含盐水溶液 ②醇及含水醇 ③含水丙酮,甲醇-氯仿 3.利用酸性强弱,采用pH梯度萃取法
混合物溶于有机溶剂,依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH萃取,相应黄酮类化合物洗脱顺序羧基®7,4’-二羟基®7或4’羟基®一般酚羟基®5-羟基黄酮
第三节 黄酮类化合物的检识与结构测定
目前主要采用的方法有:①与标准品或与文献对照PPC或TLC得到的Rf或hRf值(Rf´100)
②分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、碱或金属盐类试剂后得到UV光谱 ③1H-NMR ④13C-NMR ⑤MS 一、层析在黄酮类鉴定中的作用 1. 纸层析(PPC)
苷类成分可采用双向展开,第一相展开采用醇性溶剂,如BAW系统(正丁醇:醋酸:水4:1:5上层);第二相展开用水性溶剂,如氯仿:醋酸:水(3:6:1);苷元则多采用醇性溶剂。花色苷及其苷元,可用含盐酸或醋酸的溶剂。 2. 薄层层析(TLC)
1)硅胶薄层:用于弱极性黄酮较好。 常用甲苯:甲酸甲酯:甲酸(5:4:1);苯:甲醇(95:5)或苯:甲醇:冰醋酸(35:5:5)等
2)聚酰胺层析:适用范围广,可分离含游离酚羟基或其苷类。 常用展开系统:乙醇:水(3:2);丙酮:水(1:1)等。
显色剂:紫外光;2%三氯化铝甲醇液; 1tCl3 / 1%K3Fe(CN)6(1:1)混合液。 二、紫外光谱在黄酮类鉴定中的应用
1. 多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成: 1)带I在300-400nm区间,由B环桂皮酰系统 的电子跃迁所引起;
2)带II在240-285nm区间,由A环苯甲酰系 统的电子跃迁所引起。
2.加入诊断试剂后引起的位移及结构测