育

中细胞命运和胚胎范型的决定在早期途径可以通过不同时空的特异表 达决定神经管中来自腹部区域的细胞发育为运动神经元而来自背区的细胞则发

育为感觉神经元在后期该通路可以通过与其他一些信号因子的协同作用如 等对神经系统细胞的精细分化进行调节在与神经系统的疾

病联系方面在未成熟的个体途径配体的突变将会导致一种叫做前脑 无裂畸形的发育缺陷性疾病对面部和神经系统的中线产生影响在成熟的个 体途径的过度激活是多种神经系统肿瘤发生及恶性生物学行为维持的重要 原因其中包括神经胶质瘤蛋白家族是通路下游具有锌指结构

域的转录因子也是途径在受到外界信号刺激后做出对一系列靶基因进行 调节这一反应功能的最终执行者该蛋白家族中既有激活因子也包括抑制因 子而是通路下游末端重要的转录激活因子其表达水平的高低

是通路激活程度的标志基因由在年发现由于其在脑胶第二军医大学博士学位论文

质瘤中较正常对照组织扩增高出大约倍而得名通路在神经胶质瘤

的发生发展中起重要作用参与调节胶质瘤细胞的生长胶质瘤肿瘤干细胞的自

我更新的维持并与其成瘤能力关系密切

水通道蛋白是分布在生物膜表面能够对水分子进行 高效特异的跨膜转运的一类通道蛋白家族最初在年由等人

对红细胞膜分离纯化多肽时发现随后的研究证明了其特异转运水分子的

功能并将其命名为的发现更新了人们长期以来的水跨生物

膜的移动仪靠单纯扩散的观念使人们一些生理病理的过程及机制有了更加合

理和深刻的认识迄今为止已经在哺乳动物体内发现了种水通道蛋白 在中枢神经系统中主要分布的是在下常生理条件下

在人主要表达于脑脉络膜上皮微绒毛的顶膜与酶共同定位于该组 织在脑脊液产生过程中具有重要作用并参与调节水和离子平衡在发育过程 中从妊娠个月胎儿的脑组织中丌始检测出随后其表达部位和量随月 龄增大而相应变化可能与胎儿脑内水平衡的调节有关在脑的发育中起重要作

用在正常脑组织中的表达水平很低在神经胶质瘤中主要表

达于微血管内皮细胞和瘤性星形细胞在转移瘤的微血管内皮细胞和反应性星形

细胞中表达

主要在神经胶质瘤的进展过程中发挥作用由于胶质瘤细

胞的生长环境是在结构致密空问局限的中枢神经系统所以其向周围组织的浸润

性生长主要依靠其通过变形运动插入到神经元周围的空隙中来实现引表达 水平高的胶质瘤细胞在体内外实验中表现出更强的侵袭转移特性因为此 类细胞具有更强的变形运动能力更有利于向周围组织扩散性增殖此外 还与脑胶质瘤旁的肿瘤周围组织水肿的发生发展有着密切的关系尽管 在脑脊液分泌大脑内水平衡的调节以及胶质瘤的发展中起着重要作用并且

人们对于其自身的通道结构已经有了清楚的了解但是对于其表达的调节机制仍

不清楚尤其是其与主要信号转导通路之间的关系目自订仍然研究的很少在人胶质瘤中对水通道蛋白调控作用的研究

信号通路与在中枢神经系统的发育及正常功能的维持中都

起着重要的作用在中枢神经系统胶质细胞瘤的发生发展中两者也都各自体现出

重要的影响但是对两者之间关系的研究目前尚未见报道本课题从神经胶质瘤

组织标本入手首先分析了两者之问的表达的相关性发现了与在

胶质细胞瘤中伴随性高表达这一现象然后通过分子生物学实验对通路通过 其下游转录因子对进行调控的可能性及机制进行研究最后对这种

调控作用对胶质瘤细胞生物学功能的影响进行了初步探讨第二军医大学博士学位论文

材料和方法 一 材料

主要化学和生物试剂

普通试剂琼脂糖琼旨 公司十二烷基肌酸钠 公司蛋白胨及酵母提取物公司冰乙酸上海试剂一厂 甲醇上海试剂一厂无水乙醇上海试剂一厂碱 公司各种限制性内切酶酶 连接酶公司 公司滤纸公司公司硝酸

纤维素膜膜公司等特殊试剂及试剂盒 公司 检测系统公司产物纯化试剂盒胶回收试剂盒为上

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