高倍镜观察:高倍镜下可见原始卵泡由位于中央的卵母细胞和其外围呈扁平状的一层卵泡细胞组成。卵母细胞较大,圆形,中央有一个大而圆、嗜碱性的细胞核,核仁大而明显、染色质呈小块状。细胞质包绕在核的周围,弱嗜酸性,呈细颗粒状或均质淡红色。细胞质内未见任何细胞器和包含物,这是由于所有的细胞器和包含物都需要经过特殊的染色才能显示。胞膜和核膜在光镜下不能分辨。切面如不经过细胞核或核仁,则细胞内无细胞核或缺核仁。核内的各种结构可能不在同一焦距平面上,观察时必须上下转动细调节螺旋方可获得清晰的图像(图1)。
图1 卵巢切片 图2脊神经节纵切片
B高尔基复合体 脊神经节纵切片 镀银法
肉眼观察:脊神经节纵切面略呈椭圆形,染成棕黄色。
低倍镜观察:可见脊神经节主要由深色的神经纤维束和纤维束之间呈淡黄色的脊神经节细胞构成。脊神经节细胞成群分布,切面呈圆形或椭圆形,胞体大小不等。选择一个细胞质中有黑色网状物的脊神经节细胞,转换高倍镜观察。
高倍镜下观察:脊神经节细胞呈淡黄色,中央或偏心处有一个不着色圆形的细胞核。核周围的胞质中散布棕黑色的网状物即高尔基复合体。注意胞质中的高尔基复合体数量不等,形状各异,有的呈网状,有的则被切断而呈粗颗粒状。切面如不经胞核的脊神经节细胞,高尔基复合体则散布于细胞质中(图2)。
(2)动物细胞有丝分裂 马蛔虫子宫切片 铁苏木精染色
肉眼观察:切片中有4~6个圆形马蛔虫子宫横切面。
低倍镜观察:一个马蛔虫子宫横切面,可见子宫壁由高柱状细胞构成,子宫腔内有许多圆形或椭圆形的马蛔虫卵切面。每个虫卵的外表面都包着一层较厚的胶质膜,其内是处于不同分裂阶段的卵细胞。卵细胞的胞质着淡蓝色,参考例图,找出各分裂期的形态学特点,找出前期、中期、后期和末期的卵细胞,并依次置于高倍镜下观察。
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高倍镜下观察:
前期:虫卵的胶质膜内只有一个圆形的卵细胞,胞核中的染色质已形成发夹样的染色体,并在核仁、核膜消失后群集于细胞质中。纺锤体明显,其两极有深染的中心体。
中期:纺锤体移至细胞中部,染色体排列于纺锤体中部的赤道面上。
后期:染色体分为均等的两半,并分别向两极的中心体集中,中部的胞膜向内缩窄而呈哑铃状。
末期:胶质膜内的两个子细胞已完全分开,染色体解聚变成小块状的染色质,核仁、核膜相继出现,注意若在一个马蛔虫的子宫切片中,未能察见各期分裂相时,可从别的子宫切面中寻找,直至全部察见为止(图3)。
图3马蛔虫子宫内卵细胞切片
2.教师示教切片
A立方形细胞 甲状腺切片 H.E染色
高倍镜下观察甲状腺滤泡,指针所指的是滤泡壁的滤泡上皮细胞,呈立方形,细胞的长、宽和高几乎相等,细胞核圆形,位于细胞中央,细胞质弱嗜酸性,围绕在核的周围(图4)。 B柱状细胞 小肠切片 H.E染色
高倍镜下观察小肠绒毛,可见绒毛表面整齐地排着一层柱状上皮。指针所指的是一个柱状细胞,细胞的高度大于宽度,呈柱状,细胞质弱嗜酸性.细胞核椭圆形,位于细胞近基部。由于细胞排列紧密,且细胞膜极薄,细胞界限不清,可从两核之间划一分界线,即可显示细胞的柱状形态(图5)。
C星状有突起细胞(神经元) 脊髓切片 硫堇染色
高倍镜下观察脊髓灰质的腹角,指针所指的是脊髓运动神经细胞,细胞呈星状,从胞体向外周伸出数个突起,胞体中央有一大而圆的细胞核,核内有较大的核仁(图6)。 D梭形的平滑肌细胞 平滑肌分离装片
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高倍镜下观察单个平滑肌细胞,可见平滑肌细胞(肌纤维)呈长梭形,两端尖细,中部略宽,胞质红染,内有一深蓝色杆状或长椭圆形的细胞核(图7)。
图4甲状腺切片 图5小肠肠绒毛切片
图6 神经元 图7 平滑肌纵切片
3.观察电镜幻灯片和图片
结合功能,了解细胞膜、各种细胞器和细胞核的亚微结构。
四、作业
1.绘制一个原始卵泡中的卵母细胞的形态结构高倍镜图。 2.绘制一个脊神经节细胞,示高尔基复合体高倍镜图。
五、思考题
1.粗、细调节旋钮使物镜上下移动还是使载物台上下移动?
2.若用低倍镜能看到切片内容,但用高倍镜看不到,应考虑那些原因? 3.一般而言,细胞哪些部分嗜碱性,哪些部分嗜酸性?为什么?
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实验二 上皮组织
一、目的与要求
1.掌握各种类型被覆上皮的形态结构。
2.了解外分泌腺中几种腺上皮细胞的形态结构特点。 3.了解上皮细胞各个面的特化结构。
二、材料
LEICA生物显微镜、小肠横切片、气管横切片、食管横切片。
三、内容和方法
1.学生观察切片
(1)单层柱状上皮 小肠横切片 H.E染色
肉眼观察:小肠横切面一般呈圆形或椭圆形,中央的空腔为肠腔,周围紫红色的部分为肠壁。
低倍镜观察:可见肠壁腔面有许多突起的小肠绒毛,选择一个结构清晰的小肠绒毛进一步详细观察。
高倍镜观察:小肠绒毛表面由单层柱状上皮构成。上皮细胞的胞质嗜酸性,细胞核椭圆形,嗜碱性且着色较深,位于细胞近基部。转动细调节螺旋可见上皮的游离面有一条亮红色粗线样的结构即纹状缘,它是由微绒毛密集而成的。上皮的基底面与结缔组织交界处有着色较深的基膜,在局部的上皮细胞之间,夹有单个呈空泡样的杯状细胞,属于单细胞腺,分泌粘液。杯状细胞的顶部因含大量粘原颗粒而膨大成杯状,由于粘原颗粒不着色(或着淡蓝色)而呈空泡状。细胞的基部较小,内含不规则或新月状的细胞核(图8)。 (2)假复层柱状纤毛上皮 气管横切片 H.E染色
肉眼观察:气管横切面呈圆形,管腔较大,腔面平整,管壁中有染成蓝紫色形如“C”字的透明软骨。
低倍镜观察:气管的粘膜层较薄,被覆的是假复层柱状纤毛上皮,选择其中较清晰的部分换高倍镜观察,
高倍镜观察:由于构成上皮的三种细胞高低不一,故上皮中细胞核的位置亦高低不平。大致可排成三层。表层的细胞核呈椭圆形,较大,着色较淡的是高柱状细胞的核,中间层细胞的核呈较小的椭圆形,着色较深,是梭形细胞的核;最深层的核呈圆形,着色最深,是锥形细胞的核。三种细胞同位于基膜上,实属单层上皮。注意高柱状细胞的游离面有纤毛。在有的部位上皮细胞间也见到空泡样的杯状细胞。上皮的基底面与结缔组织之间有较明显的基膜(图9)。
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