细 胞 生 物 学 实验课程教案(1)
实验题目 血涂片的制备及细胞大小的测量 1. 掌握血涂片的制备方法 实验学时 3 实验目的 2. 认识红细胞及各种白细胞的典型形态 3.掌握显微测微尺的使用方法 将血液样品制成单层细胞的涂片标本,经瑞氏染液染色后,不同白细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。碱性粒细胞的颗粒呈蓝紫色,酸性粒细胞的颗粒呈橘实验原理 红色,中性粒细胞的颗粒呈粉红色。根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少,再结合细胞的大小及细胞核的形态,就可以将白细胞进行分类计数。 显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管、离心机、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、载玻片、目镜测微尺和镜台测微尺等 鸡血细胞 实验仪器 实验材料 实验内容与实施过程 备 注 1.血涂片的制备与血细胞的观察(50分钟): 腹→采血→推片:挤出第二滴血置于载玻片的右侧→再取另一张边缘光滑的双凹 片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线 状→两玻片的角度以30~45°为宜,轻轻将双凹片向前匀速推进,即涂成血液薄膜 采血前用70%酒精棉球消毒人的指→染色:用天平称取去皮的土豆块茎2g+10mlPBS缓冲液,浸泡2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素。 2. 显微测微尺的使用(35分钟):以无菌方法抽取鸡血注射器中抽取3.8%柠檬酸钠1ml抽取鸡静脉血液2ml,用生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。 3.细胞的观察与讨论(50分钟):淋巴细胞、白细胞、中性粒细胞、碱性粒细胞和酸性粒细胞 4、实验小结(15分钟):总结实验过程中学生的操作是否规范;实验是否成功,如果不成功,问题出在哪里;哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容,提问。共150分钟。 实验作业 1.绘制各种不同类型的血细胞,并说明它们的主要作用? 2.任选20个红细胞,测量其直径,并计算出平均值. 。 参考资料 (含参考文献、期刊、杂志等) 对于涂片的厚度一定要掌握,不然太厚不方便观察细胞,对于 各种白细胞的染色一定要把握好,适度的染色可容易的区分开五实验总结 种白细胞,并进行大小的测量和绘图。 细 胞 生 物 学 实验课程教案(2)
实验题目 细胞化学实验 熟悉细胞脂类的显示技术,了解其在细胞中的分布;学习区别定位细胞DNA、实验学时 3 实验目的 RNA的显示方法 (1)苏木精为碱性染料染细胞核,苏丹红为偶氮脂溶性染料,可显示细胞中的脂类的分布及量; (2)甲基绿与DNA双螺旋外侧的磷酸根基团结合力强,结合后阻止派洛宁从碱基之间插入。甲基绿与DNA的结合产物为绿色。派洛宁与RNA的结合力强,实验原理 RNA结构较松散,派洛宁可以插入,从而中和磷酸基团,阻止甲基绿染色,派洛宁与RNA的结合物呈红色,根据颜色的部位可以判断DNA和RNA的定位并且判断两种核酸的相对含量。 实验仪器 水浴锅、冰冻切片机、载玻片等; 猪肝、花生子叶 实验材料 实验内容与实施过程 备 注 凝集素是一类含糖、并能与糖专一结合的蛋白质,被1. 脂类显示(65分钟):用猪肝切片和花生的超薄切片,学习掌握使用冰冻切片机的操作技术,获得理想的切片; 2. 细胞中DNA和RNA的显示(70分钟):材料选用猪肝印片,学习如何制备肝印片的片子,而后进行固定、浸洗、染色等即可显示二者在细胞中的分布。 3、实验小结(15分钟):总结实验过程中学生的操作是否规范;实验是否成功,如认为与糖的运输、储存物质的积累、细胞间的互作以及细胞分裂关。 果不成功,问题出在哪里;哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容,提问。的调控有共150分钟。 实验作业 参考资料 (含参考文献、期刊、杂志等) 细胞中脂类和核酸显示的原理是什么? 实验总结
植物材料两种化学成分的显示结果都比较好,但是猪肝的效果较差,这可能与切片的厚度有很大的关系,猪肝组织柔软不像花生子叶好切。
细 胞 生 物 学 实验课程教案(3)
实验题目 细 胞 凝 集 反 应 1. 学习制备土豆凝集素 实验学时 3 实验目的 2. 掌握细胞凝集反应的实验方法及细胞凝聚的原理。 3. 观察凝集的现象