28．人工种子：又称合成种子，指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。 五、简答题 18627388972 1. 植物组织培养有哪些特点?

答：植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。特点：①培养条件可人为控制 ②植物生长周期短，繁殖系数高 ③管理方便，不受季节环境条件影响，有利于工厂化生产和自动化控制。 2. 培养基一般包括哪些基本成分?其作用是什么?如何配制?

答：培养基的构成要素通常可分为：水分、无机盐类、有机营养成分、植物生长调节物质、天然物质、Ph、凝固剂等。水分是一切生物生命活动的物质基础，是很多生物化学反应的原料和代谢产物。无机盐类是构成植物细胞中核酸、蛋白质以及生物膜系统等必不可少的营养元素。有机营养成分为植物生命活动提供必不可少的碳源、氮源、能源等物质。植物生长调节剂可以促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织，还可以诱导不定芽、不定胚的形成。天然有机添加剂通常富含有机营养成分或生理活性物质。pH过高时，培养基会变硬；pH过低时，则影响培养基的凝固。凝固剂是在配制固体培养基时使用，使培养基凝固。其他添加物是有时为了减少外植体的褐变，需要向培养基中加入一些防止褐化的物质。 3. 简述愈伤组织细胞分化。 4. 原生质体融合有哪几种主要方法?

答：植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力 1.自发融合 2.诱发融合：a，NaNO?处理 b，高PH值—高浓度钙离子处理 c，聚乙二醇（PEG）处理 d，电融合 3.化学融合

5. 组织培养中，pH值起什么作用?如果pH值过高或过低会有什么后果? 6. 植物组织培养技术主要包括哪些环节?各环节的主要工作内容是什么?

9

答：（1）培养基配置技术：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌。

（2）培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择、外植体的选择和处理。 （3）无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌。

（4）培养技术：主要是培养条件的控制，包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件。 7. 培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?

答：1）培养基一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解，则可采用过滤灭菌。（2）培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。（3）植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：A）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。B）用70%的酒精浸润材料30s 左右。C）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。D）植物材料用无菌水冲洗3--5 次，以除去灭菌剂。

8. 由胚乳培养获得的植株，是否一定要进行染色体倍数的检查?为什么? 9. 花药培养产生的植株染色体倍性如何?其产生的原因是什么?

10.为什么对脱毒处理后产生的植株必须进行病毒鉴定?为什么已通过病毒(特定病毒)鉴定的无病毒苗还须重复鉴定? 11.使用植物生长物质应注意些什么?

12.为什么幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂? 13. 胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用? 14. 试比较花药培养与花粉培养的异同。 15. 简述酶法分离原生质体的步骤.

答：叶片表面消毒→去除表皮，将叶片切成小块→叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→摇床保温培养→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基

10

16. 影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素有哪些? 17．简述人工种子生产步骤？

答：选取目标植物 →从适合的外植体上诱导愈伤组织→将愈伤组织转移到液体培养基→愈伤组织在液体培养基中增生扩大 →愈伤组织转移至无激素培养基 →产生体细胞胚 →包裹人工种皮→炼苗→温室（大棚）播种 →获得目标植物

18． 愈伤组织的形态发生有哪两种情况?并比较各自由此形成完整植株的不同。 1、答：愈伤组织的形态发生可通过两种途径实现，一种是根芽器官直接分化形成植株，即器官发生途径；另一种是产生具胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株，即体细胞胚胎发生途径。在器官发生途径中，芽或芽原基起源于培养组织中比较表层的细胞，即外起源，而根原基则发生于组织较深处，呈现单向极性，所形成植株的维管组织与外植体的维管组织联在一起。而在胚状体发生途径中，绝大多数体细胞胚起源于单细胞，形成的胚状体有双极性，维管组织与外植体没有联系。 19． 简述幼胚和成熟胚的区别。

20． 无病毒原种(母株)的保存及繁殖中最关键的问题是什么?怎样解决? 21． NAA的中文名称是什么？有何作用和特点？

答：NAA的中文名称叫萘乙酸，是一种人工合成的生长素。其在植物体内有促使茎和节间伸长、向性运动、顶端优势、器官脱落和生根的作用。在组织培养中NAA被用于诱导细胞的分裂和根的分化，并能与细胞分裂素互作促进茎芽的增殖。 六、论述题

1. 请你设计一个组培实验室，说明你设计组培实验室各分室的作用及其所需主要仪器设备。

2. 请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程。 是由病毒所至。请你设计一个病毒的鉴定和脱毒的技术方案。 4. 请阐述原生质体的分离、纯化和活力鉴定的技术过程。

5.请分别列出七种仪器设备和七种玻璃器皿的名称，并说明它们的作用。

6.请阐述用大蒜脱毒和快繁的程序。为什么试管苗在经过热处理和茎尖培养等方法脱毒后，还需要进行病毒的鉴定

7.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程。

11

3. 某地区的一种马铃薯经多年的种植后，植株变的矮小，产量和品质都下降，怀疑

8. 请论述香石竹的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程。 9. 现在需要你配制3升胡萝卜肉质根愈伤组织诱导培养基，其配方为MS＋2.4-D2mg/L＋KT0.2mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.7%，请你阐述培养基的配制和分装直到灭菌的全部技术过程。

12