与氨试液4ml，密塞，摇匀，放置过夜，滤过，药渣加乙醚50ml，连续振摇1小时，滤过，药渣再用乙醚洗涤3～4次，每次15ml，滤过，洗液与滤液合并，低温蒸干。残渣加氯仿2ml使溶解，转入分液漏斗中，用氯仿3ml分次洗涤容器，洗液。并入分液漏斗中，用0．05mo1／L硫酸溶液提取3次，每次5ml，酸液依次用同一氯仿lOml振摇洗涤，合并。酸液，加氨试液调节pH值至9，再用氯仿提取3次，每次loml，氯仿液依次用同一水20ml振摇洗涤，合并氯仿液，低温蒸干，残渣加无水乙醇适量使溶解，转入5ml量瓶中，用无水乙醇分次洗涤容器，洗涤液并入量瓶中，再加无水乙醇至刻度，摇匀。精密量取上述溶液及无水乙醇空白溶液各2．5rrd，分别置25ml量瓶中，照标准曲线绘制各项下的方法，自\各精密加入碱性盐酸羟胺试液1．5ml\起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中酯型生物碱的重量(,ug)，计算，即得。《中华人民共和国药典)eo00年版(一部)规定制川乌含酯型生物碱以乌头碱(C34H47N011)计，不得过0．15％。
②酯型生物碱的含量测定：取本品中粉109，精密称定，照上述酯型生物碱测定法项下的方法，自\加乙醚50\起至\洗液与滤液合并，低温蒸干\，用乙醚一氯仿(3：1)的混合液代替乙醚。残渣加混合液5ml使溶解并蒸干，再加乙醇5ml使溶解，精密加入硫酸滴定液(0．01mo1／L)15ml、水15ml与甲基红指示液3滴，用氢氧化钠滴定液(0．01mo1／L)滴定至黄色。每lml硫酸滴定波(0．01mo1／L)相当于12．9mg的乌头碱(c34H47N011)o
(4)生物总碱的含量测定(滴定法)：
①酸碱滴定法：取药材细粉约59，置125ml具塞烧瓶或分液漏斗中，加乙醚50，振摇后，加10％氨试液2．5ml，振摇10分钟，放置4小时，加水2ml，剧烈振摇10分钟，放出乙醚液，过滤入25\三角瓶中，残渣再用乙醚振摇至少提取6次，每次15ml，每次滤液过滤入三角瓶。蒸去乙醚后，残渣再加入乙醚5ml，再蒸干，加入中性醇(对甲基红指示液呈中性)5ml，微热使其溶解后，加入新煮沸放冷的水30ml与甲基红指示液4滴，用0．02mo1／L盐酸溶液滴定。每毫升0．02mo1／L盐酸溶液相当于12．914mg的乌头碱。本品所含总生物碱以乌头碱(c34H47N01l)计。
②非水滴定法：取粉末用氨水碱化后，在沙氏提取器中用乙醚提取，醚液用0．1mo1／L硫酸溶液提取，酸液经碱化后用氯仿提取，氯仿提取液用无水硫酸钠干燥后，蒸去氯仿，用乙醚溶解，再蒸去乙醚，残渣溶于醋酐中，用0．Ohno1／L高氯酸标准溶液滴定，以甲紫为指示剂，所得总生物碱以乌头碱计算。 (二)药理作用与临床应用 1．药理作用
(1)对心血管系统的作用：
①强心作用：熟附片煎剂对离体心脏、在体心脏及戊巴比妥钠所致的衰竭心脏均有明显的强心作用，剂量加大可现心律不齐。生附子因含有大量乌头碱，对心脏呈现明显毒性。经久煎煮后，乌头碱水解为乌头原碱，毒性大减，而强一已成分经煎煮却依然存在。从附子提得的
去甲乌药碱是附子篚主要强心成分之一，将其稀释至10-9浓度时，仍然表现强一已作用。去甲乌药碱对离体心脏、在体心脏亦有强心作用，能耀强心肌收缩力，加快心率，使一fl,输出量增加。亦能使培养的心肌细胞搏动频率及振幅增加。
②抗心律失常作用：附子对异博定所致小鼠缓慢型心得失常有明显防治作用，能改善房室传导，加快心率，恢复窦目心律。减少异博定中毒引起的动物死亡率。并对用甲醛所刭家兔窦房结功能低下症有一定的治疗作用，使窦房结与房重结功能趋于正常，可提高心率，恢复窦性心律。有效成分主要是消旋去甲乌药碱。
③对血管和血压作用：附子注射液静脉注射后使麻醉多心输出量、冠状动脉、脑及股动脉血流量明显增加，血管阻降低，有明显扩张血管作用。生附子有一过性降压作用，用同样剂量的制附子有一过性升压作用，此升压作用可被六烃季胺部分对抗，被酚妥拉明完全拮抗，其作用部位可能是受体和神经节。对戊巴比妥钠所致心衰猫的血压下降有升压作用，使心率加快，心收缩功能改善。附子中含有降压和升压成分。降压的有效成分主要是消旋去甲乌药碱；升压的主要有效成分是氯化甲基多巴胺。
④提高耐缺氧能力作用：附子能显著提高小鼠对缺氧的耐受力。附子注射液能对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血，对麻醉犬急性心肌缺血损伤的范围和程度有明显的缩小和减轻作用。此作用与其扩张心、脑血管，改善心、脑循环有关。
⑤抗休克作用：附子及其复方制剂对失血性休克，内毒素性休克，心
源性休克及肠系膜上动脉夹闭性休克等能提高休克动物的平均动脉压，延长其存活时间和存活百分率，有显著保护作用。此外，对纯缺氧性休克、血管栓塞性休克等亦有明显的保护作用：可不同程度地提高其平均动脉压，延长休克动物存活时间。 (2)对神经系统的作用
①镇静、镇痛作用：生附子能延长环己巴比妥的睡眠时间，抑制小鼠白发活动。生附子及乌头碱能抑制压迫大鼠尾部引起的疼痛和腹腔注射醋酸引起的小鼠扭体反应，具有显著的镇痛作用。
②局麻作用：附子、乌头和乌头碱能刺激局部皮肤，使皮肤黏膜的感觉神经末梢呈兴奋现象，产生瘙痒与灼热感，继以麻醉，丧失知觉。乌头碱对神经肌肉接头活动和神经干复合电位首先是阻遏兴奋在神经末梢的传导，高浓度也可使神经干完全丧失兴奋和传导冲动的能力。
③抗寒作用：附子煎剂在寒冷环境下能抑制小鸡及大鼠的体温下降，甚至使降低的体温升高，延长生存时间，减少死亡率。
(3)抗炎作用：附子煎剂对大鼠甲醛性、蛋清性、组胺性、角叉菜胶性踝关节肿胀有明显的抑制作用。附子的甲醇提取物对小鼠醋酸所致血管通透性增加有抑制作用。乌头碱类(乌头碱、中乌头碱及次乌头碱)在低剂量下能抑制小鼠醋酸所致血管通透性增加和大鼠组胺所致的血管通透性增加，抑制大鼠、小鼠角叉菜胶性足跖浮肿，也能抑制受精鸡胚的浆尿膜加肉芽形成。附子不含生物碱的水提液也有明显的抗炎作用。附子的抗炎作用原理，由于给附子后肾上腺内维生素C和