⑶大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为

。 Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

⑷据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。

A．50℃ B．60℃ C．70℃ D．80℃

Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率，经过筛选，可获得能表达热稳定性高的BglB酶的基因。

⑸与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获取热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选）

A．仅针对bglB基因进行诱变 B．bglB基因产生了定向突变

C．bglB基因可快速积累突变 D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 【答案】

⑴嗜热土壤芽胞杆菌 ⑵Ndel BamHⅠ ⑶转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶

⑷失活 B ⑸A、C

【考点定位】基因工程、酶、育种等知识。

【名师点睛】本题意在考查同学们获取信息、利用信息及所学知识进行分析、判断的能力及识图能力。

42.(2014·北京卷.30)（16分）A基因位于1号染色体上，影响减数分裂时染色体交换频率，a基因无此功能；B基因位于5号染色体上，使来自同一个花粉母细胞的4个花粉粒分离，b基因无此功能。用植株甲(AaBB)和植株乙（AAbb）作为亲本进行杂交实验，在F2中获得所需植株丙（aabbb）。

（1）花粉母细胞减数分裂时，联会形成的________经________染色体分离、姐妹染色单体分开，最终复制后的遗传物质被平均分配到4个花粉粒细胞中。

（2）a基因是通过T-DNA插入到A基因中获得的，用PCR 法确定T-DNA插入位置时，应从图1中选择的引物组合是__________。

（3）就上述两对等位基因而言，F1中有______中基因型的植株。F2中表现型为花粉粒不分离的植株所占比例应为_________________。

（4）杂交前，乙的1号染色体上整合了荧光蛋白基因C、R。两代后，丙获得C、R基因(图2)。带有C、R基因花粉粒能分别呈现蓝色、红色荧光。

①丙获得C、R基因是由于它 的亲代中的____________在减数分裂形成配子时发生了染色体交换。

②丙的花粉母细胞进行减数分裂时，若染色体在C和R基因位点间只发生一次交换，则产生的4个花粉粒呈现出的颜色分别是

_____________________________________________。

③本实验选用b基因纯合突变体是因为：利用花粉粒不分离的性状，便于判断染色体在在C和R基因位点间____________，进而计算出交换频率。通过比较丙和_______的交换频率，可确定A基因的功能。

【答案】（1）四分体 同源 （2）II 和III （3）2 1/4 （4）①父本和母本 ②蓝色、红色、蓝和红叠加色、无色 ③交换与否和交换次数 乙

【考点定位】减数分裂和基因工程相关知识。

【名师点睛】本题意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力。

43.(2014·上海卷.67-71)（九）回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。（9分） pIJ702是一种常用质粒（图20），其中tsr为刘链丝菌素（一种抗生素）抗性基因；mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaI、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在PIJ702上分别只有一处识别序列。

67.质粒DNA分子中的两条链靠______键维系成双链结构。

68 以SacI和SphI切取的目的基因置换PIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacI/SphI片段，构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表4中。因此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点，并说明判断依据________。

69.已知PIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb，若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8，则参照表数据可断定酶切产物中最小片段的长度为______kb。

70. 不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表5所示。若要筛选接纳了PIJ702或pZHZ8 的链霉菌细胞，所需的硫链丝菌素最小浓度应为______μg/mL (填写表格中给定浓度)；含有重组粒pZHZ8的菌落呈_____色。

71. 上述目的基因来源于原核生物，其蛋白编码序列（即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列）经测定为1265对碱基，试判断对这段序列的测定是否存在错误：_______,并说明依据_______.

【答案】 67.氢

68.含有，据表4和题意，pIJ702上原有的一个BglⅡ位点被目的基因置换后，pZHZ8仍被BglⅡ切为线状，故目的基因中必然含有一个BglⅡ位点。