B.取血回来后,马上进行高速长时间离心 C.将离心后的血细胞加入清水缓慢搅拌 D.重复洗涤直到上清液呈红色为止
解析:取血后,应进行低速短时间离心;向离心后的血细胞液中加入蒸馏水并缓慢搅拌,使红细胞破裂;红细胞重复洗涤直到上清液没有黄色为止。 答案:A
3.下列关于血红蛋白分子组成的叙述,正确的是( ) A.由两个α-肽链和两个β-肽链组成,有一个亚铁血红素基团 B.由一个α-肽链和三个β-肽链组成,有四个亚铁血红素基团 C.由两个α-肽链和两个β-肽链组成,有四个亚铁血红素基团 D.由两个α-肽链和两个β-肽链组成,有两个亚铁血红素基团
解析:血红蛋白分子由四条链组成,包括两条α-肽链和两条β-肽链。其中每条肽链环绕一个亚铁血红素基团,共有四个亚铁血红素基团。 答案:C
4.凝胶色谱法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是( ) A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径
B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度 C.将酶或细胞固定在细胞中
D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速率
解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法,是通过改变蛋白质分子通过凝胶时的路径来实现的。 答案:A
5.在血红蛋白分离过程中,如果红色带区歪曲、散乱、变宽,其主要原因在于( ) A.样品的处理
B.凝胶色谱柱的装填 C.洗脱过程
D.凝胶色谱柱的制作
解析:在血红蛋白分离过程中,如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明凝胶色谱柱的装填不紧密,需重新装填。 答案:B
6.下列各项中,一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质的分离度的是( ) A.层析柱的高度 B.层析柱的直径 C.缓冲溶液 D.样品的分布 答案:B
7.下列生物大分子的分离方法所对应的原理,错误的是 ( ) A.DNA的粗提取——DNA与杂质的溶解性不同 B.凝胶色谱法分离蛋白质——蛋白质分子大小的差异
C.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离蛋白质——蛋白质所带电荷的差异 D.用丙酮提取叶绿体中的色素——色素与其他成分的溶解性差异
解析:DNA的粗提取主要利用了DNA与杂质在NaCl溶液和酒精溶液中的溶解性不同,A项正确;凝胶色谱法分离蛋白质主要利用了蛋白质分子大小的差异,B项正确;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离蛋白质的原理是用SDS所带的电荷掩盖蛋白质分子所带电荷的差异,使不同大小的蛋白质分子得以分离,C项错误;用丙酮提取叶绿体中的色素利用的原理是色素与其他成分在有机溶剂中的溶解性差异,D项正确。 答案:C
8.右图是凝胶色谱柱,据图回答下面的问题。
(1)a、b均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是 ,原因
是 。 (2)自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由 替代。
(3)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 (填“相同”或“不同”)。洗脱时,对洗脱液的流速要求是 。
解析:用凝胶色谱法分离各种大分子物质时,相对分子质量较大的物质先洗脱出来,然后是相对分子质量较小的物质。相对分子质量较大的物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,只能分布于颗粒之间,所以向下移动的速度较快。相对分子质量较小的物质可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶内,在向下移动的过程中,从一个凝胶颗粒内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,相对分子质量较小的物质的下移速度落后于相对分子质量较大的物质,从而落后于相对分子质量较大的物质洗脱出来。
答案:(1)a a的相对分子质量较大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快 (2)尼龙网和尼龙纱 (3)相同 保持稳定
9.动物血液常常被选作提取DNA和提取血红蛋白的实验材料,请回答下列有关问题。 (1)提取DNA和提取血红蛋白,羊血都是适宜材料吗? 。原因是 。
(2)无论是提取DNA还是提取血红蛋白,都需要先用 对红细胞进行洗涤,其目的是 。
(3)电泳是分离鉴定蛋白质的常规方法。右上图为几种蛋白质通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱,据图,你认为相对分子质量最大的蛋白质是 ,依此推理该样品在凝胶色谱法中最后洗脱的蛋白质应该是 。
解析:(1)羊血是提取血红蛋白的适宜材料,不是提取DNA的适宜材料,因为羊成熟的红细胞没有细胞核,提取DNA可用鸡血。
(2)提取DNA和血红蛋白,需要先用生理盐水对红细胞进行洗涤,其目的是去除血浆蛋白(杂蛋白)。 (3)题图为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱,γ球蛋白离点样处最近,说明相对分子质量最大,清蛋白离点样处最远,说明相对分子质量最小。在凝胶色谱法中相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶颗粒内部的通道,路程长,移动速度慢;而相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶颗粒内部,路程较短,移动速度快,所以最后洗脱的蛋白质应该是相对分子质量最小的清蛋白。
答案:(1)羊血是提取血红蛋白的适宜材料,不是提取DNA的适宜材料 羊成熟的红细胞没有细胞核 (2)生理盐水 去除血浆蛋白(杂蛋白) (3)γ球蛋白 清蛋白