1病原生物基因组在医学上有何应用？详见书P3

a菌种鉴定b确定病毒感染和病毒载量c病毒分析d细菌耐药监测和分子流行病学调查

2什么是原癌基因，原癌基因有什么特性，原癌基因可以分为哪些种类以及原癌基因常见的激活机制有哪些？

原癌基因是指人类或其他动物细胞(以及致癌病毒)固有的一类基因，能诱导细胞正常转化并使之获得新生物特征的基因总称。

特性：进化上高度保守，负责调控正常细胞生命活动，可以转化为癌基因。

功能分类：生长因子，生长因子受体，信号转导蛋白，核调节蛋白，细胞周期调节蛋白，抑制凋亡蛋白 激活机制：插入激活，基因重排，基因点突变，基因扩增，基因转录改变

3试述Down综合征（21三体综合征）的主要临床特征及核型。

临床特征：生长发育障碍，智力低。呆滞面容，又称伸舌样痴呆。40%患者有先天性心脏畸形。肌张力低，50%患者有贯通手，男患者无生育能力，女患者少数有生育能力，遗传风险高。

核型：92.5%患者游离型：核型为47，XX(XY),+21 2.5%患者为嵌合型：46，XX(XY)/47，XX(XY),+21 5%患者为易位型：46，XX(XY),-14，+t(14q21q)

4简述淋球菌感染的主要传统实验室诊断方法及其主要特点，对比分析分子生物学方法的优势

1直接涂片染镜检：敏感度和特异性差，不能用于确诊。

2分离培养法：诊断NG感染的金标准，但是其对标本和培养及营养要求高，培养周期长，出报告慢，难以满足临床要求。

3免疫学法：分泌物标本中的非特异性反应严重以及抗体法间的稳定性和条件限制，推广受限。 分子生物学的优点：敏感，特异，可直接从了临床标本中检出含量很低的病原菌，适应于快速检测

5、在单基因遗传病的分子生物学检验中，点突变检测常用方法有哪些？

对背景清楚或部分清楚的点突变，通常采用 直接检测基因点突变的方法，如等位基因特异性寡核苷酸探针杂交，等位基因特异性PCR，PCR限制性片段长度多态分析，基因芯片，PCR-ELISA等技术

对基因背景未知的点突变，常采用PCR-单链构象多态性，变形梯度凝胶电泳，DNA序列分析，异源双链分析。

6、简述白假丝酵母菌的分子生物学检验方法

白假丝酵母菌分子生物学检验主要包括白假丝酵母菌特异性核酸（DNA RNA）的检测、基因分型和耐药基因分析等。

1PCR技术：选择高度特异性的天冬氨酸蛋白酶基因设计引物

PCR—斑点杂交技术：正向杂交和反向杂交，后者可一次检测多种真菌 DNA指纹技术：RFLPRAPD电泳核型分析

AP—PCR技术：定义方法简便，快速，特别适合临床应用 DNA序列分析：可测定rDNA序列也适用于基因突变引起的耐药 基因芯片技术：适用于病原体的耐药研究

7、 F VIII基因倒位导致血友病A，DMD基因外显子缺失导致与杜氏肌营养不良，珠蛋白 基因突变导致与珠蛋白合成障碍性贫血。

（第11章，P197，P203，P207。窝觉得大家把题目读三遍就可以了）

答：F VIII基因倒位是导致的血友病A的主要原因（占50%）其它基因突变，如点突变，缺失，插入也会导致血友病A。

同理DMD基因外显子缺失是迪谢内肌营养不良（杜氏肌营养不良）发生的主要原因（60%-70%）。

珠蛋白合成障碍性贫血有六种，主要的两种是α珠蛋白生成障碍性贫血和β珠蛋白生成障碍性贫血，基因突变是主要发病原因。

8、基因多态性有哪些的临床应用？（P4）

答：1、基因定位和遗传病相关性分析；2、疾病诊断和遗传咨询； 3、多基因病的研究；4、器官移植配型和个体识别

9.第一代测序技术特点。（p83）

答：优点：高读长，准确率一次性达标率高，能很好处理重复序列和多聚序列，易小型化。

缺点：通量低，单个样本制备成本相对较高，难以做大量的平行测序,小规模进行。

10. 慢粒融合基因。急性早幼粒融合基因。

答案：（一）慢粒融合基因（p229）

BCR-ABL融合基因：BCR-ABL为t（9；22）(q34;q11)染色体易位所产生的融合基因，可见于25%-40%的成人ALL和4%-6%的儿童ALL，更是CML的重要分子基础（95%），Ph1染色体异常即为t(9；22（q34;q11）易位。

(二)急性早幼粒融合基因（p230）（10-529）

PML-RARa融合基因：多数急性早幼粒细胞白血病（APL）有染色体t(15;17)(q22；q21)的易位，位于15q22的早幼力粒细胞白血病(PML)基因的17q21的维A酸受体a(RARa)基因融合成PML/RARa。98%的AML-M3亚型发生该融合基因。

11华法林用药监测常用何种基因多态性，它有何特点。

P264 监测CYP2C9基因多态性，其特点为：CYP2C9约占CYP450总量的20%，参与约12%临床药物的代谢，尤其与磺酰脲类降糖药甲糖宁的代谢特异性有关。（不肯定，参照P262）

12在细胞增殖周期中，染色体的形态最典型和清晰的阶段。

P243 （填空题）有丝分裂中期

13单基因遗传病间接诊断是在家系中进行？

P192 （填空题）连锁分析和关联分析

14染色体异常？原癌基因、核酸分子标志物、病毒感染的完整性检出策略、线粒体基因突变性糖尿病、PCR-RFLP、AP-PCR技术、抑癌基因、准病毒株、核型分析、连锁

染色体异常：在受到环境，物理，化学，生物，自身遗传和母亲年龄等因素影响，导致人体染色体数目和结构的异常改变。

原癌基因：是指人类或其他动物细胞固有的一类基因，能诱导细胞正常转化并使之获得新生物特征的基因总称。

核酸分子标志物：是分子生物学检验的主要内容，包括基因突变，DNA多态性，基因组DNA片段，RNA和循环核酸等多种形式。

病毒感染的完整性检出策略：通过分子生物学检验技术对病毒的存在与否作出明确的判断，同时能够诊断出带菌者和潜在性感染者，并能对病毒进行拷贝数测定，基因分型检测及亚型和耐药性鉴定。

线粒体基因突变性糖尿病：（p240）tRNAleu(UUR)A3243G是国际上唯一公认的线粒体糖尿病致病突变，是国内外报道的最多，发病率较高的单基因糖尿病突变位点。（课本上找不到）

PCR--PFLP:：是对PCR产物作限制性片段的长度多态性分析，是根据PCR产物突变序列是否位于限制性内切酶的酶切位点内设计的。

AP-PCR技术：AP-PCR分析是一种利用任意合成的单个寡核苷酸引物通过PCR扩增靶细胞DNA，经凝胶电泳分析DNA片段大小和数量多态性，从而比较靶基因的差异。方法操作简便，快速，特别适用于临床。

抑癌基因：又称肿瘤抑制基因，为一类可编码对肿瘤形成起阻抑作用蛋白质的基因，正常情况下负责控制细胞的生长和增殖。

准病毒株：即准种，是指HCV感染后，在感染者体内形成以一个优势株为主的相关突变株病毒群。 核型分析：人类的染色体数目和形态的相对恒定，将细胞的染色体按相应的生物固有的染色体形态特征和规定，进行配对，编码和分组的分析过程。

连锁：在疾病家系中，同一染色体上相邻的两个位点因其位置十分靠近，在遗传时两者分离的概率很低。

15HBV感染的病原学诊断目前主要依靠？

答：免疫学方法检测HBV的血清学标志物和分子生物学检测HBV核酸。P141

16甲型分亚型的标准？

P148 (书上未找到甲型)丙型肝炎5’UTR区的序列最为保守，种系变化程度及进化率都很低，可用于区分主要基因型。NS5b区变异交大，易于区分不同病毒株，常被选作亚型区分依据。

17淋病奈瑟菌的分子生物学检验最常用的检测目标是？

P172 核酸的检测：1.PCR，2实时荧光定量PCR，3.连接酶链反应（LCR），4.链替代扩增技术(SDA)； 耐药性检测：1.DNA测序，2.PCR-SSCP，3.PCR-RFLP，4.基因芯片技术

18最常用的检测大肠杆菌O157：H7致病基因的方法是？主要检测的靶基因包括？

P174 PCR是最常用的检测方法；

主要检测的靶基因包括：stx1、stx2、eae 、ehxA 、saa

19胎植入前诊断分子生物学技术主要包括？p269

1 单细胞PCR技术（步骤包括模板制备、单细胞基因扩增及产物分析） 2荧光原位杂交技术（FISH） 3其他PGD技术

20.真菌分子生物学检验常用？p179

1. PCR技术 2. PCR斑点杂交技术 3. DNA指纹技术 4. AP-PCR技术 5. DNA序列分析 6. 基因芯片技术

21 衣原体的特点。

衣原体能够通过细菌滤器、无肽聚糖、对r-干扰素敏感、基因组小、发育周期独断、专性活细胞内寄生的特殊原核细胞型微生物。它广泛寄生于人，哺乳动物及禽类，少数致病。它具有特征意义的特包涵体形态，细胞内定位，染色性。

22?多发性骨髓瘤患者最常见的肿瘤标志物。

β2-微球蛋白（β2-MG）

23目前c-erb B-2/HER2用于哪种肿瘤的诊断？

答：乳腺癌

24常见原癌基因有？抑癌基因有？

答：常见原癌基因有：sis、int-2、erb、ras 等

常见抑癌基因有：APC、P53、Rb 等 具体见P212

25何种常见遗传病可通过染色体检查而确诊？

答：Donwn综合征（21三体综合征） 具体见P247

26根据乙肝表面抗原的抗原性差异，可以将乙肝病毒分为几个血清型？P143

答：可以分为10个血清型，其中主要血清型有adr adw ayw ayr

27 STRs作为首选的群体遗传学和法医学研究的遗传标志物，其位点分析不可以应用于哪个方面?p285

答：1、同卵双生子的区分 2、妊娠期胎儿父权的认定 3、微量组织来源的鉴定

28对于基因背景未知的点突变，通常不采用何种检测方法？P191

答：不采用直接检测基因点突变的方法，如等位基因特异性寡核苷酸探针杂交、等位基因特异性PCR、PCR-限制性片段长度多态性分析、基因芯片、PCR-ELISA等技术。

29单基因遗传病主要遗传方式涉及几对等位基因，其传递呈典型的孟德尔式遗传

一对

30分子生物学检测技术中，需要结合电泳技术的有？

蛋白质组学技术（双向凝胶电泳）

31常用于结核分枝杆菌感染检测的分子生物学检测技术中，采用杂交保护试验原理的技术是？

扩增结核分枝杆菌直接试验

32.弓形虫DNA的主要形式是？

三种形式：染色体DNA、线粒体DNA和胞质DNA

33.采用PCR扩增TP的耐药菌株23srRNA基因，经测序发现A2058位点的碱基突变，用何种分析发现有酶切图谱的变化？

PCR-RFLP（PCR--限制性酶切片段多态性分析）

34.在医院细菌感染的常用分子学技术中，被认为是菌株分子分型金标准的是？

脉冲场凝胶电泳（PFGE）

35、高危型人乳头瘤病毒约几种？

答：高危型HPV约20种，最经典的有13种（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、73、82等）。

36、点突变涉及基因的？

答：点突变设计基因的替换，缺失或插入。

37、PCR技术是新型隐球菌分子生物学检验最常用的方法，其中FQ-PCR和巢式PCR应用较多，常扩增的目的片段是？

答：rDNA的复合体

38.采用PCR、实时荧光定量PCR技术、巢式PCR和竞争性PCR检测肺炎衣原体DNA一般选