降低了亲水性，导致脱水凝聚。 25. 膜分离技术的类型和定义？

答：膜分离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程，近似于筛分过程，依据滤膜孔径大小而达到物质分离的目的，故而可以按分离粒子大小进行分类：

（1）微滤：以多孔细小薄膜为过滤介质，压力为推动力，使不溶性物质得以分离的操作，孔径分布范围在0.025~14μm之间；

（2）超滤：分离介质同上，但孔径更小，为0.001~0.02 μm，分离推动力仍为压力差，适合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质；

（3）反渗透：是一种以压力差为推动力，从溶液中分离出溶剂的膜分离操作，孔径范围在0.0001~0.001 μm之间；（由于分离的溶剂分子往往很小，不能忽略渗透压的作用，故而成为反渗透）；

（4）纳滤：以压力差为推动力，从溶液中分离300~1000小分子量的膜分离过程，孔径分布在平均2nm；

（5）电渗析：以电位差为推动力，利用离子交换膜的选择透过性，从溶液中脱除或富集电解质的膜分离操作； 26. 影响液一固分离的因素？ （一）微生物种类的影响

一般真菌的菌丝比较粗大，液一固分离容易，含真菌菌体及絮凝蛋白质的发酵液，可采用鼓式真空过滤或板框过滤。对于酵母菌体，离心分离的方法具有较好的效果。但是细菌或细胞碎片相当细小，液一固分离十分困难，用一般的离心分离或过滤方法效果很差，因此应先用预处理的各种手段来增大粒子，才能获得澄清的滤液。 （二）发酵液的黏度

液一固分离的速度通常与黏度成反比。影响发酵液黏度的因素很多： （1）菌体种类和浓度不同，其黏度有很大差别。

（2）不同的培养基组分和用量也会影响黏度，如用黄豆饼粉、花生饼粉作氮源，用淀粉作碳源会使黏度增大。发酵液中未用完的培养基较多或发酵后期用油作消沫剂也会使过滤困难。

27. 影响有机溶剂萃取分离的因素？

影响液一液萃取的因素主要有目的物在两相的分配比（分配系数K）和有机溶剂的用量等。分配系数K值增大，提取效率也增大，萃取就易于进行完全。当K值较小时，可以适当增加

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有机溶剂用量来提高萃取率，但有机溶剂用量增加会增加后处理的工作量，因此在实际工作中，常常采取分次加入溶剂，连续多次提取来提高萃取率。 28. 盐析的原理及影响因素？ 1、亲水性大于蛋白质破坏水化层 2、带电离子中和蛋白质表面电荷 影响因素： （1）盐离子浓度 （2）生物分子种类 （3）生物分子浓度 （4） pH值 （五）温度

29. 影响有机溶剂沉析的因素？ （1）温度

（2）生物样品的浓度 （3）pH （4）离子强度 （5）金属离子

30. 等电点沉析注意事项？ （1）等电点的改变 （2）目的物的稳定性 （3） 盐溶作用 （4）pH的调节

31. 微孔膜过滤技术的应用？ （一）在生物化学中的应用 1、绝对过滤收集沉淀 （1）溶液的澄清 （2）酶活力测定 2、结合测定

（1）蛋白质-DNA络合物的测定及纯化受体的测定 （2）mRNA的测定及纯化

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（3）环状DNA的纯化 3、其它应用 （1）蛋白质含量测定 （2）核酸的测定 （3）放射性标记物的超净 （二）在制药工业中的应用 1．药液中微粒及细菌的滤除 2．抗生素的无菌检验

32. 何时应用静态离子交换分离法？

一般只是在试探性实验、测定交换平衡常数、某些交换动力学的研究、交换分配系数的测定、络合物离解常数的测定、滴定曲线的研究、某些催化反应的试探性研究、除去盐溶液中过剩的酸和碱、吸附溶液中所含的高分子量物质等方面可能用到。此外还用于不适合用柱进行操作的离子交换分离，如溶液粘度太大、含有悬浮固体及在反应时放出气体会造成沟流或堵塞管柱；或者是含有碳酸盐、亚硫酸盐、硫化物的溶液与氢型阳离子柱交换时；以及某些交换速度较慢、交换要求在一步完成的等条件下，还是可以采用的。 33. 交换容量及其影响因素？

交换容量是指离子交换剂能提供交换离子的量，它反映离子交换剂与溶液中离子进行交换的能力。通常所说的离子交换剂的交换容量是指离子交换剂所能提供交换离子的总量，又称为总交换容量，它只和离子交换剂本身的性质有关。

影响交换容量的因素很多，主要可以分为两个方面，一方面是离子交换剂颗粒大小、颗粒内孔隙大小以及所分离的样品组分的大小等影响。另一些影响因素如实验中的离子强度、pH值等主要影响样品中组分和离子交换剂的带电性质。 35. 疏水柱层析分离原理？

亲水性蛋白质（酶）表面均含有一定量的疏水性基团。尽管在水溶液中蛋白质（酶）具有将疏水性基团折叠在分子内部而表面显露极性和荷电基团的趋势，但总会有一些疏水性基团或极性基团的疏水部位暴露在蛋白质（酶）表面。这部分疏水基团可与亲水性固定相表面偶联的短链烷基、苯基等弱疏水基会发生疏水性相互作用，被固定相（疏水性吸附剂）所吸附。

36. 气相色谱的条件选择？ 1、固定相的选择

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2、载气流速的选择 3、柱温的选择

4、进样量与进样时间的影响 5、色谱柱形、柱内径及柱长的选择 37. 影响电泳分离的主要因素？

1、大分子的性质2、电场强度3、溶液的pH 4、溶液的离子强度 5、 电渗6、温度7、支持物的影响 38. 提高晶体质量的方法有哪些？ （1）晶体大小的控制 （2）晶体形状的控制 （3）晶体纯度的控制 （4）晶体结块的控制 39. 生物分离的基本原理？

主要是依据离心力、分子大小（筛分）、浓度差、压力差、电荷效应、吸附作用、静电作用、亲和作用、疏水作用、溶解度、平衡分离等原理对原料或产物进行分离、纯化。不同的分离对象需要采用不同的分离方法才能有效地被分离。 40. 生物分离技术的特点？ 1、产物的快速分离纯化。 2、对原料液进行高度浓缩。 3、借助新型的分离技术 4、除去有害人类健康的物质

5、采用利于保持目标产物产品质量的操作条件 41.简述中药有效成分常用的提取、分离方法。

提取方法：溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界流体萃取法。

分离方法：溶剂法包括酸碱溶剂法、溶剂分配法，沉淀法包括专属试剂沉淀法、分级沉淀法、盐析法、结晶法、分馏法、膜分离法、升华法、色谱法。 42. 沉析溶剂选择主要应考虑以下因素。

（1）、是否与水互溶，在水中是否有很大的溶解度；（2）、介电常数小，沉析作用强。 （3）、对生物分子的变性作用小。（4）、毒性小，挥发性适中。 43. 试列举常见的吸附剂。

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