1．为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量？实验中又是如何依此原理计算蛋白质含量的？

2．何谓肽键和肽链及蛋白质的一级结构？

3．什么是蛋白质的二级结构？它主要有哪几种？各有何结构特征？ 4．举例说明蛋白质的四级结构。 5．举例说明蛋白质的变构效应。

6．常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种？各自的作用原理是什么？

参考答案

一.名词解释

1．在多肽分子中肽键的6个原子（Cα1,C,O,N,H,Cα2）位于同一平面，被称为肽单元。 2．在蛋白质分子中，可发现二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象，并具有相应的功能，被称为模序。

3．在某些理化因素作用下，致使蛋白质的空间构象破坏，从而改变蛋白质的理化性质和生物活性，称为蛋白质变性。

4. 谷胱甘肽由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽，半胱氨酸的巯基是该三肽的功能基团。它是体内重要的还原剂，以保护体内蛋白质或酶分子等中的巯基免遭氧化。

5．在多肽链β折叠结构中，每个肽单元以Cα为旋转点，依次折叠成锯齿状结构，氨基酸残基侧链交替地位于锯齿状结构的上下方。两条以上肽链或一条肽链内的若干肽段的锯齿状结构可平行排列，其走向可相同，也可相反。并通过肽链间的肽键羰基氧和亚氨基氢形成氢键从而稳固β-折叠结构。

6．分子伴侣是一类帮助新生多肽链正确折叠的蛋白质。它可逆的与未折叠肽段的疏水部分结合随后松开，如此重复进行可以防止错误的聚集发生，使肽链正确折叠。 分子伴侣对于蛋白质分子中二硫键的正确形成起到重要作用。

7．数个具有三级结构的多肽链，在三维空间作特定排布，并以非共价键维系其空间结构稳定，每一条多肽链称为亚基。这种蛋白质分子中各个亚基的空间排布及亚基间的相互作用，称为蛋白质的四级结构。

8．蛋白质的三级结构常可分割成1个和数个球状区域，折叠得较为紧密，各行其能，称为结构域。

9．在某一pH溶液中，蛋白质分子所带的正电荷和负电荷相等，净电荷为零，此溶液的pH值，即为该蛋白质的等电点。

10．α-螺旋为蛋白质二级结构类型之一。在α-螺旋中，多肽链主链围绕中心轴作顺时钟方向的螺旋式上升，即所谓右手螺旋。每3.6个氨基酸残基上升一圈，氨基酸残基的侧链伸向螺旋的外侧。α-螺旋的稳定依靠α-螺旋每个肽键的亚氨基氢和第四个肽键的羰基氧形成的氢键维系。

11．蛋白质空间构象的改变伴随其功能的变化，称为变构效应。具有变构效应的蛋白质称为变构蛋白，常有四级结构。以血红蛋白为例，一分子O2与一个血红素辅基结合，引起亚基构象变化，进而引起进相邻亚基构象变化，更易与O2结合。

12．蛋白质三级结构是指整条多肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置，也即整条多肽链所有原子在三维空间的排布位置。蛋白质三级结构的形成和稳定主要靠次级键----疏水作用、离子键、氢键和Vander Waals力等。

13．一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基脱去1分子H2O，所形成的酞胺键称为肽键。 肽键的键长为0．132nm，具有一定程度的双键性质。参与肽键的6个原子位于同一平面。

二.填空题

1. 氨基酸；20

2. 非极性、疏水性氨基酸；极性、中性氨基酸；酸性氨基酸；碱性氨基酸 3. L-α-氨基酸；甘氨酸 4. 280；酪氨酸；色氨酸 5. 肽；肽（链） 6. 排列顺序；肽键

7. 谷氨酸γ-；巯基

8. 蛋白质分子中某一段肽链；不包括 9. 三级；四级

10.α碳；自由旋转度 11.中心轴；顺时针；右手 12.空间；一级

13.一级结构；分子伴侣 14.血红素；二价铁 15.S型；促进；正协同

16.亲水基团；水化膜；析出 17.正；负；零；等电点

18.蛋白质的表面电荷量；分子量；电泳 19.长；大

20.定性；定量；茚三酮反应；双缩脲反应

三.选择题

(一)A型题

1.A 2.C 3.C 4.D 5.E 6.B 7.B 8.D 9.D 10.A 11.C 12.B 13.C 14.A 15.C 16.C 17.A 18.B 19.B 20.D 21.D 22.E 23.A 24.B 25.D 26.A 27.C 28.B 29.A (二)B型题

1.E 2.C 3.B 4.E 5.D 6.C 7.A 8.C 9.B 10.E 11.A 12.C 13.A 14.B 15.E (三)X型题

1.AD 2.ACD 3.ABC 4.ABCD 5.AC 6.ABC 7.C 8.AB 9.AB 10.CD

四.问答题

1．各种蛋白质的含氮量颇为接近，平均为16％，因此测定蛋白质的含氮量就可推算出蛋白质含量。常用的公式为：蛋白质含量（克％）=每克样品含氮克数 X 6．25 X 100。 2．一个氨基酸的a-羧基和另一个氨基酸的a-氨基，进行脱水缩合反应，生成的酰胺键称为肽键。肽键具有双键性质。由许多氨基酸通过肽键相连而形成长链，称为肽链。肽链有二端，游离a-氨基的一端称为N-末端，游离a-羧基的一端称为C-末端。蛋白质一级结构是指多肽

链中氨基酸排列顺序，它的主要化学键为肽键。

3．蛋白质二级结构是指多肽链主链原子的局部空间排布，不包括侧链的构象。它主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲四种。在α-螺旋结构中，多肽链主链围绕中心轴以右手螺旋方式旋转上升，每隔3．6个氨基酸残基上升一圈。氨基酸残基的侧链伸向螺旋外侧。每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四个氨基酸残基羰基上的氧形成氢键，以维持α-螺旋稳定。在β-折叠结构中，多肽键的肽键平面折叠成锯齿状结构，侧链交错位于锯齿状结构的上下方。两条以上肽键或一条肽键内的若干肽段平行排列，通过链间羰基氧和亚氨基氢形成氢键，维持β-折叠构象稳定。在球状蛋白质分子中，肽链主链常出现1800回折，回折部分称为β-转角。β-转角通常有4个氨基酸残基组成，第二个残基常为脯氨酸。无规卷曲是指肽链中没有确定规律的结构。

4．蛋白质四级结构是指蛋白质分子中具有完整三级结构的各亚基在空间排布的相对位置。例如血红蛋白，它是由1个α亚基和1个β-亚基组成一个单体，二个单体呈对角排列，形成特定的空间位置关系。四个亚基间共有8个非共价键，维系其四级结构的稳定性。

5．当配体与蛋白质亚基结合，引起亚基构象变化，从而改变蛋白质的生物活性，此种现象称为变构效应。变构效应也可发生于亚基之间，即当一个亚基构象的改变引起相邻的另一亚基的构象和功能的变化。例如一个氧分子与Hb分子中一个亚基结合，导致其构象变化，进一步影响第二个亚基的构象变化，使之更易与氧分子结合，依次使四个亚基均发生构象改变而与氧分子结合，起到运输氧的作用。

6．蛋白质分离纯化的方法主要有：盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛层析等方法。盐析是应用中性盐加入蛋白质溶液，破坏蛋白质的水化膜，使蛋白质聚集而沉淀。透析方法是利用仅能通透小分子化合物的半透膜，使大分子蛋白质和小分子化合物分离，达到浓缩蛋白质或去除盐类小分子的目的。蛋白质为胶体颗粒，在离心力作用下，可沉降。由于蛋白质其密度与形态各不相同，可以应用超离心法将各种不同密度的蛋白质加以分离。蛋白质在一定的pH溶液中可带有电荷，成为带电颗粒，在电场中向相反的电极方向泳动。由于蛋白质的质量和电荷量不同，其在电场中的泳动速率也不同，从而将蛋白质分离成泳动速率快慢不等的条带。蛋白质是两性电解质，在一定的pH溶液中，可解离成带电荷的胶体颗粒，可与层析柱内离子交换树脂颗粒表面的相反电荷相吸引，然后用盐溶液洗脱，带电量小的蛋白质先被洗脱，随着盐浓度增加，带电量多的也被洗脱，分部收集洗脱蛋白质溶液，达到分离蛋白质的目的。分子筛是根据蛋白质颗粒大小而进行分离的一种方法。层析柱内填充着带有小孔的颗粒，小分子蛋白质进入颗粒，而大分子蛋白则不能，因此不同分子量蛋白质在层折柱内的滞留时间不同，流出层析柱的先后不同，可将蛋白质按分子量大小而分离。

第二章 核酸的结构与功能

一.名词解释

1．核小体 6．核酶

2．碱基互补 7．核酸分子杂交 3．增色效应 8．反密码环

4．Tm值 9. Z-DNA 5．核糖体

二.填空题

1．在典型的DNA双螺旋结构中，由磷酸戊糖构成的主链位于双螺旋的______,碱基_______。 2．tRNA均具有__________二级结构和__________的共同三级结构。 3．成熟的mRNA的结构特点是：____________，____________。 4．DNA的基本功能是____________和_____________。

5. Tm值与DNA的_____________和所含碱基中的_____________成正比。

6．DNA双螺旋结构稳定的维系横向____________维系，纵向则靠___________维持。 7．脱氧核苷酸或核苷酸连接时总是由________与_________形成3'，5'磷酸二酯键。 8．嘌呤和嘧啶环中均含有___________，因此对___________有较强吸收。 9．___________和核糖或脱氧核糖通过___________键形成核苷。

三.选择题

(一)A型题

1．核酸中核苷酸之间的连接方式是___

A．2'，3'-磷酸二酯键 B．3'，5'-磷酸二酯键 C．2'，5'-磷酸二酯键 D．糖苷键 E．氢键 2．与 pCAGCT互补的DNA序列是___

A．pAGCTG B．pGTCGA C．pGUCGA D．pAGCUG E．pAGGUG

3．DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确___

A. 腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 B．同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似 C．DNA双螺旋中碱基对位于外侧

D. 二股多核苷酸链通过A与T或C与G之间的氢键连接

E．维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆积力 4．符合DNA结构的正确描述是___

A. 两股螺旋链相同 B．两股链平行，走向相同 C．每一戊糖上有一个自由羟基 D．戊糖平面垂直于螺旋轴 E．碱基对平面平行于螺旋轴

5．RNA和DNA彻底水解后的产物___

A. 核糖相同，部分碱基不同 B．碱基相同，核糖不同 C．碱基不同，核糖不同 D．碱基不同，核糖相同 E．碱基相同，部分核糖不同

6. DNA和RNA共有的成分是___

A. D-核糖 B. D-2-脱氧核糖 C. 鸟嘌呤 D. 尿嘧啶 E. 胸腺嘧啶 7. 核酸具有紫外吸收能力的原因是___

A. 嘌呤和嘧啶环中有共轭双键 B. 嘌呤和嘧啶中有氮原子 C. 嘌呤和嘧啶中有硫原子 D. 嘌呤和嘧啶连接了核糖 E. 嘌呤和嘧啶连接了磷酸基团

8. 有关DNA双螺旋模型的叙述哪项不正确___

A. 有大沟和小沟 B. 两条链的碱基配对为T=A,G≡C C. 两条链的碱基配对为T=G,A≡C D. 两条链的碱基配对为T=A,G≡C E. 一条链是5'→3',另一条链是3'→5'方向