组织培养 整理 下载本文

得到不同程度的遏制。

第五章 离体培养基本技术—环境条件的影响 1 光照

光照是离体培养中重要的外界条件之一,它对外植体的生长和分化有较大的影响,表现在光照强度、光质(光谱波长)和光周期等方面 不同材料对光强的要求可能不同,

? 同种材料在光照或黑暗条件下产生不同的培养反应,如百合原球茎在黑暗

条件下,产生小球茎,在光照条件下,产生叶片;一些蕨类植物的茎尖培养,在黑暗条件下长根,在光照条件下则长叶。

在愈伤组织诱导方面,暗培养的效果通常优于光培养,而且所诱导愈伤组织的质地、颜色也与光培养的有不同。但一般情况下,培养的植物材料对光照强度的要求不是十分严格,每日12~16小时、500~1000 Lx的光照可满足大多数培养物生长和分化的需要。

光质也可以影响外植体愈伤组织的诱导、组织的增殖及其器官分化。

还有的研究发现,与白光和黑暗条件相比,蓝光明显促进绿豆下胚轴愈伤组织的形成。红光能促进生长和分化.

光周期对培养材料的增殖和分化也有一定的影响

对短日照敏感的葡萄品种,其茎切段的组织培养物只有在短日照条件下才能形成根,反之,对日照长度不敏感的品种则在任何光周期下都能生根。一般情况下,离体培养中应采用一定的光周期,如12~16h光照/12~8h黑暗是比较适宜的。 2 温度

? 离体培养中培养材料对温度的要求比光照更为重要,这是因为在离体培

养条件下,植物材料生命活动的能源物质和结构物质主要来自于外源供给,而非光合同化作用。因此,光照对培养材料的影响一般不是很大,相反,如果培养的温度不适,则会不利于材料的生长与发育,甚至造成伤害。

? 离体培养的适宜温度因植物种类和外植体类型不同而异,一般控制在25

±2℃下培养较好。

对热带园艺植物应适当提高培养温度,一般控制在30±2℃为宜

? 温度对离体培养的影响还表现在其它一些方面,

? 其一,低温对离体培养中某些休眠的园艺植物材料是十分必要的,低温

处理可以打破外植体的休眠,促使外植体萌发,其二,低温处理能促进培养材料的生长 其三,温度有时可能影响到形态发生的类型。其四,培养物还可能受昼夜温度周期的影响,如菊芋根的发生最好是在交替的温度条件下。

3 湿度

? 离体培养中的湿度影响主要有两方面:一是培养容器内的湿度,常可保

证100%;二是培养室的湿度,随季节而有很大变动,往往是冬天因室内温度比室外高,结果室内湿度低;而夏天却因室内温度比室外低,结果室内湿度高。

? 湿度过高过低都不利于培养物生长,过低会造成培养基失水而干枯或渗

透压升高,影响培养物的生长或分化,过高又会造成杂菌滋长,导致大量污染。因此,培养室内的相对湿度以70%~80%为宜。可用去湿机和增湿机调节。

? 培养容器内的湿度也可能因琼脂用量或培养方式(液体培养与固体培养)

的不同而有改变。这种湿度变化可能对外植体的生长发育产生影响,Margara等(1967)在菊苣离体根切段培养中,发现培养基的物理形式对器官分化的类型起着重要作用。

如果培养的材料用一置于液体培养基中的滤纸桥支持,则外植体形成营养芽,而在琼脂培养基上培养的,则形成花芽,而且随着琼脂浓度增加(6~36mg.L-1),形成花芽的外植体的百分比也增加。Bouniols(1974)则明确指出,培养物周围的相对湿度影响器官发生的类型。 4 培养基的pH值

外植体的培养增殖都要求一定的pH值。通常培养基的pH值以在5.4~6.0之间较好。

5 氧和其它气体

? 氧是植物组织必需的。在接种时应避免把整个外植体全部埋入琼脂中,

否则造成缺氧窒息。在静止的液体培养基中架上滤纸桥,或使用液体振荡培养,都是解决液体培养时氧气供应的良好办法

Kessed等(1972)认为这与液体培养基中存在的氧浓度有关,当培养基中氧浓度低于临界水平时,促进形成胚状体,当氧浓度高于临界水平,则有利于形成根

? 第六章 植物快繁技术 ? 微繁的优势

1 无性繁殖为大多数有价值的农作物大量繁殖提供了一个高效的方法(完全相同的基因,生理性状不变和正常发育) 2 生产无病植株

3 一. )香蕉组培研究和工业生产的意义

1. 无性繁殖 2. 生产无病植株 3 种质保存 4 种质更换 5 对香蕉的其他研究有意义

离体法是最有用的保存法,特别是无性繁殖植物(例如园艺作物)。 体外保存的优势包括:

(a)大量的繁殖植株要求有很少的繁殖空间; (b) 材料保持在无病原体和害虫环境中 (c)避免了自然环境中的灾害风险; (d)必要时能有效的快速的大量的繁殖 ? 香蕉组织培养技术

? Stage 1. To obtain aseptic culture(无菌培养) system ? Stage 2. Proliferation(增殖 ) ? Stage 3. Rooting生根

? Stage 4. Greenhouse for Hardening温室炼苗