATP。
3．HMP的主要产物为 ，HMP中可用于核酸合成的物质是 ，可用于合成反应的还原剂是 。 4．丙酮酸脱氢酶系包括 、 、 、 、 五种辅酶（基）和 、 、 三种酶。 5．EMP中催化不可逆反应的酶是 、 、 ，TCA中的三个调控酶是 、 和 。 6．3-P-甘油醛脱氢酶需 作为辅酶，当该酶受抑制时，生物体内葡萄糖氧化一般经 进行。
7．酵母在厌氧条件下由糖生成的丙酮酸经脱羧生成 ，后被NADH还原为 ，在有氧条件下，丙酮酸脱羧生成 。 8．一分子乙酰CoA通过TCA有 次脱氢过程，催化脱氢反应的酶依次是 、 、 、 ，生成 分子NADH， 分子FADH2和 分子GTP。 9．磷酸戊糖途径中的氧化阶段，两种脱氢酶是 和 。
10．支链淀粉α-1,6糖苷键是在 酶和 酶共同作用下分解的，UDPG是双糖或多糖生物合成中 的供体。 11．脂肪酸β-氧化酶系存在于 ，包括 、 、 、 四个过程。 12．脂肪酸合成酶系存在于 ，参与脂肪酸从头合成的两个关键酶系是 和 。 13．乙醛酸循环中的两个主要酶是： 和 。
14．大部分脂肪酸合成过程在细胞的 进行，而氧化过程仅能在细胞的 进行。 15．糖异生的第一步必须在线粒体内进行，是因为 酶只存在线粒体内。
18
16．脂肪酸合成的原料是 ，它可由 、 和 等生物大分子降解产生。
17．饱和脂肪酸的从头合成过程中，形成丙二酸单酰CoA需要 和 酶系，它含有三种成分，即 、 和 。
18．由乙酰CoA在胞浆内合成一分子硬脂酸需要 个NADPH，彻底氧化一分子硬脂酰CoA（18：0），共需要消耗 分子氧，生成 个ATP。
19．在脂肪酸分解代谢中，长链脂酰辅酶A以 形式转运到线粒体内，经过 作用，生成 参加三羧酸循环。 20．软脂酰CoA经过一次β-氧化，其产物通过TCA循环和氧化磷酸化生成 个ATP。 21．胞浆中合成脂肪酸的限速酶是 。
22．动物体内形成ATP的方式有 和 ，但有绿色植物体内还能进行 。
23．由NADH+H+进入电子传递链，P/0是 ，即能形成 分子ATP，而FADH2，进入电子传递链，P/0是 ，即每对氢传递能形成 个ATP。
24．在所有细胞中乙酰基的主要载体是 ，ACP是 ，它在体内的作用是 。 25．在β-氧化中，使底物氧化产生能量的两个反应由 和 催化。 26．在电子传递链中电位跨度最大的一步在 与 之间。
27．在呼吸链的三个部位能够形成ATP，第一个部位是 之间，第二个部位是 之间，第三个部位是 之间。 28．两分子丙酮酸通过糖异生转变为一分子葡萄糖消耗 分子ATP。
29．如果用14C标记G-6-P的第2位碳原子，在有氧的条件下彻底降解，需要 轮柠檬酸循环放出带14C标记的CO2。 30．脂肪酸在线粒体内降解的第一步反应是 脱氢，该反应的载氢体是 。
31．羧基载体蛋白BCCP是乙酰CoA羧化酶复合物的成分之一，BCCP含有维生素成分是 ，BCCP通过 与蛋白质分子中的 以共价键连接。
32．呼吸链三个部位的抑制剂分别是：部位Ⅰ有 ，部位Ⅱ有 ，部位Ⅲ有 。
33．α-和β-淀粉酶只能水解淀粉的 键，所以不能使支链淀粉完全水解，要水解支链必须有 酶参与。 34．淀粉磷酸化酶催化淀粉降解的最初产物是 。
35．支链淀粉是在 酶和 酶共同作用下形成的。
36．由磷酸蔗糖合成酶催化蔗糖合成时，其葡萄糖供体是 ，葡萄糖受体是 ，其直接产物是 。 37． 是碳水化合物在植物体内运输的主要形式。
38．由葡萄糖合成蔗糖和淀粉时，葡萄糖要转变成活化形式，其主要活化形式分别是 和 。
39．将ATP上的磷酸基团转移到葡萄糖C-6的羟基上，该反应由 酶催化，该酶在EC分类中属于 酶类。 40．在TCA中催化底物水平磷酸化的酶是 ，该酶属EC分类中的 酶。 41．丙酮酸还原为乳酸，反应中的NADH+H+来自 的氧化。
42．三酰甘油是由 和 在磷酸甘油转酰酶作用下先形成 ，再由磷酸酶转变成 ，最后在 催化下生成三酰甘油。
43．脂肪酸从头合成的C2供体 ，活化的C2供体是 ，还原剂是 。 44．乙酰CoA羧化酶是脂肪酸从头合成的限速酶，该酶以 为辅基，消耗 ，催化 与 生成 ，柠檬酸为其 ，长链脂酰CoA为其 。
45．在线粒体外膜脂酰CoA合成酶催化下，游离脂肪酸与 和 反应生成脂肪酸的活化形式 ，再经线粒体内膜 进入线粒体衬质。 四、是非题： 1． 脂肪酸活化涉及到CoASH。 2． 只有偶数碳原子的脂肪酸在氧化降解时产生乙酰CoA。 3． 脂肪酸以最高速度合成时需异柠檬酸，而脂肪酸氧化需柠檬酸。 4． 脂肪酸的从头合成和β-氧化的方向都是从羧基端向甲基端进行的。 5． EMP反应在有氧或无氧条件下都能进行。 6． 联系三大物质代谢的中间产物是乙酰CoA。 7． 磷酸戊糖途径中主要产物是ATP和CO2。 8． 乙醛酸循环的结果是两分子的乙酰CoA合成一分子琥珀酸。 9． 油料种子萌发时，乙醛酸循环不很活跃。
10．α-淀粉酶水解淀粉分子中的α-1,4糖苷键，β-淀粉酶水解β-1,4糖苷键。 11．三羧酸循环是糖、脂、蛋白质彻底分解的共同途径。 12．三羧酸循环一周可净获得12ATP。
13．三羧酸循环中异柠檬酸第一次脱羧的碳原子不是直接来自新加入的两个碳原子。 14．脂肪生物合成从甘油和脂肪酸起步时双方都需活化，前者磷酸化，后者酰基化。
15．糖异生作用是克服糖酵解三个关键酶催化的不可逆反应的途径，主要由两种磷酸酯酶和一种羧化酶催化。 16．2,4-二硝基苯酚抑制ATP的合成，寡霉素、缬氨霉素、短杆菌肽等有同样的作用。
17．鱼藤酮、安密妥和杀粉蝶菌素阻断电子由NADH+H+向CoQ传递，抗霉素A抑制电子从Cytb—→Cytc1的传递。 18．电子传递和氧化磷酸化是两个过程。
19．当ATP/ADP比率高时，电子传递速度增加。 20．解偶联剂可抑制呼吸链的电子传递。
21．线粒体内膜上的球状颗粒与氧化磷酸化有直接关系。
22．生物体中所有ATP的形成只能通过电子传递形成跨膜的pH梯度，在质子返回途中驱动ATP酶，才能合成ATP。 23．去污剂能阻步ATP的形成，主要原因是影响了O2的正常供应。
24．由于FAD必须获得2个氢原子成为还原态，因此它只参与2个电子的转移反应。 25．不饱和脂肪酸和奇数碳原子脂肪酸的氧分解与β-氧化无关。
26．就葡萄糖降解为丙酮酸所净得的ATP数目来说，糖元的水解比糖元的磷酸解更有效。 27．TCA的所有中间产物中，只有草酰乙酸才能被该循环中的酶完全降解。 28．生物素是丙酮酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶的辅酶。
29．TCA能产生NADH和FADH2，但不产生含高能磷酸键的化合物。
30．在磷酸戊糖途径中由于转酮酶与转醛酶催化可逆性反应，所以该循环与糖酵解有密切关系。
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