5

B.溶解度与离子强度成负线性关系 C.溶解度的对数与离子强度成负线性关系 D.它们之间无必然联系

44.关于蛋白质盐析影响因素中说法正确的是(A、B、C ）

A.不同蛋白质β值相同

B.Ks值随蛋白质相对分子质量增大或分子不对称性的增强而增大 C.温度和pH能影响蛋白质盐析 D.压强增大，盐析难度增大

45.在选择盐析的无机盐中说法正确的是（ A、B ）

A.溶解度大

B.溶解度受温度影响较小 C.盐溶液密度不高

D.硫酸铵为强酸弱碱盐能使PH值降低在高PH值下放出氨气，并且腐蚀性强有毒，所以硫酸铵不是很好的盐析无机盐

46.在用硫酸铵做蛋白质盐析沉淀剂时，从饱和度20%增加的40%，需要加入硫酸铵质量（ ）

A.120.0g B. 121.4g C.125.6g D.128.0g 47.关于盐析沉淀蛋白质的说法中正确的是（ A ） A. 盐析沉淀得到的目标产物含盐量高，一般需要脱盐。 B.盐析沉淀蛋白质只能用于初级纯化，不能用于高度纯化 C.采用等电点沉淀比盐析更加优越

D.盐析沉淀时为使蛋白质沉淀完全，盐浓度尽可能高。 48.下列有关离心沉降速度不正确的是：（ C ）

A．密度差越大，离心沉降速度越快；

B．在密度差存在下，固体颗粒尺寸越大，越容易离心； C．液体粘度越大，越容易离心；

D．在密度差较小、固体颗粒尺寸不大的情况下，可以增加离心力来提高分离效率。 49. 若被过滤液体的固形物含量在1%-10%之间,则应选则何种过滤方式:( B )

A. 真空转鼓过滤 B.板式过滤 C. 助滤剂过滤 D.澄清过滤

三、填空题

1. 在细胞分离中，细胞的密度ρS越 _____，细胞培养液的密度ρL 越______，则细胞沉降速率越大。 2. 过滤中推动力要克服的阻力有 ______阻力和 _______阻力，其中 ______占主导作用。

3. 重力沉降过程中，固体颗粒受到____力，_____力，______力的作用，当固体匀速下降时，三个力的关系

_________________________。

4. 为了提高最终产品的回收率：一是提高_________________，二是减少_______________。 5. 区带离心包括__________区带离心和___________区带离心。

6 6. 单从细胞直径的角度，细胞___________，所需的压力或剪切力越大，细胞越难破碎。 7. 当离子强度较高时，蛋白质溶解度的对数与离子强度之间呈_________关系。

8. 降低蛋白质周围的 和 厚度，可以破坏蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质沉淀。 9. 常用的有机溶剂沉淀剂有 、 。 10. 常用的盐析作用的盐有 、 。 11. pH值接近蛋白质等电点有利于 盐析效果。

12. 盐析常数KS值随蛋白质 或 而增大，盐析沉淀结构不对称的高相对分子质量蛋白质所需的盐

较低，对特定蛋白质影响盐析的主要因素是 ， ， 和 。 13. Cohn方程中，Ks越 ，β值越 ，盐析效果越好。

14. 由于菌体细胞体积很小，沉降速度很慢。因此，实用上需使菌体细胞 后在进行沉降操作。 15. 细胞的非机械破碎方法有 ， ， 。

16. 细胞的机械破碎主要有 、 、 和 等方法。 17. 高压匀浆中影响细胞破碎的因素主要有 、 和

18. 蛋白质的沉淀可采用恒温条件下添加各种不同试剂的方法：__________、__________、__________。 19. 蛋白质沉淀常用的方法有： 、 、 及 20. 工业上常用的离心机有以下两种：______________、________________。

21. cohn经验方程中可知，溶解度与强度之间的关系是：_______________________________

22. 细胞破碎方法主要分为______和______，其中应用最为广泛的是_______、_______、_______、_______和

______。

23. 过滤的透过速度可用公式

表达，式中A为_________，△p为________，Q为________，μ

L_________，Rm为________，Rc为________。 24. 发酵液常用的固液分离方法有 和

25. 分离因数是衡量离心程度的参数，用Z表示，写出其表达式 26. 防止蛋白质沉淀的屏障主要有 和 。

27. 蛋白质溶液的pH在其等电点时，蛋白质的静电荷数

28. 等电点沉淀的操作条件是 和 。由于蛋白质的等电点多在偏 性的范围内，故等

电点沉淀操作中，多通过加 调节PH值

29. 等电点沉淀适用于 较大的蛋白质，所以等电点沉淀不如盐析沉淀应用广泛，但该法仍不失为有效的蛋

白质初级分离手段。

30. 有机溶剂沉淀时，蛋白质的相对分子质量越 ，则有机溶剂用量越 ；在溶液等电点附近，则溶剂用

量越

31. 过滤前的预处理需加入＿＿＿，使用的方法有两种：一是＿＿＿＿＿＿＿＿，二是＿＿＿＿＿＿＿＿。滤液的透过阻力来自两个方面，即＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

32. 革兰氏阳性菌的细胞壁主要由＿＿＿＿＿组成，革兰氏＿性菌的细胞壁比革兰氏＿性菌坚固，较难破碎。 33. 酶溶法分为＿＿＿＿＿和＿＿＿＿。其中＿＿＿＿＿适用于革兰氏＿性菌细胞壁的分解，应用于革兰氏＿性菌时，需辅助＿＿＿＿＿使之更有效地作用于细胞壁。

7

34. 当目标产物存在于细胞膜附近时，可采用较温和的方法，如＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿等；当目标产物存在于细胞之内时，则需采用强烈的＿＿＿＿＿＿＿＿；当目标产物处于与细胞膜或细胞壁结合的状态时，采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

35. 蛋白质的溶解度与离子强度的关系曲线上存在最大值，该最大值在＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿出现，在＿＿＿＿＿此离子强度的范围内，溶解度随离子强度的增大迅速＿＿＿＿

36. 影响蛋白质盐析的主要因素有＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿、＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。最常用的盐析沉淀剂是＿＿＿＿＿

37. 物质的溶解度随温度的升高而＿＿＿＿，但在离子强度较高的溶液中，升高温度有利于某些蛋白质的失水，因此温度升高，蛋白质的溶解度＿＿＿＿＿。

38. 在pH值接近蛋白质等电点的溶液中，蛋白质的溶解度＿＿＿＿，所以调节溶液PH值在＿＿＿＿＿附近有利于提高盐析效果。

39. 诱使杂蛋白变性沉淀的重要手段是＿＿＿＿＿＿＿＿或＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 40. 助滤剂主要有 、 、 、 等 41. 工业最常用的过滤设备有 、 。

42. 根据转速或离心力的不同，离心机可以分为 ， , 。 43. 离心设备从形式上可分为 , ， , 。 44. 常用助滤剂有 ， ， 。

45. 蛋白质是____________，蛋白质表面由不均匀分布的荷电基团形成的_________、__________和_________。 46. 固液分离采用最多的手段是 、 。

47. 微生物发酵液的特点是 , ， , 等。 四、判断题

1. 生物分离中常用的超速离心机转速可达到30000转以上。 （ ） 2. 用盐析法进行沉淀时，离子强度越大，蛋白质的溶解度越大。 （ ） 3. 影响蛋白质溶解度的因素有很多，当温度升高时蛋白质的溶解度减小。 （ ） 4. 絮凝可以形成细小的絮凝体。 （ ） 5. 高压匀浆法的影响因素是增大压力和增加破碎次数。 （ ） 6. 非机械法的优点是破碎后的细胞外形保持完整易于后面的分离并且细胞的通透性高。（ ） 7. 温度和PH值对蛋白质溶解度的影响反映在cohn方程中是对β值得影响。 （ ） 8. 破碎细胞必须克服的主要阻力是连接细胞壁的网状结构的共价键。 （ ） 9. 与结晶相比，沉淀是不定型的固体颗粒，构成成分简单，沉淀的纯度远低于结晶。 （ ） 10. 区带离心的密度梯度一般可用蔗糖配制。 （ ） 11. 革兰氏阴性菌的细胞壁主要由肽聚糖层组成。 （ ） 12. 珠磨的细胞破碎效率髓细胞种类而异，但都随搅拌速度和悬浮液停留时间的增大而减小。 13. 化学渗透比机械破碎效率高。 （ ）

14. 当蛋白质周围双电层的ζ点位足够大时，静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力，使蛋白质溶液处于稳

定状态而难以沉淀。 （ ）

8

15. 蛋白质水溶液中离子强度在生理离子强度（0.15～0.2mol·kg）之外，蛋白质的溶解度降低而发生沉淀的现

象称为盐析。 （ ）

-1

16. 在高离子强度时，升温会使蛋白质的溶解度下降，有利于盐析沉淀，因此常采用较高的操作温度。

（ ）

17. 利用在其等电点的溶液中蛋白质的溶解度最低的原理进行分离，称为等电点沉淀，而不必考虑溶液的离子浓度

的大小。 （ ）

18. 无论是亲水性强，还是疏水性强的蛋白质均可采用等电点沉淀。 （ ）

19. 凝聚、絮凝是目前工业最常见的预处理方法之一。它们都是通过降低胶粒的双电层电位，使胶粒凝集的现象。

（ ）

20. 革兰阳性菌的细胞壁比革兰阴性菌的较难破碎。 ( ) 21. 板框过滤机适用于原液中的固体含量在10%以上。 ( ) 22. 细胞破碎的阻力主要来自于细胞间的范德华力。 ( )

23. 沉淀和结晶都是由溶解度降低引起的。 ( ) 24. 蛋白质在Ph值为其等电点时溶解度最低。 ( ) 25. 蛋白质沉淀的两大障碍是水化层和双电层。 ( ) 26. 盐析沉淀后无须进行脱盐处理。 ( ) 27. 有机溶剂沉淀必须在低温下进行。 ( ) 28. 蛋白质的溶解度在生理离子强度范围内最大。 ( ) 29. 等电点沉淀适用于疏水性较小的蛋白质，无须脱盐。 ( ) 30. 在Cohn经验方程

( )

中，

值只随蛋白质相对分子质量的增大而增强。

31. 硫酸铵价格便宜，溶解度大且受温度影响很小，具有稳定蛋白质的作用，是最常用的盐盐。

（ ）

32. 原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。 （ ） 33. 生物分离过程中，原料液中的目标产物的浓度一般很低，有时是极微量的。 （ ） 34. 液固沉降中固体颗粒只受重力和浮力的作用。 （ ） 35. 菌体直径越小，重力沉降速度越大。 （ ） 36. 离心沉降既可用于液固也可用于液液分离。 （ ） 37. 离心设备的旋转半径越大，转数越高，离心力越大。 （ ） 38. 细胞破碎分为机械破碎和化学破碎。 （ ） 39. 超声波的细胞破碎效率与细胞浓度无关。 （ ） 40. 沉淀是物理环境的变化引起溶质的溶解度降低，生成固体的现象。 （ ） 41. 蛋白质是两性高分子电解质。 （ ） 42. 盐析过程中溶解度与离子强度之间呈线性关系。 （ ） 43. 基因工程产品大多是胞内产物。 （ ） 五、简答题