离体家兔肠肌运动

一、摘要 支配肠道平滑肌的神经有内在神经系统和外来神经系统两大部分，离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用，因此有自动节律性收缩的特性。内在神经系统在调解胃肠运动和分泌以及胃肠血流中起重要作用。平滑肌对某些化学物质（如：酸、碱等）及消化道神经释放的递质的刺激具有较强的敏感性。小肠平滑肌的电活动有快波和慢波两种基本形式。慢波是平滑肌本身所具有的自发的缓慢电变化，是一种肌源性的电活动，不依赖植物神经系统的支配，慢波的存在是使平滑肌保持一种起步的机能状态。

二、关键词 收缩性、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠、盐酸、室温、缺空气

三、引言 本文在肠段表面依次给予0.01%乙酰胆碱（Ach）、0.01%肾上腺素(E)、1mol/L

NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液、缺氧等因素刺激，观察、记录其对小肠收缩情况的影响，为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响，提供理论依据。

四、材料和方法

1、材料：家兔；麦氏浴槽、超级恒温箱、张力换能器、生物信号采集处理系统；25℃、38℃台式溶液、0.01%乙酰胆碱、0.01%肾上腺素、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。 2、方法

2.1实验装置准备和仪器参数设置 在麦氏浴槽中加固定量的（10-15ml）台氏液，调节超级恒温箱的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在38℃左右。用螺旋夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。换能器输出线连接微机生物信号采集处理系统，仪器参数：RM6240系统，点击“实验”菜单中的“肠肌记录”，通道时间常数为直流，滤波频率30Hz，速度为25ms。

2.2家兔离体肠肌标本制备 取家兔一只，用木槌击其头部至晕，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后在离回盲部1cm处剪断，取出回肠10cm左右一段，置于冰冷的氧饱和的台氏液培养皿中，用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成1-2cm数小段,换以新鲜台氏液备用。取小肠肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。注意保持肠道通畅，勿使其封闭。

2.3标本固定 肠管一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入38℃麦氏浴槽中，再将肠管另一端系结在张力换能器的悬梁壁上，调节肌张力。 2.4实验内容

2.4.1 灌流溶液定容 离体回肠在麦氏浴槽中稳定10-30min后，记录一段正常张力曲线后加入0.01%乙酰胆碱2滴，观察并记录其张力曲线。待张力曲线稳定（2-3min）后换液冲洗至张力恢复用药前的水平。

2.4.2 张力恢复用药前的水平后按上述步骤分别给予0.01%肾上腺素(E)、NaOH、HCl各2滴，观察并记录张力曲线的变化。

2.4.3 在麦氏浴槽中换上室温下的台氏液，观察并记录其张力曲线。待张力曲线稳定（2-3min）后换液冲洗至张力恢复用药前的水平。

2.4.4缺空气 夹紧通气管道螺旋夹，断绝离体肠肌氧气供给，观察张力曲线变换并使其稳定。

【结果】

正常： 乙酰胆碱：

肾上腺素：

盐酸：

氢氧化钠：

室温：

缺空气：

【讨论】

1.正常状态下，小肠舒缩迟缓，一次舒缩过程可达20s左右，富有伸展性，保持一种微弱的持续收缩状态，同时具有节律性收缩。

2.胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势，加入乙酰胆碱能激动M受体，使得两类通道开放：一类是电位敏感性钙离子专用通道；另一类为特异性受体活化钙离子专用通道。前一类对乙酰胆碱敏感，小剂量即可引起开放，后一类则相对不是很敏感，需大剂量才开放。这两类通道开放都使得肌浆中钙离子增高，进而激活肌纤维蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使得平滑肌收缩，肌张力增加。所以滴加0.01%乙酰胆碱刺激离体肠肌时，其张力曲线立即上升，且频率加快。

3.肠道平滑肌上存在肾上腺素能受体包括α受体和β受体，前者分为抑制性受体和兴奋性受体，肾上腺素作用于抑制性受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活动活化，使钾离子外流增加，细胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降，同时肾上腺素还作用于β受体，它的激活引起肠肌细胞膜的cAMP合成增多，激活了肠肌及肌浆网钙离子泵活动，使得肌浆中钙离子浓度降低使肌张力下降。β受体激活后促使钾离子及钙离子外流增加，加速膜的超级

化，使得肌张力曲线降低。

4．加入1mol/L HCl后，氢离子浓度升高，可反射性抑制肠道平滑肌运动。其主要机制：①细胞外[H+]升高时,Ca2+通道的活性受到抑制,使得Ca2+内流减少,使肠肌兴奋性降低,收缩频率下降。②同时使肌浆网[H+]上升,可与钙离子竞争钙调蛋白的结合位点，从而使得肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纤维对钙离子的敏感性和钙离子从肌质网的释放量减少，Ca2+与肌钙蛋白结合下降,进而使收缩幅度下降，③氢离子可以增加钙离子和钙结合蛋白的亲和力，从而使肌浆网中钙离子不足，进而引起收缩幅度下降。

5．加入1mol/LnaOH后，中和了液体中的氢离子，使氢离子浓度下降，对钙通道的活性抑制减弱，使钙离子内流增多，肠肌收缩加强。所以加入1mol/LNaOH后，肠段张力曲线上升,振幅减小，频率加快。

6．将38℃的台氏液的温度调成25℃，温度下降，温度降低影响了各种酶的活性特别是有氧呼吸相关的酶类，尤其是横桥的ATP酶，该酶的活性降低，ATP生产减少，用于竖立上次收缩时发生扭动的横桥的ATP减少，从而影响了肌纤维的收缩，最后使肠肌的运动受到抑制。 7．当对肠段停止通气时,肠段处于缺氧状态,有氧呼吸受影响，ATP产生减少，同第6点类似ATP的减少会影响肌纤维的横桥竖立等情况，进而会抑制肠肌的运动。

【结论】

0.01%乙酰胆碱、NaOH能促进肠肌的运动，而0.01%肾上腺素、HCl、室温20摄氏度的台氏液、缺氧等因素则抑制肠肌的运动。

【参考文献】

1.机能学实验教程 陆源，林国华，杨午鸣主编 第二版——北京：科学出版社 2010.6 2.朱大年，主编。生理学。第七版。北京：人民卫生出版社，2011。