透射电镜生物样品制备步骤 一.取 材
组织块小于1立方毫米 二.固 定
2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次 1%锇酸固定液固定 2-3小时
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次 三.脱 水
50%乙醇 15-20分 70%乙醇 15-20分 90%乙醇 15-20分
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20分 90%丙酮 15-20分 以上在4度冰箱内进行
100%丙酮 室温 15-20分三次 四.包 埋
纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4小时 纯丙酮+包埋液(1:2)室温 过夜 纯包埋液 37度 2-3小时 五.固 化
37度烘箱内 过夜 45度烘箱内 12小时 60度烘箱内 24小时
六.超薄切片机切片 50-60 nm 七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色 八.透射电镜观察。拍片 透射电镜生物样品制备步骤 一.取 材
组织块小于1立方毫米 二.固 定
2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次 1%锇酸固定液固定 2-3小时
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次 三.脱 水
50%乙醇 15-20分 70%乙醇 15-20分 90%乙醇 15-20分
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20分 90%丙酮 15-20分 以上在4度冰箱内进行
100%丙酮 室温 15-20分三次 四.包 埋
纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4小时 纯丙酮+包埋液(1:2)室温 过夜 纯包埋液 37度 2-3小时 五.固 化
37度烘箱内 过夜 45度烘箱内 12小时 60度烘箱内 24小时
六.超薄切片机切片 50-60 nm 七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色 八.透射电镜观察。拍片