D．凡引起DNA两股互补链间氢键断裂的因素，都可使其变性 51．下列对环核苷酸的描述哪一项是错误的
A．是由5′-核苷酸的磷酸基与核糖C-3′上羟基脱水缩合成酯健，成为核苷的3’,5’-环磷酸二酯 B．重要的环核苷酸有cAMP及cGMP
C．cAMP在生理活动及物质代谢中有重要的调节作用，被称之为第二信使 D．环核苷酸的核糖分子中碳原子上没有自由的羟基
52．具有下列顺序的单链DNA-5′-CpGpGpTpAp-3′能与下列哪一种RNA杂交 A．5′-GpCpCpApTp-3′ B．5′-GpcpCpApUp-3′ C．5′-UpApCpCpGp-3′ D．5′-TpApGpGpCp-3′ 53．下列关于核酸分子杂交的叙述哪一项是错误的
A．不同来源的两条单链DNA，只要它们有大致相同的互补碱基顺序，它们就可以结合形成新的杂交DNA双螺旋 B．DNA单链也可与相同或几乎相同的互补碱基RNA链杂交形成双螺旋 C．RNA链可与其编码的多肽链结合形成杂交分子 D．杂交技术可用于基因工程研究
54．维持DNA双螺旋结构稳定的力包括：
A．碱基对之间氢键 C．磷酸二酯键
B．碱基堆积力 D．磷酸残基的离子键 55．下列关于核酸降解的叙述哪些是正确的 A． 外切酶的作用是从多核苷酶链的5′-末端或3′末端开始切断其共价键 B．碱水解多作用于RNA的分子中磷酸二酯键 C．内切酶的作用是从多核苷酸链内切断其共价键 D．碱水解可作用于DNA中嘌呤碱形成的糖苷键
56．在嘌呤环的合成中向嘌呤环只提供一个碳原子的化合物是
A．HCO3-（CO2） B．甲酸 C．谷氨酰胺 D．甘氨酸 57．下列关于嘌呤核苷酸从头合成的叙述哪项是正确的 A． 嘌呤环的氮原子均来自氨基酸的α-氨基 B．合成中不会产生自由嘌呤碱
C．氨基甲酰磷酸为嘌呤环的形成提供氨甲酰基 D．在由IMP合成AMP和GMP时均用ATP供能 58．人体内嘌呤核苷酸分解代谢的主要终产物是
A．尿素 B．尿酸 C．肌酸 D．肌酐 59．下列关于嘧啶分解代谢的叙述哪一项是正确的 A．产生尿酸 C．需要黄嘌呤氧化酶 B．产生尿囊酸 D．产生氨和CO2
60．DNA以半保留方式进行复制，若一完全被标记的DNA分子，置于无放射标记的溶液中复制两代，所产生的四个DNA分子的放射性状况如何
A．两个分子有放射性，两个分子无放射性 B．均有放射性
C．两条链中的半条具有放射性 D．两条链中的一条具有放射性 一、 问答题 1． DNA的双螺旋模型有哪特征？利用这种模型可以解释生物体的哪些活动？ 2． RNA和Pr的生物合成有什么关系？试简述Pr生物合成的过程。 3． 解释DNA的半保留复制与半不连续复制 4． 简述真核生物与原核生物的RNA聚合酶的种类和主要功能？ 5． 大肠杆菌的DNA聚合酶与RNA聚合酶有哪些重要的异同点？ 6． RNA的转录后加工主要包括哪些内容？试以tRNA和真核mRNA前体的加工为例说明之。 7． tRNA的分子结构有哪些共同的特点？ 8． 由结核分枝杆菌提纯出含腺嘌呤为15.1%的DNA样品，计算其余碱基的百分含量？ 9． 大肠杆菌DNA的分子量为2.2×109道尔顿，（1）该DNA分子有多长？（2）该DNA双螺旋有多少圈（3）每个大肠杆菌细胞的体
-123
积为1.57×10cm，那么DNA分子体积占整个细胞体积的百分数是多少？ 10．比较复制和转录的异同。
11．原核生物中DNA聚合酶的特点
12．参与DNA复制过程的酶与蛋白质因子有哪些？ 13．区别反意义链、有意义链、编码链、模板链。
14．大肠杆菌DNA聚合酶的多种催化功能对DNA的合成有何意义？ 15．真核生物mRNA的特点。 16．影响Tm值的因素有哪些？
17．根据同源蛋白质的知识，说明为什么编码同源蛋白质的基因（DNA片段）可以杂交？ 18．用实验证明DNA的半保留复制。
19．将下列DNA分子加热变性，再在各自的最适温度下复性。哪种DNA复性形成原来结构的可能性更大？为什么？ （a）ATATATATAT (b)TAGACGATGC TATATATATA ATCTGCTACG
20有一寡聚核苷酸经三种RNA酶降解，其产物分别为： （a） 2pG, 2pA,pPC,pU （b） pGpCp, ApGpApU （c） pGp, CpApGp, ApU
请说出每种酶的作用特点，并确定该片段的序列。 21．简述RNA和DNA二级结构的异同。
22．三联体密码子共有几个？它们代表几种氨基酸？这些密码在全生物界是否完全统一？
4
23．从两种不同种类的细菌中分离出的DNA样品，其腺嘌呤碱基的组成分别占碱基总量的32%和17%，在这两种细菌中，你预示腺嘌呤、鸟嘌呤、胸嘧啶和胞嘧啶是怎样的比例？你采用了什么样的假定？其中一种细菌是从64℃的温泉中分离的，哪种DNA是从这种细菌中提取的？其依据是什么？
24．试述如何决定DNA复制的准确性？
25．一个单链DNA与一个单链RNA分子量相同，你如何将它们区分开？ 26．下列各种酶的专一性及水解产物是什么？
（1）胰核糖核酸酶 （2）蛇毒磷酸二酯酶 （3）牛脾磷酸二酯酶 （4）大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ （5）大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ
27．DNA样品在水浴中加热到一定温度，然后冷至室温测其OD260，请问在下列情况下加热与退火前后OD260的变化如何？ （a）加热的温度接近该DNA的Tm值。 （b）加热的温度远远超过该DNA的Tm值。 28．Cairns在实验中为跟踪DNA的复制过程，只使用了3H（氚）标记的胸嘧啶核苷。 （1） 为什么只使用3H标记的胸嘧啶核苷而不使用3H标记的胸苷或鸟苷？ （2） 放射性的胸苷是怎样参入到DNA中去的？ （3） 为什么使用3H而不使用32P作标记？
29．为什么新生的RNA分子的5′-端都是5′-pppA-或5′-pppG-的结构？
30．Hershey-chase实验的成功取决于制备两种不同批号的同位素标记的噬菌体颗粒。实验者是如何知道32P仅标记DNA、35S只标记蛋白质外壳？用35S标记的噬菌体侵染细菌之后，你预期在子代病毒中能找到大量的32S标记吗？如果实验用32P重复进行，你预期在子代病毒中会找到大量的32P标记吗？为什么？
31．真核生物mRNA修饰发生在什么阶段？
第二章 名词
α-螺旋 β-折叠 盐析 盐溶 等电点 亚基 Sanger反应 Edman反应 超二级结构 结构域 次级键 酰胺平面 构型 构象 一、 符号
GSSG PAGE DNP-AA SDS Arg Trp Asn Pro 二、 填空
1．脯氨酸与羟脯氨酸同茚三酮反应产生 色的物质，而其它氨基酸与茚三酮反应产生 色物质。
2．在下列空格中填入合适的氨基酸名称： 是带芳香族侧链的极性氨基酸； 和 是带芳香族侧链的非极性氨基酸； 和 是含硫的氨基酸，其中 是含硫的极性氨基酸； 、 、 是含羟基的氨基酸，其中 是在一些酶活性中心起重要作用并含羟基的极性较小的氨基酸。
3．定量测定蛋白质的方法包括： 、 和 等；分离蛋白质的方法主要有： 、 和 等。
4．测定N-末端的方法有： 、 等，测定C-末端的方法有： 、 等，氨基酸顺序分析仪是根据 反应原理设计的。
5．蛋白质紫外吸收高峰在 nm，而核酸在 nm。
6．蛋白质的三级结构的稳定力量包括： 、 、 、 ，其中主要是 ，蛋白质的二级结构的主要稳定力量是 ，一级结构的主要稳定力量是 。
7．用紫外分光光度法测定Pr的含量是基于蛋白质分子中的 、 和 三种氨基酸的共轭双键具有紫外光的吸收能力。
8．α-螺旋通常在脯氨酸处中断，其原因是 。
9．蛋白质二级结构的四种基本类型是 、 、 、 。
10．序列测定常用的蛋白酶和试剂中，用 酶、 酶和 酶水解肽链，专一性要比用 酶和 （化学试剂）水解肽链差。
11．蛋白质之所以出现各种内容丰富的构象是因为 键和 键能有不同程度地转动。
12．构成Pr的四级结构需要两条以上的肽链，每条肽链称为一个 ，肽链与肽链之间靠 相连。 13．去污剂如十二烷基磺酸钠（SDS）使蛋白质变性是由于SDS能破坏 使疏水基团暴露到介质中。
14．蛋白质变性主要是由于 键等次级键破坏所致，变性后 、 、 活性发生改变。 15．β一转角的最大特点为 ，一般含有 氨基酸。
16．常用的拆开蛋白质分子中的二硫键的方法有 和 ，常用的试剂有 、 等。
17．在pH6.0时将Gly、Ala、Glu、Lys、Arg和Ser的混合物进行纸电泳向阳极移动最快的是 ，向阴极移动最快的是 和 ，移动很慢接近原点的是 和 ， 。
18．20种氨基酸中， 在稳定许多蛋白质结构中起重要作用，因为它可参与形成链内和链间的共价键。
19．20种氨基酸中 、 和 的β-碳原子与两个以上的基团相连，它们可使α-螺旋的结构变得不稳定。 20．蛋白质的磷酸化可以发生在下列主要氨基酸残基的位点上： 、 、 。
21．镰刀型红细胞贫血病是一种先天遗传分子病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个 被 所置换。
22．蛋白质是两性电解质，当溶液的pH在其等电点以上时蛋白质分子带 电荷，而在pH等电点以下时，带 电荷。 23．分离蛋白质混合物的各种方法主要是根据蛋白质在溶液中下列性质： 、 、 。 24．血红蛋白（Hb）与氧结合的过程呈现 效应，是通过Hb的 现象实现的，它的辅基是 。
25．肽链中的 氨基酸残基上的一个环氮上的孤对电子，像Met一样使之在结合血红蛋白的铁原子时成为起重要作用的潜在配体。
26．在生理条件下，一般球蛋白的构象是 侧链在外面， 侧链在内部；而非极性环境中，如膜蛋白在呈折叠状时，是 侧链在外面，而 侧链由于内部相互作用，呈中性状态。
27．蛋白质水解时，切断 ，随之产生游离的 基团和 基团，可用 试剂鉴定。 28．研究蛋白质构象的方法很多，但主要是应用 。
29．在20种氨基酸中， 和 分子量小而且不含硫，在折叠的多肽链中能形成氢键。
30．谷胱甘肽由三中氨基酸通过肽键联接而成，这三种氨基酸分别是 、 、 。 31．分子病是指 的缺陷，造成人体 的结构和功能的障碍，如 。
32．氨基酸在等电点时，主要以 离子形式存在，在pH>PI的溶液中，大部分以 离子形式存在，在pH 5 大部分以 离子存在。 三、 是非题 1． 蛋白质的亚基和肽链是同义的。 2． 双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。 3． 水溶液中蛋白质分子表成的氢原子相互形成氢键，因此具有一定的溶解性。 4． 只有在很高或很低pH时，氨基酸才主要以非离子化形式存在。 5． 两羧基-氨基的氨基酸等电点偏酸。 6． 除甘氨酸外，其余19种编码氨基酸都有旋光活性。 7． 维持蛋白质一级结构的化学键是肽键。 8． 蛋白质在进化过程中构象是易变的。 9． 蛋白质构象的改变必然涉及共价键的破坏。 10．蛋白质变性后，分子量发生改变。 11．纸电泳分离氨基酸是基于它们的极性性质。 12．溶液中蛋白质表面上的氢键供体与受体之间能形成氢键。 13．变性后蛋白质溶解度降低是因为中和电荷和去水膜所引起的。 14．在肽链的氨基酸分析中，除色氨酸因酸处理被破坏之外，所有的氨基酸都能用氨基酸分析仪准确地加以鉴定。 15．Pr分子中个别氨基酸的取代未必会引起Pr活性改变。 16．等电点不是Pr的特征参数。 17．二硫键和Pr的三级结构密切相关，因此没有二硫键的蛋白质就没有三级结构。 18．蛋白质变性后其生物活性就不可逆地丧失了。 19．变性的蛋白质一定沉淀，但沉淀的Pr不一定变性。 20．所有的天然存在具有活性的蛋白质都具有四级结构。 21．四级结构必须有两条或两条以上的肽键组成，胰岛素分子是由A、B两条链组成，所以胰岛素分子具有四级结构。 22．蛋白质在PI时其溶解度最小。 23．蛋白质分子中二硫键可用8mol/l的尿素拆开。 24．蛋白质的一级结构在很大程度上决定了它的三级结构。 25．蛋白质的二级结构是由于相邻氨基酸残基之间的相互作用而形成的，三级结构则主要是由于不相邻的氨基酸残基侧链之间的相互作用而形成的。 26．组成蛋白质的20种氨基酸分子中都含有不对称的α-碳原子。 27．有机溶剂引起蛋白质变性的主要原因之一是降低介质的介电常数。 28蛋白质和酶原的激活过程说明蛋白质的一级结构变化与蛋白质的功能无关。 29．利用盐浓度的不同可以提高或降低蛋白质的溶解度。 30．血红蛋白比肌红蛋白携氧能力高，这是因为它有多个亚基。 31．血红蛋白的α-链、β-链和肌红蛋白的肽链在三结结构上很相似，所以它们都有结合氧的能力。血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。 32．胰岛素的生物合成途径是先分别合成A、B两链，然后通过S-S键相连。 33．脯氨酸不能参与α-螺旋，它使α-螺旋转弯，在肌红蛋白和血红蛋白的多肽链中，每一个转弯处并不一定有脯氨酸，但是每个脯氨酸却产生一个转弯。 34．天然氨基酸都具有一个不对称α-碳原子。 35．亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。 36．浓NaCl易破坏离子键，浓尿素易破坏氢键。 37．肽的命名是从肽链的游离氨基开始的。 38．变性后的蛋白质，在适合的条件下全部都能复性。 39．切开胰岛素分子中链间两对二硫键后，分子量并不改变。 40．血红蛋白与肌红蛋白均为氧的载体，前者是一个典型的别构蛋白因而与氧结合过程中呈现正协同效应，而后者却不是。 41．在蛋白质和多肽分子中，只存在一种共价键——肽键。 42．两条单独肽链经链间二硫键交联，组成蛋白质分子，这两条肽链是该蛋白质的亚基。 43．蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电位的pH溶液中，将向阴极移动。 44．与肌红蛋白不同，血红蛋白由四个亚基组成，因此提高了它与氧的结合能力，从而增加了输氧的功能。 45．疏水作用是使蛋白质立体结构稳定的一种非常重要的稳定作用。 46．所有蛋白质分子中N元素的含量都是16%。 47．蛋白质是由20种L-型氨基酸组成，因此所有蛋白质的分子量都一样。 48．刚性平面结构的肽单位是蛋白质主链骨架的重复单位。 49．从原子组成上可以把肽键看作是一种酰胺键，但两者并不完全相同。肽键的实际结构是一个共振杂化体，6个原子位于同一个平面上。 50．蛋白质构象的变化伴随自由能的变化，最稳定的构象自由能最低。 51．蛋白质变性是其构象发生变化的结果。 52．烷基化和烃基化都是与氨基酸的氨基发生的反应。 53．同一种氨基酸的对映体旋光度相等但方向相反。 54．酸和酶水解蛋白质得到的氨基酸不产生消旋作用。 55．氨基酸是生物体内唯一含有氮元素的物质。 56．含二硫键较多的蛋白质分子，加热变性所需要的温度要相对高些。 57．疏水环境比亲水环境更有利于α-螺旋的形成。 58．肽键上所有原子和它两端的Cα都位于同一刚性平面上。 59．从蛋白质盐酸水解液中获得的丝氨酸具有与L-甘油醛相同的绝对构型。 60．球状蛋白质的三级结构只需在α-螺旋或β-折叠的基础上即可形成。 61．转角只存在于球状蛋白质中。 62．蛋白质分子的肽链数就是它的亚基数。 63．蛋白质变性后，其空间结构由高度紧密状态变成松散状态。 64．蛋白质的三维结构与环境条件有直接关系。 6 65．组蛋白是一类碱性蛋白质，它含有很多的组氨酸。 66．两性离子氨基酸在溶液中，其正负离子的解离度与溶液的pH无关。 67．半胱氨酸分子中含有-SH基，故能参与体内一些氧化还原反应。 68．尽管Cα原子的Cα-N和Cα-C键是可以自由旋转的单键，但是由于肽键所处的具体环境的制约，Φ角和Ψ角并不能任意取值。 69．溶液的pH可以影响氨基酸的PH值。 70．由于各种天然氨基酸都有280nm的光吸收特征，据此可以作为紫外吸收法定性检测蛋白质的依据。 四、 选择题 1． 镰刀状细胞贫血病是最早被认识的一种分子病，它是由于血红Pr的二条β亚基中的两个谷氨酸分别为下述的氨基酸所替代。 A．丙氨酸 B．缬氨酸 C．丝氨酸 D．苏氨酸 2．利用Pr颗粒是带电荷物质而进行的操作技术有： A．电泳和薄层层析 B．离心和亲合层析 C．凝胶过滤和紫外吸收 D．电泳和离子交换 3．下列关于Pr结构叙述不正确的是： A．三级结构即具有空间构象 B．各种Pr均具有一、二、三、四级结构 C．一级结构决定高级结构 D．无规则卷曲是在一级结构上形成的 4．下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的？ A．酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环 B．酪氨酸和丝氨酸都含有羟基 C．脯氨酸和酪氨酸都含有羟基 D．组氨酸、色氨酸和脯氨酸都是非极性氨基酸 5．下列哪一类氨基酸完全是非必需氨基酸？ A．碱性氨基酸 B．含硫氨基酸 C．芳香族氨基酸 D．以上三种答案均不对 6．处于等电状态的蛋白质 A．分子不带电荷 B．分子最不稳定、易变性 C．分子带的电荷最多 D．易聚合成多聚体 7．对具有四级结构的蛋白质进行一级结构分析时 A．只有一个自由的α-氨基和一个自由的α-羟基 B．只有自由的α-氨基，没有自由的α-羧基 C．只有自由的α-羧基，没有自由的α-氨基 D．有一个以上的自由α-氨基和α-羧基 8．蛋白质变性是由于 A．蛋白质一级结构的改变 B．蛋白质亚基的解离 C．蛋白质空间构象的破坏 D．辅基的脱落 9．利用颜色反应测定氨基酸含量时，通常用哪种试剂 A． Sanger 试剂 B．Edman 试剂 C．甲醛 D．茚三酮 10．下列关于α-螺旋的论述中，错误的应是 A．α-螺旋通过疏水性相互作用而稳定 B．α-螺旋由分子内的氢键稳定 C．α-螺旋是某些Pr二级结构的一种类型 D．Pro 和Gly具有阻止α-螺旋结构的倾向 11．下列氨基酸中不能引起偏振光旋转的氨基酸是 A．Ala B．Leu C．Gly D．Ser 12．下列含有两个羧基的氨基酸是： A．Ala B．Leu C．Gly D．Ser 13．关于氨基酸的说法下列哪一个是错误的 A．Tyr与Phe含有苯环 B．Tyr与Ser都含有羟基 C．Glu和Asp都含有两个羟基 D．Lys与Arg都是酸性氨基酸 14．下列关于肽键的说法哪一个是不正确的 A．具有部分双键性 B．通常有一个反式构型 C．比通常的C-N键短 D．能自由旋转 15．在层析分离氨基酸时，下列哪一种氨基酸跑得最慢 A．Lys B．Leu C．Asn D．Ser 16．蛋白质可与碱共热水解，虽然这个过程会破坏一些氨基酸，但它却被常用来定量蛋白质中的 。 A．丝氨酸 B．半胱氨酸 C．苏氨酸 D．色氨酸 17．同源蛋白是指 A．来源相同的各种蛋白质 B．来源不同的同一种蛋白质 C．来源相同的同一种蛋白质 D．来源不同的各种蛋白质 18．下列具的协同效应的蛋白质是 A．肌红蛋白 B．血红蛋白 C．丝心蛋白 D．弹性蛋白 19．下列哪种氨基酸可与米伦试剂发生反应 A．胱氨酸 B．天冬氨酸 C．酪氨酸 D．丙氨酸 20．胰蛋白酶专一水解多肽键中 A．碱性残基N端 B．酸性残基N端 7