Document No.: Farmtec Research Co., Ltd. Version No.: 01 Page 5 of 7 Effective Date: 2009.09.20 FQC01002 Title: Waters高效液相(Waters e2695 2489 Emp2)使用维护和校正 6.7 清洗色谱柱及管路

分析结束后，保持原流动相冲洗两倍以上的保留时间(至少半小时)，再依据样品的流动相性质，将流动相改为相应的清洗溶剂（依据所分析样品的流动相性质选用，通常涉及使用水溶液的用超纯水，有机系统可直接用甲醇），冲洗约60ml后，再改用甲醇冲洗约30ml，待系统正常后，关闭色谱工作站，关闭HPLC各部件电源及电脑。 6.8 记录

实验结束填写记录，除去杂物，整理干净。 7. 保养

7.1 仪器基本资料和规格见附件二。 7.2 擦拭仪器外表，保持清洁。

7.3 柱子使用后需保存在合适的环境中以便下次使用。 7.4 Pump使用过结晶性或缓冲液的流动相之后必须用水清洗。 7.5 Plunger及Seal若磨损时，应更新以免产生误差（会有漏液现象）。 7.6 每周定期由指定人员进行清洁保养并留记录。（见附件3）。 8. 注意事项

8.1 仪器应避免放在有腐蚀性气体或易振动的地方，应置于温度10-40℃且具温度调节的地方。 8.2 仪器应有“接地”装置，并有“稳压”装置供应电源。 8.3 使用当中切勿搬动，以免损坏仪器。

8.4 若需维修仪器时，切勿自行拆卸装置，以免损坏零件。 9. 校正

9.1 校正周期：三个月。

9.2 校正程序

9.2.1 开机及准备

9.2.1.1 打开电脑，自检自动进行，当在2695分离单元上显示Idle后，系

统自检结束。

9.2.1.2 Prime Nd/Wash检测，当在2695分离单元上显示Idle后，按Diag

按钮，再按Prime Nd/Wash按钮，按Start按钮，开始进行Nd/Wash，结束后，按Close回到Diag。

9.2.1.3 Prime Seal Wash：在Diag窗口，按Prime Seal Wash，按Start按钮，

开始进行Seal Wash，结束后，按Close回到Diag。

9.2.2 流速准确性

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9.2.4

9.2.5

9.2.6

9.2.7

9.2.2.1 流动相为超纯水

9.2.2.2 取经过校正的容量瓶和秒表备用，于管柱出口端（不接检测器）收

集滴出的溶液。

9.2.2.3 分别设定流速于5.0，1.0，0.5ml/min，分别用25ml,10ml,10ml干燥

容量瓶收集25ml,10ml,10ml，当流速稳定时开始计时，各执行三次 ，流速接受标准为±1.2%。

进样准确性

9.2.3.1 在样品瓶中装入1.5ml脱气后的超纯水，精密称定为W1。

9.2.3.2 流动相为甲醇，流速为1.0ml/min，柱温为25℃，样品室温度设定

为25℃，（平衡15min后，温度计测实际值，查找对应的水密度ρ）进样体积为50μL，样品运行时间为0.1min。

9.2.3.3 连续进样6次后，取出样品瓶，精密称定为W2，每针进样量=

（W1-W2）/6ρ,接受标准为49.0-51.0μL。

柱温准确度

9.2.4.1 温度范围由25℃上升至50℃。

9.2.4.2 升温幅度为5℃，并逐个测定，接受标准为偏差±1.5℃。 线性考察

9.2.5.1 配制0.025，0.035，0.05，0.07，0.1mg/ml五种浓度的Paracetamol,

以流动相为溶剂。

9.2.5.2 用C18色谱柱，流动相水：甲醇70：30（V/V）,流速为1.0ml/min，

进样量20μL，AUFS:1.0,于254nm处检测。

9.2.5.3 进样并记录各浓度样品的色谱峰面积。 9.2.5.4 Correction R≥0.9990。 进样线性考察

9.2.6.1 取Linearity Test项下0.025mg/ml Paracetamol溶液作为样品。 9.2.6.2 色谱条件同线性考察。

9.2.6.3 分别进样5，10，20，50μL，并记录各进样量的色谱峰面积。 9.2.6.4 Correction R≥0.9990。 GPV梯度考察

9.2.7.1 GPV梯度考察的准备：流速为2.0ml/min，设置ABCD通道各25%，

使通道A和B充满甲醇，通道C和D充满5.6mg/l对羟基苯甲酸丙酯的甲醇溶液。

9.2.7.2 流动相的脱气：将在线真空脱气装置设置为标准模式，运行在线真

空脱气装置至少15min。

9.2.7.3 不接色谱柱，将色谱柱以二通代替。 9.2.7.4 单击“仪器方法”，建立方法“GPV”，设定检测波长254nm，按下

表设置样品。 样品瓶 样品名称 功能 自定义 自定义 进样 Farmtec Research Co., Ltd. Page 6 of 7

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运行样品。

9.2.7.6 GPV梯度测试完成后，处理数据及报告。找出前四个峰中最高和

最低的峰，按下列公式计算结果：

Difference?100(Hh?H1)2?Hf

Hh是最高峰的峰高 Hl是最低峰的峰高

Hf是满刻度的峰高（最后一个峰）

9.3 所有校正数据填写在附表中。

9.4 如果校正完成并符合要求，校正人员按要求填写仪器校正说明书。

9.5 仪器校验说明书上应写明仪器编号，校验日期，再校日期，校验结果，由校验人

签字主管复核后，将最新的校验说明书粘贴于仪器表面，同时将上一次的校验说明书附在对应校正记录的背面。 9.6 如果未通过校正，应该做适当的调整，如果无法做调整，在它维修完成或购买新

的仪器之前不得使用。

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