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第二章 过滤和离心 第三章 细胞破碎
一、名词解释、
1. 凝聚:就是向胶体悬浮液中加入某种电解质，使胶粒的双层电位降低，排斥作用降低，使胶体体系不稳定，胶粒
间因相互碰撞而产生凝聚的现象。
2. 絮凝：当一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的胶粒表面上，产生架桥联接，形成较大凝絮团的过程。 3. 助滤剂：是一种不可压缩的多孔微粒，能使滤饼疏松，滤速增大。
4. 分离因数 ：是指离心设备所能达到的离心力与重力加速度的比值，用Z表示。Z=4π2N2r/g
5. 盐溶：在蛋白质水溶液中，加入少量的中性盐，如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等，会增加蛋白质分子表面
的电荷，增强蛋白质分子与水分子的作用，从而使蛋白质在水溶液中的溶解度增大。这种现象称为盐溶。
6. 盐析：蛋白质在高离子强度的溶液中溶解度降低，发生沉淀的现象称为盐析。
7. 包含体：外源基因表达的产物不能分泌到细胞外，而且在细胞内凝聚成没有生物活性的固体颗粒。
8. 高压匀浆法：也称高压剪切破碎法，是利用高压匀浆器破碎细胞的一种方法。即细胞悬浮液在高压作用下从阀
座与阀之间的环隙高速喷出后撞击到碰撞环上，细胞在受到高速撞击作用后，急剧释放到低压环境，从而在撞击力和剪切力等综合作用下破碎。
9. 珠磨法：是指在搅拌机的高速搅拌下微珠高速运动，微珠与微珠之间以及微珠和细胞之间发生冲击和研磨，使
悬浮液中的细胞受到研磨剪切和撞击而破碎。
10. 酶溶法：酶溶法利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞，使细胞壁受到部分或完全破坏后，再利用渗透压冲击等方
法破坏细胞膜，进一步增大细胞内产物的通透性。
11. 超声破碎法：超声波破碎发是利用发射15~24kHZ的超声波探头处理细胞悬浮液。是在超声波作用下发生空化
作用，空穴的形成、增大和闭合产生极大的冲击波和剪切力，使细胞破碎。
12. 空化现象：在相当高频率的超声波作用下，液体产生空穴泡，这种空穴泡在超声波继续作用下膨大和破碎，从
而产生极强的剪切力，使细胞破碎。
13. 有机溶剂沉淀：向蛋白质溶液中加入丙酮或乙醇等水溶性有机溶液，水的活性降低，随着有机溶剂浓度的增大，
水对蛋白质分子表面荷电集团或亲水集团的水化程度降低，蛋白质分子间的静电引力增大，从而凝聚和沉淀。 14. 等电点沉淀：蛋白质在PH值为其等电点的溶液中静电荷为零，蛋白质之间静电排斥力最小，溶解度最低。利
用蛋白质在PH值等于其等电点的溶液中溶解度下降的原理进行沉淀分级的方法称为等电点沉淀。 二、选择题
1. B 可以提高总回收率。
A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率 2.重力沉降过程中，固体颗粒不受 C 的作用。 A.重力 B.摩擦力 C.静电力 D.浮力 3.过滤的透过推动力是 _D__ 。
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A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差 4.在错流过滤中，流动的剪切作用可以 B 。
A.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度 B.减轻浓度极化，但降低凝胶层的厚度 C.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度 D.加重浓度极化，但降低凝胶层的厚度 5.目前认为包含体的形成是部分折叠的中间态之间 A__ 相互作用的结果。 A.疏水性 B.亲水性 C.氢键 D.静电
6.菌体和动植物细胞的重力沉降操作，采用 D 手段，可以提高沉降速度。 A.调整pH B.加热 C.降温 D.加盐或絮凝剂
8.高压匀浆中影响细胞破碎的因素主要有压力、循环操作次数和（ A ） A．温度 B. 细胞大小 C. 介质密度 D. 环隙大小 7.超声波破碎法利用的是细胞在超声波作用下产生的（ C ）
A．震荡作用 B. 温差效应 C. 空化作用 D. 气穴效应 8.当需要提取细胞膜附近物质时应采用（ C ）
A.超声破碎法 B. 珠磨法 C. 酶溶法 D. 显微分离法 9.蛋白质溶解度与离子强度呈（ D ）关系
A.正比 B.反比 C. 取决于蛋白种类 D. 对数
10.溶菌酶在2.8m/L和3.0m/L硫酸铵溶液中溶解度分别为1.2g/L和0.26g/L，则在3.5m/L硫酸铵中溶解度是多少（ ）
A. 0.0056g/L B. 0.00056g/L C. 0.0048g/L D. 0.00048g/L 11.影响沉降速度的因素？（A、B、D ）
A.颗粒直径 B.颗粒密度 C.液体体积 D.液体粘度 12.下列物质中，细胞破碎最容易的是（ G- ） A.G+ B.G- C.酵母 D.霉菌 13.以下哪种细胞破碎最容易？（B）
A.植物细胞 B.动物细胞 C.细菌细胞 D.藻类细胞 14.以下影响盐析的因素有？（B C D）
A.所用器具 B.温度 C.无机盐 D.pH值 15.盐的种类主要影响Ks，下列阴离子排序中正确的是（ C ） A.CHCOOˉ﹥Clˉ﹥SCNˉ﹥Iˉ B.Clˉ﹥CHCOOˉ﹥SCNˉ﹥Iˉ C.CHCOOˉ﹥Clˉ﹥Iˉ﹥SCNˉ D.Clˉ﹥CHCOOˉ﹥Iˉ﹥SCNˉ
16.下列几个选项中那些是最常用的发酵液的预处理方法：（ A、C ） A. 凝聚 B. 萃取 C. 絮凝 D. 透析 17. 蛋白质沉淀中，常用的有机溶剂沉淀剂有哪些：( C ) A .苯 B. 丙酮 C. 乙醇 D. 四氯化碳
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18.表示离心机分离能力大小的重要指标是 C . A.离心沉降速度 B.转数 C.分离因数 D.离心力
19.差速区带离心的密度梯度中最大密度 B 待分离的目标产物的密度. A.大于 B小于 C.等于 D.大于或等于
20. 以下蛋白质沉淀的方法中，沉淀产品需要后继的脱盐操作的是：( ) A．盐析沉淀 B等电点沉淀 C有机溶剂沉淀 D均不需要
21. 在Cohn方程中，logS=β-KsI中，盐析常数Ks反映 C 对蛋白质溶解度的影响。 A.操作温度 B.pH值 C.盐的种类 D.离子强度
22. 在Cohn方程中，logS=β-KsI中，β常数反映 B 对蛋白质溶解度的影响。 A.无机盐的种类 B.pH值和温度 C.pH值和盐的种类 D.温度和离子强度
23. 在相同的离子强度下，不同种类的盐对蛋白质盐析的效果不同， 一般离子半径 A 效果好。 A.小且带电荷较多的阴离子 B.大且带电荷较多的阴离子 C.小且带电荷较多的阳离子 D.大且带电荷较多的阳离子 24. 盐析沉淀时，对 A 蛋白质所需的盐浓度低。
A.结构不对称且高分子量的 B.结构不对称且低分子量的 C.结构对称且高分子量的 D.结构对称且低分子量的 25.蛋白质溶液的pH接近其等电点时，蛋白质的溶解度 B 。 A.最大 B.最小 C.恒定 D.零
26. 有机溶剂沉析时，下列对溶剂的选择依据描述错误的是：（ D ） A.介电常数要大 B.致变性作用要小 C.毒性要小、挥发性适中 D.水溶性有机溶剂 27. 絮凝的现象特点（ B ）
A.颗粒比较细小 B.形成粗大凝体 C.形状不规则化 28. 以下不可用于当做助滤剂的物质是（ B）
A.硅藻土 B.蛋白质 C.活性碳 D.淀粉 29. 细胞破碎中，以下是属于机械破碎的是（A、D ）
A.珠磨法 B.化学法 C.渗透压法 D.高压匀浆法 30. 可以用于化学渗透法的化学试剂（B ）
A.丁二醇 B.甲苯 C.苯酚 D.乙醇 31. 在细胞破碎中的酶溶法中的外加酶法中，不包含的酶是（ D ） A.纤维素酶 B.溶菌酶 C.淀粉酶 D.蛋白酶 32. 下列属于革兰氏阳性菌细胞壁结构的是（A）
A .肽聚糖 B .甘露聚糖 C. 脂多糖 D.纤维素 33.有关微生物的细胞组成正确的是（C ）
A.革兰氏阳性菌壁厚20～80nm，多层，肽聚糖含量40%～90% B.革兰氏阴性菌壁厚10～13nm，多层，脂多糖含量1%～4%
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C.酵母菌壁厚100～300nm，多层，葡聚糖含量30～40% D.霉菌壁厚100～250nm，多层，纤维素含量80%～90% 34.超声波破碎细胞原理（B ） A.固体剪切力 B.液体剪切力
C.非机械剪切力 D.声波直接作用于干细胞膜使细胞破裂 35.在蛋白质提取过程中进行细胞破碎的目的是（C ） A.追求最大破碎率 B.使细胞内物全部释放出来 C.是目标物质最大限度释放出来 D.使下阶段的过滤阶段速度更快
36.若离心机的转速n提高一倍，其他条件不变，则分离因数将为原来的（ C ） A.2倍 B. 倍 C.4倍 D.1/2 37.以下表达式中正确的是（ B ） A.过滤速率与过滤面积的平方成正比 B.过滤速率与过滤面积A成正比 C.过滤速率与所得滤液体积成正比 D.过滤速率与液体粘度成正比
38.离心设备的分离因数与哪些有关（ A、B） A.离心设备的旋转半径 B.角速度 C.功率 D.设备容量
39.重力沉降分离细胞时菌体细胞体积很小，沉降速度慢，应事先做预处理（A、B ） A.絮凝 B.凝聚 C.加热 D.离心 40.下列哪种细胞破碎适合高速匀浆法（A ）
A.酵母菌 B.革兰氏阳性菌 C.丝状或团状真菌 D.还有包含体的基因工程菌 41.关于沉淀和结晶的表述中不正确的是（ A ）
A.沉淀是物理环境变化引起的溶质溶解度降低生成固体凝聚物的现象 B.结晶是溶解度降低引起的固体成相现象 C.沉淀形成定形固体颗粒成分复杂 D.沉淀纯度远低于结晶
42.下列有关蛋白质沉淀方法不正确的是（ B ）
A.无机盐盐析 B.调节PH C.加入有机溶剂 D.加热
43.对于蛋白质溶解度与离子强度之间的关系说法正确的是（C ）
A.溶解度与离子强度成正比