用吸量管分别吸取10μg?mL-1的铁标准溶液0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL于6只50mL容量瓶中，依次各加入1mL盐酸羟胺、5mL NaAc缓冲溶液、2mL邻二氮菲溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置10min，用1cm比色皿，以不加铁的试剂空白溶液为参比溶液，在实验步骤1所得到的最大吸收波长下，分别测量各溶液的吸光度。 3．试样中微量铁的测定
准确称取试样0.4~0.5g(如铁含量较高，则适当减少称样量)于小烧杯中，加少量蒸馏水润湿，盖上表面皿，小心滴加3mol?L-1 HCl溶液至试样溶解，转移试样至50mL容量瓶中，用少量蒸馏水淋洗烧杯，一并转移至容量瓶中。然后依次加入1mL盐酸羟胺、5mL NaAc缓冲溶液、2mL邻二氮菲溶液，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min．以试剂空白溶液作参比溶波，用1cm比色皿，在实验步骤1所得到的最大吸收波长下，测量吸光度。
六、数据及处理
1．将测量结果填入下表
(1) 吸收曲线
波长λ/nm 吸光度A 450 460 470 480 490 500 502 504 506 508 510 512 514 516 518 520 530 540 550 (2)标准曲线
V铁标 /mL 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 V 铁样 m 铁/mg 吸光度A (3) 试样编号＿＿＿，试样的称量记录， 2．绘图及计算
(1) 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制Fe-Phen吸收曲线，并求出最大吸收峰的波长λmax。一般选用λmax作为分光光度法的测量波长。
(2) 以显色后的50mL溶液中的含铁量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线。
(3) 根据试样的吸光度，计算试样中铁的含量（mg?L-1）。
思 考 题
1．邻二氮菲分光光度法测铁的原理是什么?用该法测出的铁含量是否为试祥
中亚铁的含量？
2．吸收曲线与标准曲线各有何实用意义？
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3．测绘Fe2+-phen吸收曲线时，在510nm附近，测量间隔为什么要密一些？ 3．本实验所用的参比溶液为什么选用试剂空白，而不用蒸馏水？
4．试拟出以邻二氮菲分光光度法分别测定试样中微量Fe2+、Fe3+离子含量的分析方法。
实验七 利用紫外吸收光谱检查物质的纯度
一、目的要求
1. 学习利用紫外吸收光谱检查物质纯度的原理和方法， 2. 熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、基本原理
由于物质的紫外吸收光谱是物质分子中生色团和助色团的贡献，也是物质整个分子的特征表现。例如具有π电子的共扼双键化合物、芳香烃化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其摩尔吸光系数ε可达104~105数量级，这与饱和烃化合物有明显的不同。利用这一特性，可以很方便地检查纯饱和烃化合物中是否含有共轭双键、芳香烃等化合物杂质。如果乙醇中含有微量苯，会在波长230～270nm处出现苯吸收带，而纯乙醇在该波长范围内不出现苯的吸收带。因此可利用物质的紫外吸收光谱的不同，检查物质的纯度。
紫外吸收光谱可以定量分析、推断有机化合物的分子结构和检查物质纯度。
曲线2.苯在乙醇中的紫外光谱 (曲线2)在甲醇中的紫外吸收光谱
图1 曲线1.纯乙醇紫外光谱 图2 蒽醌(曲线1)和邻苯二甲酸酐
从图1的曲线1和曲线2可以看出由于乙醇中含有微量苯，故在波长230～
270nm处出现B吸收带而纯乙醇在该波长范围内不出现苯的B吸收带。因此可利用物质的紫外吸收光谱的不同，检查物质的纯度。如图2所示的蒽醌和邻苯二甲
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酸酐的紫外吸收光谱，由于在蒽醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此，蒽醌的吸收带红移比邻苯二甲酸酐大，且吸收带形状及其最大吸收波长各不相同，由此得到鉴定。
三、仪器
752、752C、UV-2000、UV7504、2800UV/VIS、或其他型紫外可见分光光度计
四、试剂
1．苯、无水乙醇 分析纯
2．苯的正庚烷溶液和苯的乙醇溶液 取二只50mL容量瓶各注入10μL苯，然后分别用正庚烷和乙醇稀释至刻度，摇匀。
五、实验条件
1. 波长范围 220~280nm 2. 石英比色皿 1cm
六、实验步骤
1．根据实验条件，将各仪器按操作步骤进行调节，若仪器状态正常，即可
测定各实验的紫外吸收光谱，如果测得紫外吸收光谱的吸收峰为平头蜂或太小，可适当改变试液浓度。
2．使用分光光度计测定时，因仪器无自动波长扫描及记录装置；因此应先测定各试液在不同波长下的吸光度，然后绘制吸光度对波长的曲线，即得紫外吸收光谱。测定时要求先间隔10nm测量一次吸光度，在峰值吸收附近。间隔逐步改为5nm、2nm、lnm、0.5nm等，以便较准确测绘紫外吸收光谱。
七、数据及处理 1．记录实验条件
2．通过紫外吸收光谱的对比，说明检查纯度的可行性。
思 考 题
1. 如何利用紫外吸收光谱进行物质的纯度检查？ 2. 在紫外光谱区饱和烷烃为什么没有吸收蜂？ 3. 为什么紫外吸收光谱可用于物质的纯度检查？
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实验八 原子吸收分光光度法测定自来水中钙、镁的含量 ——标准曲线法
一、目的要求
1. 学习原子吸收分光光度法的基本原理；
2. 了解原子吸收分光光度计的基本结构及其使用方法， 3. 掌握应用标准曲线法测定自来水中钙、镁的含量。
二、基本原理
标准曲线法是原子吸收分光光度分析中一种常用的定量方法．常用于未知试液中共存的基体成分较为简单的情况．如果溶液中共存基体成分比较复杂．则应在标准溶液中加入相同类型和浓度的基体成分，以消除或减少基体效应带来的干扰，必要时须采用标准加入法而不用标准曲线法。标准曲线法的标准曲线有时会发生弯曲现象。造成标准曲线弯曲原因有：
(1) 当标准溶液浓度超过标准曲线的线性范围时，待测元素基态原子相互之间或与其它元素基态原子之间的碰撞几率增大，使吸收线半宽度变大，中心波长偏移，吸收选择性变差，致使标准曲线向浓度座标轴弯曲 (向下)。
(2) 因火焰中共存大量其它易电离的元素，由这些元素原子的电离所产生的大量电子，将抑制待测元素基态原子的电离效应，使测得的吸光度增大．使标 准曲线向吸光度座标轴方向弯曲 (向上)。
(3) 空心阴极灯中存在杂质成分．产生的辐射不能被待测元素基态原子所吸收，以及杂散光存在等因素，形成背景辐射，在检测器上同时被检测，使标准曲线向浓度座标轴方向弯曲(向下)。
(4) 由于操作条件选择不当，如灯电流过大，将引起吸光度降低，也使标准曲线向浓度座标轴方向弯曲。
总之，要获得线性好的标准曲线，必须选择适当的实验条件，并严格实行。
三、仪器
1．原子吸收分光光度计 3200型(上海分析仪器厂)或其它型号 2. 钙、镁空心阴极灯
3．无油空气压缩机或空气钢瓶 4. 乙炔钢瓶 5．通风设备 6. 容量瓶、移液管
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