76、蛋白质工程中直接操作的对象是 （ D ）
A、氨基酸的结构 B、蛋白质空间结构 C、肽链结构 D、基因结构
77、当前医学上，蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂，则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是 （ C）
A、都与天然产物完全相同 B、都与天然产物不相同
C、基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同 D、基因工程药物与天然产物不相同，蛋白质工程药物与天然产物完全相同 78、关于蛋白质工程的说法错误的是 （ B ）
A、蛋白质工程能定向改造蛋白质的分子结构，使之更加符合人类的需要 B、蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子结构 C、蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
D、蛋白质工程又称为第二代基因工程
79、干扰素经过改造可长期储存，从蛋白质水平上应改变的是 （ D ）
A. 光氨酸 B. 精氨酸 C. 谷氨酸 D. 半光氨酸 80、天然蛋白质合成遵循的法则是（ A ）
A. 中心法则 B. 转录 C. 翻译 D. 复制
三、判断题
1、 基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。（×） 2、 B型双螺旋DNA的稳定因素为氢键和碱基堆砌力。（√） 3、 cDNA文库不包含内含子。（√）
4、 Western杂交是DNA—RNA之间的杂交。（×） 5、 DNA双酶切时，要先低盐缓冲液，后高盐缓冲液。（√）
6、如果需要得到真核生物基因的完整序列，必须用基因组文库方能达到。（√） 7、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。（×） 8、克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。（√） 9、假基因不能合成功能蛋白质，是相应的正常基因突变引起的。（√） 10、Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。（√）
11、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，碱基数相同的情况下，其含量越高，则Tm越高。（√）
12、 农杆菌介导法和基因枪法是植物转化的主要方法（√） 13、（√）有一些来源不同的限制性内切酶识别的是同样的核苷酸序列，这类酶称为同裂酶。 14、检测外源基因的导入时，PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。（×）
15、转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。（×） 16、转基因生物直接食用的，称为“转基因食品”，而作为加工原料生产的食品，则不能被称为“转基因食品”。 （×）
17、质粒DNA进行电泳时，其三种构型中，开环DNA跑的最快，共价闭环形DNA跑得最慢。（×）
18、在生物技术的五大工程中，生化工程是核心技术，它能带动其他技术的发展。（×） 19、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DNA。（×） 20、DNA的复制是全保留不连续复制。（×）
21、基因是一个功能单位，但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位。（√） 22、Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。（×） 23、生物技术是一门新兴的学科。（×）
24、生物技术是现实生产力，也是具有巨大经济效益的潜在生产力，它将是21世纪高技术
革命的核心内容。（√）
25、生物技术是由多学科综合而成的一门新学科。（√）
26、自1996年11月我国正式公布实施《农业生物基因工程安全管理实施办法》以来，我国
已批准6种转基因植物商品化。（√）
27、1977年，美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物——人生长激素释放
抑制剂激素。（√）
28、生物技术是一门新兴学科，它包括当代生物技术和现代生物技术两部分.（√） 29、生物技术主要包括五项技术（工程）。（√）
30、现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。（√）
31、本世纪初，遗传学的建立及其应用，产生了遗传育种学，并于60年代取得了辉煌的成
就，被誉为“第一次绿色革命”。（ √） 32、人类基因组计划英文简称为 HGP.（√）
33、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体（×）
34、进入细菌的外来DNA之所以被降解，是因为细菌只修饰自身DNA，不修饰外来DNA（×）
35、只有粘粒端才可以被连接起来（×）
36、用自身作引物合成的cDNA链，往往cDNA并不完整（×） 37、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的双链DNA
分子由一条旧链和一条新链组成。（√） 38、任何细胞都可用作受体细胞。（×） 39、克隆子就是重组子。（×）
40、原核生物细胞是最理想的受体细胞。（√） 41、目的基因来源于各种生物，其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。（√） 42、E.coli DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。（√） 43、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。 （ ╳） 44、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。 （√ ） 45、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。 （√） 46、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。 （√）
47、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。 （╳） 48、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。 （√）
49、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。 （√）
50、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。 （╳） 51、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。 （╳） 52、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。 （╳） 53、外源蛋白基因可以与噬菌体的外膜结构蛋白基因形成融合蛋白基因，在噬菌体表面展示 （╳）
54、重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA转入受体细胞 (√)
55、通过DNA重拍技术进行酶基因的体外随机突变，可以获得大量的正突变基因。（╳ ） 56、基因家族重排技术需要经过不加引物的多次PCC循环，使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变。 (√)
57、酶在水溶液中催化的立体选择性通常比在有机介质中催化的立体选择性强。（√） 58、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。 （√）
59、固定化原生质体由于细胞内的结构完整，可以保持细胞原有的生命活动能力。（╳ ） 60、采用共价结合法制备得到的固定化细胞具有很好的稳定性。 （√）
四、填空题
1、 基因工程技术是生物技术的核心技术。 2、 PCR包括三个步骤_变性，退火，延伸。
3、基因工程的实施包括四个必要条件：工具酶、基因、载体和受体细胞。 4、限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端：平末端、黏性末端。 5、基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA 文库中则不含内含子
6、生物技术主要是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。 7、现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。
8、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。
9、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。
10、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、 筛选和鉴定克隆子。
11、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。
12、重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的Ti质粒载体转化法、电穿孔法、微弹轰击法、花粉管通道法。导入动物细胞常用的方法有病毒颗粒介导的病毒载体转导法、磷酸钙转染法、显微注射法等。
13、酶的生产方法有提取法，发酵法和化学合成法。
14、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的活力、减少抗原性，增加稳定性。 15、根据分子中起催化作用的主要组分的不同，酶可以分为 蛋白酶 和 核酶 两大类。 16、莫诺德常数Ks是指生长速率达到最大比生长速率一半时的限制性基质浓度 。
17、发酵动力学是研究发酵过程中细胞生长速率，产物生成速率 ，基质消耗速率及其影响因素的学科。
18、微生物产酶方式可以分为同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型四种。 19、动物细胞培养方法主要有悬浮培养，贴壁培养、固定化细胞培养。 20、定点突变是在DNA序列的 某一特定位点上，进行碱基的改变，从而获得 突变基因 的操作技术。
21、锤头型核酸类酶含有11 个保守核苷酸残基和 3 个螺旋结构域。
22、通过人工方法获得的具有催化RNA水解的单链DNA分子，称为 脱氧核酸类酶。 23、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。
24、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计
等技术。
25、蛋白质工程的目标是根据对蛋白质 功能 的特定需求，对蛋白质 结构 进行分子设计，根据 中心 法则便可以改造天然蛋白质。 26、指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育 完整 植株的潜在能力。 27、愈伤组织是在离体培养过程中形成的具有 分生能力 的一团 不规则 细胞，多在外植体切面上产生。
28、酶定向进化是在体外进行酶基因的 人工随机突变，然后在人工控制条件的特殊环境下进行 定向选择 ，而得到具有优良催化特性的酶的突变体。
29、在体外受精和体外早期胚胎发育的基础上，通过卵子切割、性别控制、嵌合体制作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造新遗传性状的技术统称为胚胎工程，又称发育工程。
五、简答题
1、基因工程操作过程的主要步骤有哪些？
①分离或合成基因；②通过体外重组将基因插入载体；③将重组DNA导入细胞； ④扩增克隆的基因；⑤筛选重组体克隆；⑥对克隆的基因进行鉴定或测序； ⑦控制外源基因的表达；⑧得到基因产物或转基因动物、转基因植物 2、一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么？ （1）具有转录复制起始点。（2）具有抗菌素抗性基因（筛选标志）。 （3）具有若干限制酶切单一识别位点。（4）具有较小的分子量和较高的拷贝数。 3、重组子筛选所用的核酸分析法的内容是什么？
1）核酸杂交法 ①菌落印迹原位杂交；②斑点印迹杂交；③Southern印迹杂交 2）聚合酶链式反应法 3）DNA测序法 4、基因工程研究的理论依据是什么？ （1）不同基因具有相同的物质基础。（2）基因是可切割的（3）基因是可以转移的 （4）多肽与基因之间存在对应关系（5）遗传密码是通用的 （6）基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代 5、分离目的基因的途径有哪些？
（1）酶切法（2）PCR法（3）化学合成法（4）基因组或cDNA文库法 6、谈谈你对转基因食品的看法。
转基因食品的优点：（1）可延长蔬菜的货架期及感官特性。（2）提高食品的品质。 （3）提高食品的营养。（4）提高肉、奶和畜类产品的数量和质量。 （5）增加农作物抗逆能力，增加农业产量。（6）生产可食性疫苗或药物 （7）生物功能性食品 转基因食品的安全性
（1）目前有一些证据指出转基因食品具有潜在的危险。 （2）但更多科学家的试验表明转基因食品是安全的 任何一种转基因食品在上市之前都进行了大量的科学试验，国家和政府有相关的法律法规进行约束，而科学家们也都抱有很严谨的治学态度。一种食品会不会造成中毒主要是看它在人体内有没有受体和能不能被代谢掉，转化的基因是经过筛选的、作用明确的，所以转基因成分不会在人体内积累，也就不会有害。然而，不排除别有用心的人/公司/国家利用非人道目的的转基因技术，生产基因武器，危害人类安全。因此，我们也应该保持警惕，尤其应该加强进口食品的监测和监管。
7、目的基因克隆的基本方法有哪些？ （1）直接从染色体DNA中分离：
仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离，较少采用。 （2）人工合成：
根据已知多肽链的氨基酸顺序，利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适应于编码小分子多肽的基因。 （3）从mRNA合成cDNA：
采用一定的方法钓取特定基因的mRNA，再通过逆转录酶催化合成其互补DNA（cDNA），除去RNA链后，再用DNA聚合酶合成其互补DNA链，从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。 （4）利用PCR合成：
如已知目的基因两端的序列，则可采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术，在体外合成目的基因。