例如： 溶液浓度（mol?L） 0.5 0.4 0.3

-1材料在溶液中浸泡的时间 2：00

2：02 2：03

观察时间 2：25 2：27 2：28

观察结果 显著质壁分离 在角隅上分离（30%左右）

没有质壁分离

-1

那么与细胞液等渗的浓度大致就在0.3~0.4 mol?L之间。

7.1.4在找到上述浓度时，用新的溶液和新鲜撕取的外表皮重复进行一次，直到有把握为止。并按下列公式计算在常压下该组织细胞液的渗透势。

ψπ=－RTiC（MPa） ψπ表示渗透势，单位（MPa）；

R表示气体常数：0.08314L? MPa?（mol?K）-1； T表示绝对温度，K即273℃±t（实验时温度）；

i表示等渗系数，蔗糖等于1； C表示等渗溶液的克分子浓度（mol?kg-1）。

7.1.5观察项目及结果分析：

将结果记录在下表中，并计算出细胞的渗透势。 蔗糖克分子浓度（mol?L-1） 渗透势（MPa） 质壁分离情况 0.6

0.5 0.4 0.3 0.2 0.1

7.1.6实验时应注意的问题：

7.1.6.1配制蔗糖溶液一定要准确，盖上塞子摇匀。

7.1.6.2实验材料一定要完全浸入蔗糖溶液，在浸泡过程中应适当摇动。

二、植物组织水势的测定——小液流法

4.2仪器设备

大试管；小试管；硅胶塞；青霉素小瓶；毛细移液管（尖端弯曲）；移液管（5ml、10ml）；钻孔器；镊子；木版；试管架。

5.2试剂

5.2.1叶子（女贞、何首乌、油菜、菠菜或其他植物叶片）和马铃薯块根； 5.2.2 1 mol?L-1蔗糖溶液、亚甲基蓝。

6.2操作流程图：

配制浓度递减的蔗糖溶液→取材浸泡→着色观察→记录→分析计算结果 7.2实验步骤：

细胞的渗透势

4

7.2.1首先在大试管中配制一系列浓度递减的蔗糖溶液（0.2、0.3、0.35、0.4、0.5、0.6 mol?L）各10ml（和质壁分离实验共用）。取上述溶液3ml注入小青霉素瓶，各管都塞好塞子，并编号（此为第一组试管），摇匀。然后再取上述溶液各吸出3ml放入指形管中。

7.2.2用钻孔器从已清除表面灰尘的块根或叶子上钻取（或剪成）大小相同的小块，每一小瓶中放数片圆片（需量相等，约5片左右），塞好塞子，放置20min，在这段时间内摇数次，务必使叶片浸入溶液中。

7.2.3到时间后依次取出叶圆片，弃之，再向每一小瓶中各加少许甲烯蓝，溶解后，把已着色的溶液装入毛细管（方法是用拇、中指持毛细管，插入有色溶液中，待溶液柱已达3~4mm时，用食指紧按住毛细管的上端，慢慢取出毛细管）。将毛细管壁上黏附的溶液用干净滤纸擦去。然后将毛细管浸入指形管相应的溶液中，使毛细管的尖端位于溶液的中部，然后自毛细管中心缓慢地放出少量蓝色溶液，并观察放出的小液流移动的方向，按此法从低浓度到高浓度一种一种的做。

7.2.4如果小液流向上移动，说明溶液从细胞液中吸取水分而被冲淡，比重比原来低，如果小液流向下移动，则说明实验溶液的浓度未起变化，即植物组织的水势等于溶液的渗透势。

记录小液流不动的那个试管的蔗糖溶液浓度。

初步得出水势所在范围后，为了精确地求出材料水势，可配制浓度差更小的一系列溶液，按上述方法再做第二次（或更多次）。（本实验不进行） 7.2.5观察项目及分析结果：

按ψ=－P（MPa） （P=iCTR）计算水势。 7.2.6实验时注意的问题：

7.2.6.1配置溶液浓度要准确、盖上塞子并摇匀；

7.2.6.2取材时要注意取材方向、部位、老嫩程度要尽量一致； 7.2.6.3叶园片在小青霉素瓶内放置的时间最好不要超过25min； 7.2.6.4甲烯兰不可多放，否则会影响溶液比重； 7.2.6.5实验时温度要尽可能恒定；

7.2.6.6如果正确而熟练的掌握方法，小液流法可精确地测出0.002 mol?L-1蔗糖溶液的浓度差，即相当于0.04个大气压。

附录：一、冰点下降法测定植物细胞的渗透势（示范）

4.3仪器设备

4.3.1冰点下降测量计及贝克曼温度计； 4.3.2研钵或压榨器、烧杯、剪刀、小刀。 5.3试剂

5.3.1洋葱或其他植物的组织； 5.3.2冰、食盐。

6.3操作流程图：

调整温度计→加入混合剂→上样→密闭冰点下降测量计→测量记录→分析计算结果 7.3实验步骤：

7.3.1按贝克曼温度计的使用手册调整温度计，并测量纯水的冰点t1（重复2~3次，取其平均值）。

7.3.2将冰盐混合剂（冰：盐=3 : 1）倒入绝热容器内。

7.3.3将用压榨器压榨植物组织所得汁液5ml注入样品管中插入调整好的贝克曼温度计，并严格封闭。

7.3.4将上述工作完成后，插上插头，打开开关，使搅拌器不断搅动，温度开始下降，注意

5

-1

水银柱下降到最低点（由于过冷现象）的温度t2。至液体接冰时，水银柱又慢慢回升，升至最高处（管内液体全部结冰）的温度t3。重复2~3次，分别求出t2、t3的平均值。

7.3.5一般把 t3 - t1 作为冰点降低值Δt ，但测得的冰点降低值与过冷温度t2有关。已知每过冷1 ℃所测得的冰点降低值Δt比真正的数值Δt'大1/80，因此精确测定时应：

令 t2 - t1=δ

t3 - t1=Δt 则Δt'=Δt - δ/80

7.3.6结果分析：

ψπ=（22.4/1.86）*Δt'=12.04*（Δt - δ/80） 个大气压。 7.3.7实验时应注意的问题：

7.3.7.1要严格按照使用手册调整好贝克曼温度计。 7.3.7.2要严格密闭冰点下降测量计。

附录：二、植物组织水势的测定——压力室法（示范）

4.4仪器设备

压力室水势测定装置、刀片、纱布或塑料袋、滤纸、瓷盘。 5.4试剂

带叶片的小枝或具木质叶柄的叶片。 6.4操作流程图：

取样→装样→加压测定→排气

7.4实验步骤：

7.4.1取样：先从待测植株上切取带叶片的小枝或具木质叶柄的叶片，迅速用湿纱布包裹或装入塑料袋中以防止水分遗失，然后进行装测。

7.4.2装样：将样品迅速插入橡皮室孔隙中，使切口露出密封垫圈几毫米，固定后放入钢筒中，旋紧螺旋环套。为避免样品失水，可预先用湿滤纸条帖于钢筒内壁。

7.4.3加压测定：将压力控制阀转向“加压”位，打开主控阀，以每秒0.5巴左右的速度加压，接近叶水势时，加压要慢些，以免加压过量。当切口出现第一滴水珠时，马上关闭主控阀，读出加压值（叶水势值）。可按下式换算成需要的单位：

1巴（bar）=0.987大气压=0.1兆帕（MPa）。

7.4.4排气：将压力控制阀转向“排气”位，放气，压力表指针退回至零，扭动螺旋套环，取出叶片，进行第二个样品测定。一般重复四次，取平均值。 7.4.5实验时注意的问题：

7.4.5.1加压所用气体为氮气，如用含CO2太多的气体，对细胞有伤害。 7.4.5.2钢瓶的搬运和使用要遵守钢瓶使用规定。

7.4.5.3要注意控制加压速度，否则回影响钢筒中的温度，并进而影响测定精度。 7.4.5.4用做压力室的钢筒一般为不锈钢，其厚度为5.0~10mm，依所需加压力确定。

附录：三、植物组织水势的测定——折射仪法（示范）

4.5仪器设备

折射仪、恒温水浴、分析天平、具塞试管、试管架、打孔器（Ф0.5cm）、移液管、擦镜纸、滤纸、试剂瓶、烧杯。 5.5试剂

5.5.1叶片或其他组织部分； 5.5.21 mol?L-1蔗糖溶液。

6

6.5操作流程图：

配制浓度递减的蔗糖溶液→对照溶液测定→取材浸泡→样品溶液测定→分析计算结果 7.5实验步骤：

-1-1

7.5.1用1 mol?L蔗糖溶液配制0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mol?L的蔗糖溶液各10ml。各溶液分别装入具塞子试管中，按浓度梯度递减的次序排成一行，并在试管壁上注明浓度的标签。各浓度溶液分别吸取2ml分装在2组具塞子试管中，试管壁上同样标记好浓度标签，或将试管放在恒温水浴锅中，或在室温下自然平衡。

7.5.2用折射仪依次测定一组具塞子试管中糖液的折射率，做好记录。 7.5.3将被测叶片洗净吸干外附水分，避开大脉打取叶圆片（Ф0.5cm），在另一组具塞子试管中，每管加入7~10片叶圆片（视叶片含水量而定）完全浸入溶液中，盖上塞子摇匀。30min后依次取出叶圆片，再用折射仪测定各管中液体的折射率。

7.5.4以两次测定时折光率未变的蔗糖浓度或相邻两管（折光率一个升高一个降低）浓度的平均值为等渗浓度，按照公式计算：

ψπ=－RTiC（MPa） ψπ表示渗透势，单位（MPa）；

R表示气体常数：0.08314L? MPa?（mol?K）-1； T表示绝对温度，K即273℃±t（实验时温度）；

i表示等渗系数，蔗糖等于1； C表示等渗溶液的克分子浓度（mol?kg）。

7.5.5实验时注意的问题：

7.5.5.1配置溶液浓度要准确、盖上塞子并摇匀；

7.5.5.2取材时要注意取材方向、部位、老嫩程度要尽量一致； 7.5.5.3叶园片在试管中放置的时间最好不要超过30min； 7.5.5.4注意折射仪的校准和仪器保管。

附录：四、植物组织水势的测定——热电偶湿度计法（示范）

4.6仪器设备

热电偶湿度计测定装置；恒温水浴锅；低温冰箱；1ml注射器（每种糖液专用）；试管；剪刀；纱布；白瓷盘； 5.6试剂：

5.6.1植物叶片；

5.6.2按照下表配制不同水势的蔗糖系列标准溶液： 蔗糖液水势（MPa） 100ml水加入蔗糖克数 糖液浓度（mol?L）

6.6操作流程图：

测校正值→上样→加标准糖液→读数→渗透势测定→作直线坐标图→计算压力势 7.6实验步骤：

7

-1

-1

0.4 5.50 0.161

0.6 8.21 0.240

0.8 11.00 0.322

1.0 13.70 0.401

1.2 16.50 0.483

1.4 19.25 0.563

1.6 22.10 0.646