(4)使用尽可能短的引物，以降低简并性，最短可用15～20个碱基。
(5)由于TaqDNA聚合酶在PCR扩增时容易掺人错误碱基，所以设计的引物，其3'端尽量使用具有简并密码的氨基酸。 22. 大肠杆菌产生核酸限制性内切酶是为了水解破坏外源的DNA，而大肠杆菌本身的DNA已经被甲基化修饰，所以不被其本身的核酸限制性内切酶所水解。
23. 不同。RNA可以被水解成单核苷酸，而DNA分子中的的脱氧核糖2'碳原子上没有羟基，所以DNA不被碱水解。 24. (1)EDTA是螯合剂，可同Mg2+离子螯合，使核酸酶失去了作用的辅助因子，而被抑制活性； (2)蔗糖增加缓冲液的黏度，保护DNA不易断裂。
25. (1)DNA半保留复制的原理，在体外进行DNA的变性、复性和引物延伸。 (2)至少要预先知道足够合成一对引物的靶DNA序列。
第6章 维生素与辅酶自测题
(一) 名词解释
1．维生素, 2．抗维生素, 3．维生素缺乏症, 4．维生素中毒症, 5．脂溶性维生素 6．水溶性维生素, 7．维生素原, 8．内源因子
(二) 填空
1．维生素是维持机体正常代谢和健康所必需的一类 化合物，该物质主要来自 ，其中 ， 两种维生素可以在体内由 和 转变生成。
2．维生素A在体内的活性形式包括 、 和 。
3．自然界黄红色植物中含β—胡萝卜素、它在小肠粘膜 催化下生成两分子 ，所以通常将β—胡萝卜素称为 。
4．维生素D是属于 衍生物，储存于皮下的 经紫外线照射转变为维生素D3，必须在肝、肾羟化生成 是D3 型。
5．维生素E对 极敏感，且易自身 ，因而能保护其它物质免遭氧化，所以具有 作用。
6．维生素K的生化作用是促进肝合成 的前体分子中谷氨酸残基羧化生成 转变为活性型。催化这一反应的为 酶，维生素K是该酶的 ，因此具有促凝血作用。
7．维生素B1 因含有硫和氨基又名 ， 其在体内活性形式为 ， 它 是 体内 酶和 的辅酶，参与糖代谢。
8．维生素Bl缺乏时，神经组织 不足，并伴有 和 等物质堆积，可引起 。 9．维生素B2是 和 的缩合物，因其结晶呈桔黄色又称 。
10．维生素B2在体内黄素激酶和焦磷化酶的催化下转变成活性型的 和 ，是黄素酶的辅基，参与氧化还原反应。
11．维生素PP包括 和 两种，都是 的衍生物，在体内可由 转变生成。
12．维生素PP在体内的活性形式是 和 是多种不需氧脱氢酶的辅酶，分子中的尼可酰胺部分具有可逆的 及 特性。
13．维生素B6在体内经磷酸化转变为活性型的 和 ，它们是 及 的辅酶。
14．临床上常用维生素B6治疗小儿惊厥和呕吐，其机理是维生素B6是 的辅酶，能催化 脱羧生成 ，该产物是一种抑制性神经递质。
15．泛酸与 及3′磷酸腺苷5′焦磷酸结合组成 ，后者是 酶的辅酶。
16．因为生物素具有转移、携带和固定 的作用，所以是体内 酶的辅酶，参与多种物质的 反应。 17．叶酸在体内叶酸还原酶的催化下转变为活性型的 ，是体内 酶的辅酶，携带 参与多种物质的合成。 18．维生素B12在消化道与胃粘膜分泌的 结合才能在小肠被吸收。维生素B12体内的活性型为 。
19．维生素B12是 的辅基，参与同型半胱氨酸转变成 的反应。当维生素B12缺乏时导致核酸合成障碍，影响细胞分裂结果产生 。
20．维生素C参与体内多种物质的 反应，因此具有促进 合成的作用。维生素C还可作为一种 ，参与体内多种氧化还原反应。 (三) 选择题
1． 下列辅酶中的哪个不是来自于维生素?
A CoA B CoQ C PLP D FH2 2． 肠道细菌可以合成下列哪种维生素?
A 维生素K B 维生素C C 维生素D D 维生素E 3． 下列叙述哪一种是正确的? A 所有的辅酶都包含维生素组分。
B 所有的维生素都可以作为辅酶或辅基的组分。 C 所有的B族维生素都可以作为辅酶或辅基的组分。
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D 只有B族维生素可以作为辅酶或辅基的组分。 4． 下列化合物中除哪个外都是环戊烷多氢菲的衍生物。 A 维生素D B 胆汁酸
C 促肾上腺皮质激素 D 肾上腺皮质激素 5． 下列化合物中，除哪个外都是异戊二烯的衍生物。 A 视黄醇 B 生育酚 C 鲨烯 D 核黄醇 6． 多食糖类需补充
A 维生素B1 B 维生素B2 C 维生素B5 D 维生素B6 7． 多食肉类，需补充
A 维生素B1 B 维生素B2 C 维生素B5 D 维生素B6 8． 以玉米为主食，容易导致下列哪种维生素的缺乏。 A 维生素B1 B 维生素B2 C 维生素B5 D 维生素B6 9．下列化合物中哪个不含环状结构?
A 叶酸 B 泛酸 C 烟酸 D 生物素 10．下列化合物中哪个不含腺苷酸组分?
A CoA B FMN C FAD D NAD+ 11．需要维生素B6作为辅酶的氨基酸反应有 A 成盐、成酯和转氨 B 成酰氯反应 C 转氨、脱羧和消旋 D 成酯、转氨和脱羧 12．下列情况中，除哪个外均可造成维生素K的缺乏症。 A 新生儿 B 长期口服抗生素
C 饮食中完全缺少绿色蔬菜 D 素食者 13. 维生素A在视色素中的活性形式是( )
A 反视黄醛 B 11-顺视黄醛 C 胡萝卜素 D 视黄酸 14．真正的、具有生物活性的维生素D是( )
A 25—羟基D3 B D3 C 7—脱氢胆固醇 D 1，25—二羟基D3 15. 维生素D的结构是一种( )
A 醇 B 酚 C 醛 D 酮
16. 在凝血过程中发挥作用的许多凝血因子的生物合成依赖于下述的哪一种维生素
A 维生素K B 维生素E C 维生素C D 维生素A (四) 是非题
1． 四种脂溶性维生素都是异戊二烯衍生物，属于类脂。 2． 所有B族维生素都是杂环化合物。
3． B族维生素都可以作为辅酶的组分参与代谢。 4． 脂溶性维生素都不能作为辅酶参与代谢。
5． 除了动物外，其他生物包括植物、微生物的生长也有需要维生素的现象。 6. 植物的某些器官可以自行合成某些维生素，并供给植物整体生长所需。 7． 维生素E不容易被氧化，因此可做抗氧化剂。 8． B族维生素具有相似的结构和生理功能。
9． 经常做日光浴有助于预防佝偻病和骨软化症的出现。 10．还原型核黄素溶液有黄绿色荧光，氧化后即消失。 11．维生素B12缺失症可以通过口服维生素B12加以治疗。 12．L-抗坏血酸有活性，D-抗坏血酸没有活性。 13．有些动物可以在体内合成维生素C。
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（五） 问答题
1．比较两类维生素的生物特点。
2. 试述维生素A缺乏时，为什么会患夜盲症。 3. 简述佝偻病的发病机理。
4. 维生素K促进凝血的机理是什么?
5．为什么维生素B1缺乏会患脚气病? 6．试述维生素B6的生化作用。 7．简述维生素C的生化作用。
8．叶酸和维生素Bl2缺乏与巨幼红细胞性贫血的关系如何? 9. 试述维生素E的生化作用。
10．为什么长期服用异烟肼的病人宜配合服用维生素PP和维生素B6。
六、参考答案
(一) 名词解释
1．维生素：维生素是机体维持正常生命活动所必需从食物中摄取的一类小分子有机化合物。维生素虽然需要量少，但是人
体不能合成或合成量不足，所以必需从食物中摄取。
2．抗维生素：某些化合物的结构类似于维生素的结构，它们在体内与维生素竞争，而使维生素不能发挥作用，这些化合物
被称为抗维生素。在研究维生素缺乏病的过程中经常使用某些维生素的抗维生素来造成动物发生维生素缺乏病。 3．维生素缺乏症：当缺乏维生素时，机体不能正常生长，甚至发生疾病，这种由于缺乏维生素而发生的疾病称为维生素缺
乏病。
维生素缺乏的主要原因有：
①摄入量不足或缺乏。包括食物中缺乏维生素或食物中的维生素被破坏，以及使用抗生素杀死了肠道细菌，使由肠道细菌
提供的维生素发生缺乏。
②维生素的吸收发生障碍。由于消化系统疾患或缺乏维生素吸收所必需的某些因子。 ③维生素需要量增加，使摄人量相对不足。
4．维生素中毒症：当某种维生素的摄人量过量时，可以造成机体发生某些疾病，这些疾病就被称为维生素中毒症。 5．脂溶性维生素：能溶于非极性溶剂的维生素称为脂溶性维生素。主要包括：维生素A、维生素D、维生素K、维生素E。 6．水溶性维生素：能溶于极性溶剂的维生素称为水溶性维生素。
主要包括：维生素C和B族维生素(维生素B1、维生素B2、维生素PP、维生素B6、泛酸、生物素、叶酸、维生素B12
等)
7．维生素原：某些物质本身不是维生素，但是可以在生物体内转化成维生素，这些物质就称为维生素原。如：胡萝卜素是维生素A源；7—脱氢胆固醇是维生素D源。
8．内源因子：胃幽门粘膜分泌的一种糖蛋白，维生素B12只有与它结合才可能透过肠壁被吸收，且不被肠细菌破坏。缺乏内源因子可导致维生素B12缺乏。
（二）填空
1．小分子有机 食物 维生素D3 维生素PP 胆固醇 色aa 2．视黄醇 视黄醛 视黄酸 3．加氧酶 视黄醛 维生素A原
4．类固醇 7—脱氢胆固醇 l，25—(OH)2—D3 活性 5. 氧 氧化 抗氧化
6．凝血因子Ⅱ、Ⅻ、Ⅸ、X γ—羧基谷氨酸 γ—羧化酶 辅助因子 7. 硫胺素 TPP a-酮酸氧化脱羧 转酮醇酶 8．供能 丙酮酸 乳酸 多发性神经炎 9．核醇 7、8二甲基异咯嗪 核黄素 10．FMN FAD
11. 尼可酸 尼可酰胺 吡啶 色aa 12．NAD+ NADP+ 加氢 脱氢
13. 磷酸吡哆醛 磷酸吡哆胺 转氨酶 脱羧酶 14，谷氨酸脱羧酶 谷aa γ-氨基丁酸 15. 巯基乙胺 辅酶A 酰基转移 16. C02 羧化 羧化
17．FH4 一碳单位转移酶 一碳单位
18. 内因子 甲钴胺素 5′—脱氧腺苷钴胺素 19．甲基转移酶 蛋aa 巨幼红细胞性贫血
20．羟化 胶原蛋白 抗氧化剂
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（三）选择题
1．B 2．A 3．C 4．C 5．D 6．A 7．D 8．C 9．B 10 .B 11．C 12．D 13. B 14. D 15. A 16. A （四）是非题
1. 错。 2. 错。3. 对。4．错。5．对。 6．对。7. 错。8．错。9．对。10. 错。11．错。12．对。13．对。 （五）问答题
1．水溶性维生素种类较多，包括B族和维生素C。主要存在于植物性食物。易溶于水、可直接吸收，由于很少在体内储存，必须由膳食供给，一般不易引起中毒。发挥生理功能有共同特点，在体内主要构成辅酶或辅基而参与物质代谢。脂溶性维生素溶于脂肪、乙醇、氯仿等有机溶剂中。多数采自动物性食物。在胆汁酸的协助下被吸收，可在肝脏等组织储存。易引起中毒，此类维生素各自发挥不同的生理作用。
2. 所谓夜盲症是指暗适应能力下降，在暗处视物不清。该症状产生是由于视紫红质再生障碍所致。因视杆细胞中有视紫红质，由1l—顺视黄醛与视蛋白分子中赖氨酸侧链结合而成。当视紫红质感光时，ll—顺视黄醛异构为全反型视黄醛而与视蛋白分离而失色，从而引发神经冲动，传到大脑产生视觉。此时在暗处看不清物体。全反型视黄醛在视网膜内可直接异构化为ll—顺视黄醛，但生成量少，故其大部分被眼内视黄醛还原酶还原为视黄醇，经血液运输至肝脏，在异构酶催化下转变成11—顺视黄醇，而后再回视网膜氧化成ll—顺视黄醛合成视紫红质。从而构成视紫红质循环。当维生素A缺乏时，血液中供给的视黄醇量不足，11-顺视黄醛得不到足够的补充，视紫红质的合成量减少，对弱光的敏感度降低，因而暗适应能力下降造成夜盲症。
3. 佝偻病是由于维生素D缺乏或代谢障碍所导致的儿童因骨质钙化不良，造成骨骼形成的障碍性疾病。因维生素D具有促进肠道和肾小管对钙磷的吸收和促进骨细胞的转化，有利于骨盐的沉积和骨骼钙化作用。维生素D生化作用的发挥依赖于肝、肾功能的正常，它首先在肝25—羟化酶催化下生成25-(OH)-D3，经血液运送至肾，在肾1—羟化酶催化下生成l，25—(OH)2—D3是维生素D3的活性形式，才能发挥生理功能。当维生素D缺乏或肝肾功能不健全时，同样会造成钙磷代谢紊乱，骨骼形成障碍，而引起佝偻病。
4. 维生素K是合成凝血酶原(凝血因子Ⅱ)不可缺少的物质。同时也能调节凝血因子Ⅶ、Ⅸ、X在肝内合成。在肝内合成这些凝血因子的前体并不直接参与凝血，由无活性型向有活性型转变，需要前体的10个谷氨酸残基(Glu)经羧化变为γ—
++
羧谷氨酸(Gla)，Gla具有很强的螯合Ca的能力，因而使其转变成活性型。才具有凝血作用，催化这一反应的酶是γ—羧化酶，维生素K是该酶的辅酶。当维生素K缺乏时血中凝血因子活性降低，凝血时间延长，严重时发生皮下、肌肉和胃肠出血。 5．脚气病是维生素B1缺乏所致的神经系统、心脏及其它组织器官功能障碍性疾病。因维生素B1的活性形式焦磷酸酯(TPP)是体内α—酮酸氧化脱羧酶的辅酶，直接参于α—酮酸的氧化过程。同时维生素Bl在神经传导中也起一定作用。当维生素Bl缺乏时糖代谢必然受到影响，造成神经系统供能不足，加之α—酮酸氧化脱羧障碍，造成丙酮酸、乳酸和α—酮戊二酸等物质堆积，导致末梢神经炎或其它神经病变及心脏代谢功能的紊乱。所以维生素B1缺乏会引起脚气病。
6．维生素B6包括吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺。在体内与磷酸结合成磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺，二者之间可互变，均为活性型。它们即是转氨酶的辅酶，也是氨基酸脱羧酶的辅酶及半胱氨酸脱硫酶的辅酶。磷酸吡哆醛还是δ—氨基γ—酮戊酸合成酶的辅酶，促血红素的合成。因维生素B6能促进谷氨酸脱羧，增进γ—氨基丁酸的生成。γ—氨基丁酸是一种抑制性神经递质，临床上常用于治疗小儿惊厥和妊娠呕吐。因异烟肼与磷酸吡哆醛结合使其失去辅酶的作用，故在服用异烟肼时，应补充维生素B6。
7．(1)维生素C参与体内多种羟化反应 ①促进胶原蛋白的合成。当胶原蛋白合成时，多肽链中的脯aa、赖aa需羟化生成羟脯aa和羟赖aa，而维生素C是胶原脯氨酸羟化酶和胶原赖氨酸羟化酶的辅助因子之一。②参与胆固醇的转化。维生素C是7—β—羟化酶的辅酶，促胆固醇转变成胆汁酸。③参与芳香族氨基酸代谢。苯丙氨酸羟化为酪氨酸的反应，酪氨酸转变为对羟苯丙酮的羟化、脱羧、移位等步骤以及转变为尿黑酸的反应，均需维生素C参加。还能参加酪氨酸转变为5一羟色胺的反应。
(2)维生素C作为供氢体参与体内的氧化还原反应。①保护巯基酶的活性及GSH的状态，发挥解毒作用。②能使红细胞高铁血红蛋白还原为血红蛋白，使其恢复运氧的功能。 ③能使三价铁还原成二价铁，促铁的吸收。④能保护维生素A、E及B免遭氧化，并能促叶酸转变成四氢叶酸。
8．巨幼红细胞性贫血的特点是骨髓呈巨幼红细胞增生。该病的产生与叶酸和维生素B12的缺乏有密切关系。单纯因叶酸或维生素B12缺乏所造成的贫血也称“营养不良性贫血”其机制是合成核苷酸的原料一碳单位缺乏，DNA合成受阻，骨髓幼红细胞DNA合成减少，细胞分裂速度降低，体积增大，而且数目减少。一碳单位来自于某些氨基酸的特殊代谢途径。FH4是一碳单位转移酶的辅酶，分子内N5N10两个氮原子能携带一碳单位参与体内多种物资的合成。又是携带和转移一碳单位的载体。一碳单位都是以甲基FH：的形式运输和储存，所以甲基FH4的缺乏直接影响了一碳单位的生成和利用。FH4的再生可以在甲基转移酶的催化下将甲基转移给同型半胱氨酸生成蛋氨酸，而甲基FH4则生成FH4以促进一碳单位代谢。甲基转移酶的辅酶是维生素B12，所以维生素B12可通过促进FH4的再生而参与一碳单位代谢。当维生素B12缺乏时同样也会影响核酸代谢，影响红细胞的分类及成熟，所以叶酸和B12缺乏都会导致巨幼红细胞性贫血。
9．(1)与动物生殖功能有关。可能因维生素E能抑制孕酮的氧化，从而增强孕酮的作用，或者通过促进性激素而产生作用。
(2)抗氧化作用。维生素E是天然的抗氧化剂。能捕捉机体代谢产生的分子氧和自由基，能避免脂质过氧化物的产生，保护生物膜的结构和功能。
(3)促进血红素合成。维生素E能提高血红素合成过程中的关键酶δ—氨基γ—酮戊二酸(ALA)合成酶和ALA 脱水酶
的活性，促进血红素的合成。
10. 因为抗结核特异烟肼的结构与维生素PP十分相似，二者有拮抗作用，异烟肼又能与维一素B6结合使之活，所以长期服用异肼的患者应同时补充维生互PP和维生素B6
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