A×Cx =C× Ax

C=（9Cx+100×1）÷（9+1）=（9Cx+100）/10 0.435×Cx =0.130×（9Cx+100）/10 Cx=4.08mg/L 2．A=Kc

A×Cx =C× Ax

C=（5Cx+0.100×5）÷（5+5）=（Cx+0.100）/2 0.417×Cx =（Cx+0.100）/2×0.295 Cx=0.0547mol/L

C= Cx×20=1.095 mol/L

3．外推法。作校准曲线，外推至与横坐标相交于Cx=0.068mg/L 第六章 荧光分析法

一、填空题

1. 荧光分析法和紫外可见分光光度法相比较，前者测定的是 光的强度，后者测定的是 光的强度。（发射、吸收）

2. 激发态分子将能量转变为热能而回到基态，这一无辐射失能过程称为 。（无辐射跃迁）

3. 荧光分析中，溶剂分子吸收光能后，跃迁到 能级，在极短时间内返回到原来的振动能级而发射出和 相同波长的光，这种光称瑞利散射光。（较高、激发光）

4. 受溶液pH影响的荧光物质一般是 或 物质。（酸性、碱性）

5. 荧光定量分析公式为F=KΦI02.3abC，应用此公式的限制条件是 。（A≤0.05）

6. 测定荧光的仪器需有两个 ，第一个放在光源和液槽之间，其作用

是 ；第二个放在液槽和检测器之间，以滤去 ，让 通过。（单色器；得到合适的单色激发光；反射光、散射光以及杂质产生的荧光；待测物荧光）

7. 荧光分光光度计的主要部件有 、 、 、 。（激发光源、样品池、单色器、检测器）

8. 常遇到的荧光熄灭剂有 、 、 、 等。（卤素离子、重金属离子、氧分子、硝基化合物）

9. 荧光分析法中 光谱是选择激发波长的依据，而 光谱是选择荧光光谱的依据。（激发、荧光） 10. 荧光分析中，其它实验条件不变，当温度升高时，该荧光物质发射出的荧光强度 。（降低） 二、选择题

1. 对分子荧光强度的测量时，要在与入射光成直角的方向上检测是由于

A. 荧光是向各个方向发射的 B. 只有在和入射光方向成直角的方向上才有荧光 C. 为了消除透射光的影响 D. 克服散射光的影响 2. 荧光法中，荧光效率F的计算式是

A. F=发射荧光的电子数/吸收激发光的电子数 B. F=发射荧光的光量子数/吸收荧光的光量子数 C. F=发射光的强度/吸收光的强度

D. F=发射荧光的光量子数/吸收激发光的光量子数

3. 处于第一电子单线激发态最低振动能级的分子以辐射光量子的形式回到单线基态的最低振动能级，这种发光现象称为

A. 分子荧光 B. 分子磷光 C. 化学发光 D. 拉曼散射 4. 荧光光度计中第一滤光片的作用是

A. 消除杂质荧光 B. 得到合适的单色激发光 C. 消除激发光产生的反射光 D. 消除瑞利散射，拉曼散射 5. 荧光物质的荧光光谱和它的吸收光谱的形状是

A. 相同 B. 相同且重叠 C. 对称 D. 相似且成镜像 6. 比较荧光物质激发光谱的波长和其发射光谱的波长

A. 相同 B. 不同 C. 前者稍长 D. 前者稍短 7. 荧光物质的分子一般都含有

A. 离子键 B. 共轭双键 C. 氢键 D. 金属键 8. 下列哪种光的峰位与激发光波长无关

A. 瑞利散射光 B. 拉曼光 C. 仪器表面的散射光 D. 荧光 9. 激发光波长固定后，荧光波长与荧光强度的关系曲线称为 A. 吸收光谱 B. 激发光谱 C. 荧光光谱 D. 分子光谱 10. 荧光波长固定后，激发光波长与荧光强度的关系曲线称为 A. 荧光光谱 B. 激发光谱 C. 发射光谱 D. 吸收光谱

1.C 2. D 3. A 4.B 5.D 6.D 7.B 8.D 9.C 10.B 三、名词解释

1. 荧光效率F 2. 荧光 3. 荧光光谱

4. 荧光的熄灭

1．F=发射荧光的光量子数/吸收激发光的光量子数。

2．分子跃迁到较高能级后，很快以无辐射跃迁的形式下降到第一电子激发态的最低振动能级，然后以光子的形式放出所吸收的能量，由第一电子激发态的最低振动能级回到基态的各个振动能级，这种光称为荧光。

3．固定激发光波长和强度，连续改变荧光物质发射光的波长并测定不同发射光波长下的荧光强度，以荧光的波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标，便得到荧光光谱。

4．荧光分子与溶剂分子或溶质分子的相互作用引起荧光强度降低或荧光强度与浓度不呈线性关系现象，叫作荧光熄灭。 四、简答题

1. 简述影响荧光效率的因素。

影响荧光效率的因素包括荧光物质本身的分子结构及外部影响因素。（1）分子具有共轭双键、刚性平面结构有利于产生荧光，取代基效应影响荧光效率；（2）影响荧光强度的外部因素有温度、溶剂、溶液pH值、散射光、荧光熄灭。

2. 荧光定量分析为什么要在很稀的溶液中测定？

（1）荧光定量分析公式为F=KΦI02.3abC，此公式成立的前提条件是A≤0.05，要求是很稀的溶液；（2）浓度高时，会产生荧光熄灭。

3. 与紫外可见分光光度法相比，荧光分光光度法具有较高的灵敏度，为什么？

增大光源强度，可提高荧光测定的灵敏度，而不能提高紫外可见分光光度法的灵敏度；荧光

分光光度法直接测定发射荧光的强度，荧光强度大，信号强，而紫外可见分光光度法测定吸收光前后的强度变化，信号弱。 五、计算题

1. 用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量时，取本品10片（每片含炔雌醇31.5～38.5mg），研细溶于无水乙醇中，稀释至100ml，过滤，取滤液5.0ml稀释至10.0ml，在307nm处测定荧光读数。如炔雌醇对照片的乙醇溶液（1.50mg/ml）在同样测定条件下荧光读数为55.0，则合格片的荧光读数应在什么范围之间？

2. 取5.00ml含氨基乙酸的溶液置于一个500ml容量瓶中，并以蒸馏水稀释至刻度，用移液管取5.00ml稀释于一个10ml容量瓶中，并以pH8.7的硼酸盐缓冲液稀释至刻度，当它与1.00ml由25mg荧胺溶于100ml丙酮所配成的溶液反应后，测量这溶液的荧光。（荧胺与氨基乙酸反应可生成一荧光产物）。从工作曲线上读得最后溶液中含1.14mg/L的氨基乙酸，计算在最初的5ml溶液中氨基乙酸的浓度。 第七章 电位分析法 一、填空题

1. 盐桥的作用是 。（消除液接电位）

2. 离子选择电极的选择性用 表示，其数值越小，说明干扰离子对被测离子的干扰越 。(选择性系数、小)

3. 氟离子选择电极的敏感膜是用 制成；内参比电极为 。（LaF3单晶、Ag-AgCl电极） 4. 参比电极是指在温度、压力一定的条件下，其电极电位 ，且不随待测溶液的 改变而改变。（已知） 5. 在电位分析法中，常用的参比电极是 和 。（甘汞电极、Ag-AgCl电极）

6. 影响离子选择电极检测下限最主要的因素是 。（电活性物质在溶液中的溶解度）

7. 液接电位是由离子的 不同而引起的，消除液接电位最常用的方法是使用 。（扩散速度、盐桥） 8. 用电位法测定氟离子时，需要向溶液中加入 ，可缩写为 。（总离子强度调节缓冲液、TISAB） 9. 把化学能转变成电能的装置称为 。（原电池） 10. 电极电位与溶液中待测离子活度呈Nernst响应的电极称为 。（指示电极） 二、选择题

1. 离子选择电极的选择性主要由

A. 电活性物质在溶液中的溶解度所决定 B. 敏感膜的活性材料性质所决定 C. 试液中被测离子性质所决定 D. 试液中共存离子性质所决定 2. 影响离子选择电极检测下限的因素最主要的是 A. 内参比电极 B. 溶液pH C. 内参比液 D. 敏感膜性质 3. 定量分析中，有效地排除基体干扰适宜方法是

A. 标准曲线法 B. 直接比较法 C. 紧密内插法 D. 标准加入法

4. 玻璃电极在使用前要在水中，目的在于

A. 清洗电极 B. 活化电极 C. 校正电极 D. 检查电极 5. 用pH计测量溶液pH值时，事先要对仪器进行校正需采用

A. 离子强度小的溶液 B. 有关的任意的pH值缓冲溶液 C. 与待测物pH相近的缓冲溶液 D. 任意的pH值溶液 6. 离子选择电极法测定氟离子时，加TISAB的主要目的是

A. 消除液体接界电位 B. 减少不对称电位 C. 提高灵敏度 D. 固定离子强度

7. 在电位法中，消除液体接界电位的方法是

A. 在两溶液间架盐桥 B. 搅动溶液 C. 将两溶液用半透膜隔开 D. 加离子强度调节剂 8. 离子选择性电极的电极电位

A. 正比于待测离子的活度 B. 随参比电极的不同而不同 C. 与待测离子活度的对数呈线性关系 D. 恒定已知 9. 电位分析中，以下哪一个属于指示电极 A. Ag—AgCl电极 B. 甘汞电极 C. pH玻璃电极 D. 以上均不是 10. 电位分析中，以下哪一个属于参比电极 A. Ag—AgCl电极 B. 氨电极 C. 饱和甘汞电极 D. F－选择电极

1.B 2.D 3.D 4.D 5.C 6.D 7.A 8.C 9.A 10.C 三、名词解释 1. 电位分析法 2. 电极斜率

3. 电极响应时间

4. 电化学生物传感器 5. 电极电位

1．电位分析法：是研究电极电位与被测物质活度和浓度之间变化关系的一种定量方法， 2．电极斜率：在线性范围内，当待测离子活度变化一个数量级（或10倍）时，所引起的电极电位变化值。

3．电极浸入试液后达到稳定电位（±1mV以内）所需的时间。

4．以电化学电极或离子敏场效应晶体管作为信号转换器的生物传感器称为电化学生物传感器。

5． 电极和电解质之间的电位差称为电极电位。 四、简答题

1. 用离子选择性电极法测定氟离子时，加TISAB的目的是什么？ 2. 液体接界电位是怎样产生的？如何消除？ 3. 反映离子选择电极性能的几个主要指标是什么？ 4. 离子选择电极的主要构成是什么？

1．（1）维持样品和标准溶液恒定的离子强度；（2）保持试液在离子选择电极适合的pH范围内，避免HOH-的干扰；（3）消除干扰离子的影响。

2．液体接界电位是由于离子的扩散速度不同引起的。最常用的方法是加盐桥，使用盐桥后，液接电位可以忽略不计。 3．（1）选择性（2）线性范围和检测下限（3）电极斜率（4）响应时间（5）膜电阻 4．离子选择性电极主要有三部分构成：（1）能对待定离子呈Nernst响应的敏感膜；（2）内参比溶液，含有一定浓度的膜敏感离子及使内参比电极电位稳定的离子；（3）内参比电极。 五、计算题