放置1小时以上或静置过夜，沉淀物以中速定性滤纸过滤，用70℃以上热水反复洗残渣，直至滤液无硫酸根离子为止(取5%氯化钡试液5滴于表面皿中，加2mol/L盐酸1滴，滴入滤液，在黑色背景处观察应无白色沉淀)。将滤纸与残渣包好，放入烘箱，在65-75℃干燥2h. 2.3.5.2试样的消化：将烘干的试样连同滤纸一起放入消化管中，以下操作同仲裁法或凯氏定氮仪法。 2.3.6 结果计算 2.3.6.1 计算公式 粗蛋白质与真蛋白质含量计算方法同仲裁法或凯氏定氮仪法。 真蛋白质比率(%)=真蛋白质含量/粗蛋白质含量*100 2.3.6.2 重复性 蛋白质含量在40%以上时允许相对平均偏差2%； 蛋白质含量在40%以下时允许相对平均偏差2.5%。 3 饲料中粗脂肪的测定 饲料脂肪的测定，通常是将试样放在特制的仪器中，用脂溶性溶剂（乙醚、石油醚、氯仿等）反复抽提，可把脂肪抽提出来，浸出的物质除脂肪外，还有一部分类脂物质也被浸出，如游离脂肪酸、磷脂、蜡、色素以及脂溶性维生素等，所以称为粗脂肪。 测定粗脂肪的方法常用的有油重法、残余法、浸泡法等。 3.1粗脂肪测定仪法 3.1.1 仪器和用具 3.1.1.1 分析天平：感量0.0001g 3.1.1.2 实验室用粉碎机或研钵 3.1.1.3干燥箱 3.1.1.4备有变色硅胶的干燥器 3.1.1.5脱脂棉、广口瓶、脱脂细纱、脱脂线 3.1.1.6脂肪测定仪及用具 3.1.1.7滤纸筒：用直径125mm圆形滤纸摺成外径24mm左右，长度50mm左右的滤纸筒 3.1.2 试剂 无水乙醚，AR级 3.1.3 操作步骤 3.1.3.1 检查电源 上否完好，水源是否接牢，开电源开关，设定温控仪和调温旋扭温度，预热15分钟。 3.1.3.2 将抽提筒用开水洗净，洗至筒内无任何杂质，置于干燥箱内烘1小时左右（105℃）取出编号，称重后移入干燥器内冷却备用，编号并称重。 3.1.3.3 试样准备 3.1.3.3.1 粮食、饲料等低油样品，可直接称取粉碎样品2克左右，精确至0.0002克，先在滤纸筒内底部塞一层脱脂棉，然后将样品转入筒内，再用脱脂棉盖在试样上。 3.1.3.3.2 油料等高油样品在备用试样中称取2克左右试样，倒入烘盒中，放入干燥箱中在105℃温度下烘30分钟趁热加入研钵中进行研磨，磨粹后，加入适量的脱脂细砂（约2克左右）与试样同磨，将试样研至出油状后，干净地转入在底部塞脱脂棉滤纸筒内，用脱脂棉醮少许乙醚，揩净研钵上试样和脂肪，并入滤纸筒内，再用脱脂棉盖在试样上。 3.1.3.4 试样转入仪器，手握提把，使速节通近软轴提至适当位置，将滤纸筒上口对准速节吸合即可，然后拉下提把，将滤纸筒移至适当高度（使抽提筒放入时不碰），并观察滤纸筒时否在冷凝管中心。 3.1.3.5 将抽提筒从干燥器中取出，置于托架上，在抽提 内加入适量的无水乙醚约50ml，然后手握托架手柄将抽提筒移入加热板上，然后用托架将抽提筒抬上，使抽提筒上口对准下保护套的园柱孔，保证二平面接触良好，拉下压杆使锁紧勾子同座子锁牢，然后再将抽提筒稍加旋转，以保证二平面接触良好。 3.1.3.6 接通水源给水管、排水管，开启冷凝管旋塞至手柄方向垂直于水平面。
3.1.3.7 手握提把上移，将试样降入抽提筒底浸泡，此时，将温控仪和调温旋扭温度设置为60-70℃，具体按溶剂沸点及室温度。 3.1.3.8 从溶剂挥发开始浸泡适当时间，将滤纸筒年长约5cm，进行抽提，再将滤纸筒提升1cm，同时将冷凝管旋塞塞至手柄方向平行于水平面进行溶剂回收，时间约为15分钟。 3.1.3.9 关闭电源，左手握住压杆，拉开锁紧勾子，使冷凝管复位，同时右手握住托架手柄将托架上抬，等冷凝管复位后，用托架皎抽提筒在加热板上取出，待溶剂完全挥发后转入干燥箱中烘去水分，一般为45分钟（105℃）后移入干燥器内冷却称量，计算含油量，最好使所得油脂达到恒重（即多次烘干、冷却、称量，使最后二次称重，前后重差在0.002g以内）。 3.1.3.10 将滤纸筒移至适当位置，摘下滤纸筒后，取出回收溶剂，回收时将溶器放在冷凝管下部，容器口对准冷凝管下口完全打开旋塞，等到聚集在冷凝管内的溶剂流完为止，取出盛有回收溶剂的容器，倒入大容 器中以备用。 3.1.3.11 使用结束 ，关闭电源 ，擦洗干净。 3.1.4 时间表 含油量(%) 浸泡时间(h) 提抽时间（h） 0.5-5 0.5 1 5-15 1 1 15-25 1 1.5 25-35 1.5 1.5 35-45 2.5 2 45-60 3 2.5 3.1.5 结果计算 粗脂肪%＝W1/W2*100 W1---粗脂肪重量 W2---试样重 3.2 国标法 3.2.1 测定原理 用乙醚等有机溶剂反复浸提饲料样本，使其中脂肪溶于乙醚，并收集于盛醚瓶中，然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收，直接称量盛醚瓶中的脂肪重，即可计算出饲料样本中的脂肪含量。 3.2.2仪器设备 索氏脂肪抽提器，恒温水浴锅，干燥器，坩埚坩，烘箱，镊子，称量瓶，分析天平，滤纸或滤纸筒（中速脱脂）。 3.2.3 试剂 无水乙醚（化学纯）。 3.2.4 测定步骤 3.2.4.1 索氏提取器应干燥无水，将抽提瓶洗净于105℃±2℃干燥箱中烘干30min，然后置于干燥器中冷却30min，称重，如此反复进行，至最后两次重量之差小于0.0008g为止。 3.2.4.2 精称风干样品2g左右于滤纸筒中或用滤纸包好，并用铅笔注明标号，放入105℃烘箱中烘干2h。滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度。应以可全部浸泡于乙醚中为准。 3.2.4.3 将滤纸筒或包放入抽提管中，在抽提瓶中加无水乙醚60-100ml，在60-75℃的水浴上加热，使乙醚回流每小时约为8-10次。浸提时间依样品中脂肪含量而定。一般约需8-16h或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。 3.2.5 结果计算 3.2.5.1 计算公式 粗脂肪=(W2-W3)/W1*100% 式中：W1为样品重（g）；W3为抽提瓶重（g）；W2为盛有脂肪的抽提瓶重量（g）。 3.2.5.2 重复性 每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10%以上，允许相对偏差为3%。粗脂肪含量在10%以下时，允许相对偏差为5%。 4 饲料中粗纤维的测定
4.1 粗纤维测定仪 4.1.1仪器和用具 4.1.1.1粗纤维测定仪 4.1.1.2分析天平 4.1.1.3干燥箱 4.1.1.4高温炉 4.1.1.5粉碎机及分样筛 4.1.1.6干燥器 4.1.2 试剂 硫酸、氢氧化钠、95%乙醇、乙醚、正辛醇 4.1.3 操作前准备 4.1.3.1试剂制备 4.1.3.1.1 硫酸溶液（0.128mol/L）：取浓硫酸约75ml，用蒸馏水稀释到1000ml，用已知浓度的NaOH液标定后，调整其浓度至1.28±0.005mol/L的硫酸原液，用前用蒸馏水稀释10倍即可。 4.1.3.1.2碱溶液（0.312mol/L）：取饱和NaOH溶液（680g/L）约190ml，用不含CO2蒸馏水稀释500ml，用已知浓度的酸液标定后，调整其浓度至3.12±0.005mol/L的碱原液，用前用蒸馏水稀释10倍即可。 4.1.3.2 样品制备 4.1.3.2.1取有代表性的样品，拣去杂质，按四分法取25g左右。 4.1.3.2.2 将样品置在60-65℃烘箱骨干燥8小时左右，冷却后粉碎，全部通过0.84mm2(20目)筛子，其中大于40目的不得小于50%，小于60目不得大于10%。 4.1.3.2.3 样品中的脂肪含量超过1%需要脱脂，（可用测定粗脂肪后残渣分析）。 4.1.3.2.4 将坩锅用开水洗净，洗至坩锅内无杂质，置于干燥箱内105℃烘1小时，移入干燥器内冷却至室温，编号，再置于干燥箱内备用。 4.1.4 操作步骤 4.1.4.1 在已编号后的坩锅内准确地称取净干的平均试样或烘干无水的脱脂1-3g（谷物2-3g）准确至0.0001g。 4.1.4.2接通电源、水源、开启主机电源开关（自来水尽是开足保证冷凝）。 4.1.4.3打开酸、碱预热瓶上盖，分别 加入已制备的酸碱溶液及蒸馏水，加至预热瓶的90%，盖上冷凝球。 4.1.4.4开启酸预热电源开关，预热酸至微沸。 4.1.4.5将装有试样的坩锅移入仪器温室中，下部放入坩锅座中心，上部对准消煮管下的保护套的内孔，压下手柄并锁紧再一次检查坩锅位置是否准确后，将下阀全部关闭，逐个拉出加热器手柄。 4.1.4.6开启酸阀，逐个开上阀，在消煮管内加入少量约5ml硫酸溶液，再开吸开关，逐个开下阀，抽尽溶液 ，关吸开关和全部下阀。然后将乙预热好的硫酸溶液加至150ml后，再在每个消煮管内加入3-4滴正辛醇，开定时器同时按需要分别开中热器电源开关，调节选位旋钮可观察单个加热电压。并将电压调至最高（220V）同时开启蒸馏水预热开关（预热水至沸点）。待消煮液微沸，将电压逐个调至样品无沉淀时将定时旋钮旋至30min，保持消煮液微沸（如发现试样粘壁可补加消煮液），到时加温自动停止。 4.1.4.7开吸开关，再逐个开下阀将消煮液快速抽掉（在10min内抽尽）并用热水洗涤残渣至中性（约三次）后抽尽洗液，在抽滤过程中如发现坩锅被堵塞时关吸开关，开吹开关用气流反冲，发现消煮管内出现气泡后关吹开关开吸开关继续抽吸。 4.1.4.8按4.6步骤进行碱消煮。 4.1.4.9按4.7方法抽洗碱消煮液，逐个推进加热器手柄。 4.1.4.10脱色和胶脂，全部关闭下阀，用胖肚吸管分别在消煮管上口分三次加入95%乙醇浸泡、抽滤（总共约20ml，每次泡浸时间约1min）后，再分三次加入乙醚冲洗（每次约20ml），若已脱脂样品不需要用乙醚冲洗。
4.1.4.11左手压下手柄拉出锁紧勾子缓缓上升，使其复位，带好手套取出存有试样的坩锅，待乙醚和乙醇全部挥发完，再移入干燥箱内在130℃温度下烘2小时，取出置于干燥器内冷却至室温称重（A1）。 4.1.4.12将称重后的坩锅置 入550℃电阻炉内灼烧30min，待炉温降至200℃以下，从电阻炉内取邮置于干燥器内冷却至室温称重（A2）。 4.1.5结果计算 CF%＝（A1-A2）÷S1×100 CF—粗纤维的百分含量（%） A1—坩锅+粗纤维+残渣及灰分质量（g） A2—坩锅+残渣及灰分质量（g） S1--试样重量(g) 4.2 国标法 4.2.1 测定原理 用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去醇溶解物，经高温灼烧扣除矿物质量，所余量即为粗纤维。粗纤维不是一个确切的化学实体，主要由纤维素和少量半纤维素、木质素等组成。 4.2.2 仪器设备 抽滤装置（抽真空装置、抽滤瓶及漏斗），电炉，马福炉，高型无嘴烧怀，冷凝球，古氏坩埚，干燥箱，量筒（200、50ml）、酸洗石棉。 4.2.3 试剂及配制 4.2.3.1 硫酸溶液（0.128mol/L）：取浓硫酸约75ml，用蒸馏水稀释到1000ml，用已知浓度的NaOH液标定后，调整其浓度至1.28±0.005mol/L的硫酸原液，用前用蒸馏水稀释10倍即可。 4.2.3.2 碱溶液（0.312mol/L）：取饱和NaOH溶液（680g/L）约190ml，用不含CO2蒸馏水稀释500ml，用已知浓度的酸液标定后，调整其浓度至3.12±0.005mol/L的碱原液，用前用蒸馏水稀释10倍即可。 4.2.3.3 乙醚、95%乙醇、正辛醇。 4.2.4 测定步骤 4.2.4.1 酸处理：精称样本1-2g左右（若样本脂肪含量在8%以上，须先用乙醚脱脂），小心放入500ml高型无嘴烧杯，用量筒准确加入200ml硫酸 ,加一滴防泡沫剂，并在液面处划一刻度线。然后放在电炉上，装上冷凝球，通入冷水，加热使溶液在1min内沸腾，记时，维持微沸状态30min，取下加入蒸馏水200ml，静置15-20min，待样品下沉后，在抽滤装置上抽去上清液，再用少量蒸馏水冲洗漏斗。滤布处附着样本于无嘴烧杯中，然后用NaOH溶液中和至沉淀液呈中性（用广泛试纸检查）。 4.2.4.2 碱处理：在无嘴烧杯中加入NaOH溶液至200ml刻度处，将无嘴烧杯在电炉上如酸处理一样微沸处理30min，取下加入蒸馏水200ml，静置15-20min，抽去上层清液，冲洗滤布后，用硫酸调至中性。 4.2.4.3 抽滤：将经酸、碱处理后的中性沉淀液移入辅有石棉的古氏坩埚中抽滤，然后将烧杯壁残渣完全洗于坩埚中抽滤，再用乙醇25ml冲洗坩埚中的残渣。 4.2.4.4 烘干灰化：取下坩埚，用纱布将其外壁擦净，放入105℃烘箱中烘至恒重，然后于电炉上小心炭化至无烟后，放入550℃高温电炉灼烧30min，称重，再灼烧15min，冷却称重，直至恒重为止。 4.2.5 结果计算 4.2.5.1 计算公式同粗纤维测定仪法 4.2.5.2 重复性：每个试样应取两个平行样测定，以其算术平均值为结果。粗纤维含量在10%以下，允许绝对值相差0.4；粗纤维含量在10%以上，允许相对偏差为4%。 5 饲料中粗灰分的测定 试样经灼烧完全后，余下的残留物质（如氧化物和盐）称为灰分。灰分有水溶性与水不溶性，酸溶性、酸不溶性。水溶性灰分大部分是钾、钠、钙、镁等氧化物和可溶性盐，水不溶性灰分