PCR实验室SOP文件 下载本文

所引用图表:

附表04.干式恒温器使用记录表 附表05.应急处理记录表 附表06.离心机使用记录表 附表09-1.检测后标本保存记录表 附表09-2.待检标本保存记录表 附表10.基因检测结果记录表

附表12.BIO-RAD iCycler荧光定量扩增仪使用记录表 附表17-1.生物安全柜使用记录表 附表17-2.洁净工作台使用记录表

附表21实验室温度、湿度、水浴箱温度记录表 附表22垃圾处理记录表 附图3.冰箱温度记录图 附图2.室内质控图 基因检验报告单格式 编写人 王宇飞 批准人 张惠彬 生效日期 2009-7-1 9

内蒙古第四医院 内务管理制度 检验科 1.目的:使实验室日常内务管理工作顺利进行,工作专人负责。 2.范围:实验室相关人员 3.负责人:王宇飞 4. 制度:

编号:CG-JY-Pro-04 日期:2009年7月1日 版本:2009-1 共4页 本核酸扩增荧光检测实验室配备两名实验员,在以下描述中分别称为第一实验员和第二实验员。实验室每周二安排做HBV-DNA、TB项目检测(定性),周五进行实验室的卫生清洁、离心管、吸头的高压灭菌及仪器的维护保养等工作。

4.1 标本接收区内务管理制度

4.1.1 设立标本接收区的主要目的:接收待检测的标本,认真填写记录,并提供咨询服务。 4.1.2 每天工作开始前,第二实验员进入该区,清洁台面及地面,将台面物品摆放整齐。 4.1.3检测标本核对无误后,填写可接收标本记录表,统计当天待检标本数,告知第一实验员

后,将标本带入标本制备区进行检测(如当天不做,则放入专用冰箱中保存)。 4.1.4每天的登记记录,应书写工整详细,使用本室专用的记录本、纸和笔。

4.1.5每天下班前将本区所有废弃物装入垃圾袋,封口,在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录,

将垃圾送至实验室外特定的实验垃圾区。 4.1.6每天要打开紫外灯消毒30~60分钟。

4.2试剂贮存和准备区内务管理制度

4.2.1第一实验员进入该区在缓冲间穿本区专用白色工作服、一次性鞋套,戴一次性手套,手套

要经常更换。

4.2.2 每天实验开始前,打开排风扇,提前开启洁净工作台紫外灯和风机组工作15-30分钟,

记录实验室温度、湿度,清洁实验室(见实验室清洁制度)。

4.2.3配制10?消毒液2000ml ,分别倒入废液桶(不少于桶的1/5)和清洁盆里待用。将清

洁用品带入实验区后关闭隔离门,更换手套准备配制试剂。

4.2.4取出当天实验需配制和使用的试剂,绘制冷柜温度图,待试剂恢复室温后,按照试剂配

制的标准操作规程准备当天实验所需的试剂,分装后放入专用的试剂管架,其余试剂要立即收好,做好标记放回冷柜内。

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4.2.5本室的所有仪器参见“标准操作规程”并及时记录仪器状态,填写工作流程表。每次实

验记录,应使用本室专用的记录本和笔。

4.2.6 实验中使用的离心管、吸头等应经过灭活无菌处理(应在消毒的有效期内),用后放入废

液桶中。

4.2.7试剂准备完成后,关闭仪器电源,用10?消毒液擦拭实验台和离心机,再用75%酒精擦

拭,并用75%酒精擦拭加样枪、镊子、剪刀等物品,之后还原实验台面,开启洁净工作台紫外灯,将垃圾封口后更换新的垃圾袋并记录。

4.2.8打开隔离门,将配好的试剂、工作流程表、清洁用品、垃圾(封口后)带入缓冲区,开

启实验区紫外灯,关闭隔离门。整理好清洁用品,摘掉鞋套和手套放入生物垃圾袋内,洗手后脱去专用工作服,更换新手套,将实验区带出的垃圾和缓冲区的垃圾一同封口,更换新的垃圾袋。将配好的试剂、工作流程表、垃圾带出该区,开启缓冲区紫外灯(约45分钟),关闭排风扇。(注: PCR其它室的用品不得带入本室)

4.2.9将配好的试剂、工作流程表经缓冲区交给标本制备区内的第二实验员,垃圾放入实验室

外特定的实验垃圾区,由专人交医院统一处理。然后进入扩增区开始工作。

4.3 标本制备区内务管理制度

4.3.1第二实验员进入该区在缓冲区穿本区专用蓝色工作服、一次性鞋套,戴一次性手套,手套需常更换。

4.3.2 每天实验开始前,打开排风扇,提前开启生物安全柜约20分钟后再使用,记录实验室温

度、湿度、水浴箱温度,清洁实验室(见实验室清洁制度)。

4.3.3配制10?消毒液2000ml ,分别倒入废液桶(不少于桶的1/5)和清洁盆里待用。将清

洁用品带入实验区后关闭隔离门,更换手套后准备标本提取。

4.3.4取出当天要检测的标本,并将一周前已测的标本取出丢入废液桶中,填写标本保存记录

表;核对待测标本后,按标准操作规程在生物安全柜中进行标本提取。

4.3.5本室的所有仪器参见“标准操作规程”并及时记录仪器状态,填写工作流程表。每次实

验记录,应使用本室专用的记录本和笔。

4.3.6实验中使用的离心管、吸头等应经过灭活无菌处理(应在消毒的有效期内),用后放入废

液桶中。

4.3.7将带入本区的试剂放入冰箱冷藏室试剂存放专区暂存,待标本提取完成后将处理后

的标本加入分装有试剂的相应PCR反应管中。将当日已测的标本放入冰箱中标本保存专区冷冻保存,处理后的标本放入冰箱冷藏室提取后标本存放专区暂存,实验结束后装入塑料袋内密封后放入生物垃圾袋内。

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4.3.8加样完成后,关闭仪器电源,用10?消毒液擦拭实验台和离心机,再用75%酒精擦拭,

并用75%酒精擦拭加样枪、镊子等物品,之后还原实验台面,开启生物安全柜紫外灯,关闭排风扇,将垃圾封口后更换新的垃圾袋并记录。

4.3.9打开隔离门,将加样后的试剂、工作流程表、检验申请单、清洁用品、垃圾(封口后)

带入缓冲区,开启实验区紫外灯,关闭隔离门。整理好清洁用品,摘掉鞋套和手套放入生物垃圾袋内,洗手后脱去专用工作服,更换新手套,将实验区带出的垃圾和缓冲区的垃圾一同封口,更换新的垃圾袋。 将加样后的试剂、工作流程表、检验申请单、垃圾带出该区,开启缓冲区紫外灯(约45分钟)。

4.3.10将加样后的试剂、工作流程表、检验申请单、经缓冲区交给基因扩增区内的第一实验员,

垃圾放入实验室外特定的实验垃圾区,由专人交医院统一处理。然后进入标本接收区处理当天实验开始后所收到的标本。

4.3.11本区应避免不必要的走动,PCR扩增后的物品不得带入本区。

4.4 扩增区及产物分析区内务管理制度

4.4.1 第一实验员进入该区在缓冲间穿本区专用粉红色工作服、一次性鞋套,实验中须戴一次

性手套,手套常更换。

4.4.2每天实验开始前,打开排风扇,提前打开扩增仪预热30分钟,记录实验室温度、湿度,

清洁实验室(见实验室清洁制度)。

4.4.3配制10?消毒液1000ml ,倒入清洁盆里,将清洁用品放入实验区待用。

4.4.4本室的所有仪器参见“标准操作规程”并及时记录仪器状态,每次实验记录,应使用本

室专用的记录本和笔。

4.4.5将标本制备区带入的反应管(已加样)按照扩增区的标准操作规程上机扩增。 4.4.6专用的试剂管架放入75%的酒精中浸泡12小时以上。将检验申请单上的内容填写到

基因检测结果记录表中。

4.4.7扩增完成,保存检测结果后关闭扩增仪,立刻取出反应管装入塑料袋内密封后放入垃圾

袋内。分析并记录检测结果,关闭计算机,填写工作流程表,绘制质控图,记录仪器使用时间和运行状态。(如发现室内质控品结果有问题时,则这次临床结果作废,并向科主任报告,认真分析原因,作好详细记录)。

4.4.8实验结束后,用10?消毒液擦拭实验台,再用还75%酒精擦拭,还原实验台面,关

闭排风扇,将垃圾封口后更换新的垃圾袋并记录。

4.4.9将检验申请单、清洁用品、垃圾带入缓冲区,开启实验区紫外灯,关闭隔离门。整理好

清洁用品,摘掉鞋套和手套放入生物垃圾袋内,洗手后脱去专用工作服,更换新手套,将

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