实验室风险评估报告
常州市金坛区疾病预防控制中心
一、 依据
依据《中华人民共和国传染病防治法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《江苏省病原微生物实验室生物安全管理规定(试行)》、《人间传染的病原微生物名录》及GB19489-2008《实验室生物安全通用要求》和中国合格评定国家认可委员会（以下简称CNAS）实验室生物安全认可规则和相关政策的规定。
二、 目的
为加强病原体微生物实验室（以下简称实验室）生物安全管理，保护实验室人员和公众健康。
三、 评价范围
常州市金坛区疾病预防控制中心（二级生物安全实验室、艾滋病初筛实验室和PCR实验室）
四、 实验室简介
常州市金坛区疾病预防控制中心病原微生物实验室由二级生物安全实验室、艾滋病初筛实验室、PCR实验室、千级净化实验室、寄生虫病诊断实验室和三个常规微生物实验室组成，承担着辖区内生活饮用水、涉水产品、公共场所、医院消毒监测、托幼机构卫生监测、食品及相关产品的常规微生物学检测、辖区内突发性公共卫生事件相关标本的病原学检测、肠道传染病相关致病因子监测、食源性寄生虫病的相关标本以及HIV相关标本的筛查等检验检测工作。多年来实验室本着客观公正、实事求是的态度，为社会提供及时和可靠的检测数据。
五、 生物危害等级及生物实验室等级
1 实验室生物危害识别
参照国家《病原微生物实验室生物安全管理条例》中分类和管理要求，国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类：
1) 第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。
2) 第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。 3) 第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。 4) 第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。
备注：第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。 2 生物实验室可以分为以下4级： 1) BSL-1基础实验室： 一级生物安全水平 2) BSL-2基础实验室： 二级生物安全水平 3) BSL-3防护实验室： 三级生物安全水平 4) BSL-4最高防护实验室：四级生物安全水平 3 生物危害风险评估的内容
进行微生物危险度评估最有用的工具之一就是列出微生物的危险度等级。然而对于一个特定的微生物来讲，在进行危险度评估时仅仅参考其危险度等级是远远不够的，适当时应当考虑以下因素，包括： 1) 微生物的致病性和感染数量； 2) 暴露的潜在后果； 3) 自然感染途径；
4) 实验室操作所致的其他感染途径（非消化道途径、空气传播、食入）； 5) 微生物在环境中的稳定性；
6) 所操作微生物的浓度和浓缩标本的容量； 7) 适宜宿主（人或动物）的存在；
8) 从动物研究和实验室感染报告或临床报告中得到的信息； 9) 计划进行的实验室操作（如超声处理、气溶胶化、离心等）； 10)
是否能进行有效的预防或治疗干预。
4 生物危害风险评估涉及的生物因子
按《人间传染的病原微生物名录》，实验室所接触的生物危害的生物因子见下表：
中文学名 霍乱弧菌 国际通用学名 Vibrio cholerae 危害级别 第2类 防护级别 BSL-2 沙门氏菌 Salmonella spp 第3类 BSL-2 志贺氏菌 Shigella spp 第3类 BSL-2 蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus 第3类 BSL-2 致泻性大肠埃希氏菌 Pathogenic Escherichia coli 第3类 BSL-2 铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 第3类 BSL-2 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 第3类 BSL-2 空肠弯曲菌 Campylobacter jejuni 第3类 BSL-2 单核细胞增生李斯特菌 Listeria monocytogenes 第3类 BSL-2 变形杆菌（普通/奇异） Proteus vulgaris/Proteus mirabilis 第3类 BSL-2 小肠结肠炎耶尔森菌 Yersinia enterocolitica 第3类 BSL-2 肉毒梭菌 Clostridium botulinum 第3类 BSL-2 产气荚膜梭菌 Clostridium perfringens 第3类 BSL-2 类志贺气单胞菌 Plesiomonas shigelloides 第3类 BSL-2 溶血性链球菌 Streptococcus spp 第3类 BSL-2 副溶血性弧菌 Vibrio Parahemolyticus 第3类 BSL-2 艾滋病毒 Human immunodeficiency virus 第2类 BSL-2 六、 生物因子风险分析列表
详见：附表1：《实验室风险评估报告表》
七、 风险评价结论
经评定常州市金坛区疾病预防控制中心（二级生物安全实验室、HIV实验室和PCR实验室）安全水平满足二级生物安全基础实验室要求。
风险评价人（职务：实验室安全负责人）：日期： 2016年9月20日
评价报告核准（职务：实验室负责人）： 日期： 2016年 9月20日
附表1： 实验室风险评估报告表
序号 生物因子 危险源描述 风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 1、主要来源：腹泻病人“米泔水样”大便或呕吐物； 2、传染性及传播途径：传播途径主要是通过污染的水源或未煮熟的食物如水产品、蔬菜经口摄入； 3、易感性：在正常胃酸条件下，如以水为载体，需饮入大于1010个细菌方能引起感染；如以食物作为载体，由于食物高强度的缓冲能力，感染剂量可减少到102～104个细菌。任何能降低胃中酸度的药物或其他原因，都可使人对霍乱弧菌感染的敏感性增加； 1 霍乱弧菌 4、潜伏期及症状：仅有1-5日，甚至只有几个小时，腹泻，腹痛； 5、对环境敏感性：霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱，EL-Tor生物型抵抗力较强，在河水、井水、海水中可存活1～3周，在鲜鱼，贝壳类食物上存活1～2周。霍乱弧菌对热，干燥，日光，化学消毒剂和酸均很敏感，耐低温，耐碱。湿热55℃，15分钟，100℃，1～2分钟，水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。0.1%高锰酸钾浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。在正常胃酸中仅生存4分钟； 人员感染 第2类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 1、主要来源：患者与带菌动物以及被污染的食品 2、传播途径：经口传播 3、易感性：免疫力低下者普遍易感 4、潜伏期及症状：自然感染的为八至二十天，平均十四风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 2 沙门氏菌 5、对环境敏感性：在水中不易繁殖，但可生存2-3周，冰箱中可生存3-4个月，在自然环境的粪便中可存活1-2个月。沙门氏菌最适繁殖温度为37℃，在20℃以上即能大量繁殖。对热抵抗力不强，在60℃15分钟可被杀死。在水中存活2～3周。在5%的石炭酸中，5分钟死亡。 1、主要来源：腹泻患者以及被污染的食品 2、传播途径：经口传播 3、易感性：免疫力低下者普遍易感 4、潜伏期及症状：一般10-14h，腹泻，腹痛 天，腹泻，腹痛 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 3 志贺氏菌 杆菌为弱。对酸敏感，在外界环境中的抵抗力能以宋内氏菌最强，福氏菌次之，志贺氏菌最弱。一般56～60℃经10分钟即被杀死。在37℃水中存活20天，在冰块中存活96天，蝇肠内可存活9～10天，对化学消毒剂敏感，1%石碳酸15～30分钟死亡。 5、对环境敏感性：本菌对理化因素的抵抗力较其他肠道人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 1、主要来源：腐败变质的剩饭、剩菜以及被污染的食品 2、传播途径：经口传播 3、易感性：免疫力低下者普遍易感 4、潜伏期及症状：潜伏期长短不一，如摄入活菌为主，约为食后6～14h。骤起腹痛、腹泻、水样便，恶心，呕吐较少，少数患者有发热。如摄入细菌毒素为主者，潜伏期较短，1～5h，甚至可短到数十分钟，以呕吐为主，伴风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 4 蜡样芽胞杆菌 有腹痛。少数继以腹泻，无明显发热。多为自限性，持续4～24h恢复。 5、对环境敏感性：兼性好氧。生长温度范围20～45℃，10℃以下生长缓慢或不生长。存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处。在葡萄糖肉汤中厌氧培养产酸，从阿拉伯糖、甘露醇、木糖不产酸，分解碳水化合物不产气。大多数菌株还原硝酸盐，50℃时不生长。在100℃下加热20min可破坏这类菌。 1、主要来源：被污染的食品、水以及病人的粪便 2、传播途径：经口传播 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 5 致泻性 大肠埃希氏菌 3、易感性：免疫力低下者普遍易感 4、潜伏期及症状：不同的致泻性大肠埃希菌引起的中毒，症状各不相同。①产肠毒素性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是水样腹泻、腹痛、恶心、低热。每天腹泻可达8～人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 12次。②肠道侵袭性大肠埃希菌的中毒症状与志贺菌引起的痢疾相似，发热、剧烈腹痛、水样腹泻、粪便中有少量粘液和血。③肠道致病性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是发热、不适、呕吐、腹泻、粪便中有大量粘液但无血，有约20%患者由呼吸道症状，感染的症状通常比较严重。④肠集聚性黏附性大肠埃希菌引起的中毒症状成年人表现为中度腹泻，病程1～2天。婴幼儿多表现为2周以上的持续性腹泻。⑤肠出血性大肠埃希菌引起的中毒，一般3～10天发病，常有突发性的腹部痉挛，有时类似于阑尾炎的疼痛。有的病人只有轻度腹泻；有些病人由水样便，转为血性腹泻，腹泻次数有时可达10多次，低热或不发热；许多病人同时有呼吸道症状。 5、对环境敏感性：该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更久。 1、主要来源：存在于土壤、尘埃、水和少数人体肠道中 2、传播途径：接触感染，条件致病菌 风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 6 铜绿假单胞菌 3、易感性：免疫力低下者普遍易感，常发生在持续潮湿的损害部位 4、潜伏期及症状：潜伏期长短不一，主要感染组织皮肤人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 破埙部位。 危险源描述 风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 5、对环境敏感性：本菌对化学药物的抵抗力比一般革兰氏阴性菌强大。1：2000的洗必泰，度米芬和新洁尔灭，1：5000的消毒净在5分钟内均可将其杀死。0.5-1%醋酸也可迅速使其死亡。 1、主要来源：存在于土壤、尘埃、水和少数人体肠道中 2、传播途径：接触感染，条件致病菌 3、易感性：免疫力低下者普遍易感，尤其以长期使用抗生素引起菌群失调者为主 4、潜伏期及症状：潜伏期长短不一，中毒症状严重，主要表现为呕吐、发热、腹泻。呕吐常在发热前出现，发热7 金黄色葡萄球菌 很高。 5、对环境敏感性：本菌金黄色葡萄球菌对热和干燥的抵抗力较一般无芽胞细菌强，加热80℃30分钟才被杀死。 物体表面覆盖一层0.1mg/cm浓度的超细tio2在光照条件下可快速有效杀灭。在干燥的脓汁、痰液中可存活2～3月。5%石炭酸中10～15分钟死亡。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 3人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 1、主要来源：被污染的水和食品 2、传播途径：接触感染， 3、易感性：免疫力低下者普遍易感， 风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 8 空肠弯曲菌 4、潜伏期及症状：一般为3～5天，对人的致病部位是空肠、回肠及结肠。主要症状为腹泻和腹痛，有时发热，偶有呕吐和脱水。 5、对环境敏感性：空肠弯曲菌抵抗力不强，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，56℃5分钟可被杀死。 1、主要来源：被污染的食品 2、传播途径：经口感染， 3、易感性：新生儿、孕妇、40岁以上的成人，免疫功能缺陷者， 4、潜伏期及症状：在感染后3-70天出现症状，健康成人人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 9 单核细胞增生 李斯特菌 个体出现轻微类似流感症状，新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、抽搐、昏迷、自然流产、脑膜炎、败血症直至死亡。 5、对环境敏感性：该菌对理化因素抵抗力较强，在土壤、粪便、青储饲料和干草内能长期存活，对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20min可杀死，70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌。 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 1、主要来源：被污染的食品 2、传播途径：经口感染， 3、易感性：普遍易感， 4、潜伏期及症状，潜伏期很短，人感染肉毒杆菌后会出现视觉模糊、呼吸困难、肌肉乏力等症状，如病情严重可风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 10 肉毒梭菌 能导致死亡。 5、对环境敏感性：肉毒杆菌芽胞抵抗力很强，干热180摄氏度5-15分钟，湿热100摄氏度5小时，高压蒸气121摄氏度30分钟，才能杀死芽胞。肉毒毒素对酸的抵抗力特别强，胃酸溶液24小时内不能将其破坏，故可被胃肠道吸收，损害身心健康。 1、主要来源：被污染的肉类食品 2、传播途径：经口感染， 3、易感性：普遍易感， 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 11 产气荚膜梭菌 样腹泻；无热、无恶心呕吐。1~2天后自愈 5、对环境敏感性：菌体对普通消毒剂具有一定的抵抗力，该菌生产的肠毒素抵抗弱，加热至60℃ 45min后丧失活性，而100℃瞬时可破坏它的毒性。 4、潜伏期及症状，10小时，临床表现为腹痛、腹胀、水人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 1、主要来源：被污染的鱼类食品 2、传播途径：经口感染， 3、易感性：普遍易感， 风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 12 类志贺气单胞菌 4、潜伏期及症状，潜伏期长短不一，临床表现以腹痛、腹泻为主，大多数腹泻病人为水样便，部分病人发热达37.2～38.5℃。 5、对环境敏感性：对化学消毒剂敏感。 1、主要来源：直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染 2、传播途径：接触、呼吸道感染， 3、易感性：免疫力低下者普遍易感 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 13 溶血性链球菌 4、潜伏期及症状：潜伏期长短不一，常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。 5、对环境敏感性：该菌抵抗力一般不强，60℃30min即被杀死，对常用消毒剂敏感，在干燥尘埃中生存数月。 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 1、主要来源：被污染的海产品以及被感染的病人 2、传播途径：经口感染， 3、易感性：免疫力低下者普遍易感 4、潜伏期及症状：一般14～20小时，短者为3～5小时，长者可达40小时。急性起病，主要表现为上腹部阵发性风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 14 副溶血性弧菌 绞痛、腹泻、呕吐，洗肉水样便，有时脓血便，腹泻每日5～6次，体温一般为37.7～39.5℃。重症者可出现脱水、意识不清、血压下降等。 5、对环境敏感性：在无盐培养基上，不能生长，3%～6%食盐水繁殖迅速，每8～9分钟为1周期，低于0.5%或高于8%盐水中停止生长。在食醋中1～3分钟即死亡，加热56℃5～10分钟灭活，在1%盐酸中5分钟死亡。 1、主要来源：被污染的饮水、食品 2、传播途径：经口感染， 3、易感性：免疫力低下者普遍易感 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 15 变形杆菌 4、潜伏期及症状：进食后2~30小时出现上腹部刀绞样痛和急性腹泻，伴有恶心、呕吐、头痛、发热。病程较短，一般1~3天可恢复 5、对环境敏感性：对热抵抗力不强，加热55℃持续1h可被杀灭 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 序号 生物因子 危险源描述 1、主要来源：被污染的饮水、食品以及被感染的人和动物。 2、传播途径：经口感染， 3、易感性：免疫力低下者普遍易感（婴幼儿为主）， 4、潜伏期及症状：摄食后3-7天，也有报导11天才发病。风险 危害级别 防护级别 是否可以预防和治疗 风险评估 16 小肠结肠炎 耶尔森氏菌 病程一般为1-3天，但有些病例持续5-14天或更长。主要症状表现为发热、腹痛、腹泻、呕吐、关节炎、败血症等 5、对环境敏感性：本菌具有“嗜冷性”，在水中和低温下（4℃）能生长，为肠道中能在4℃生长繁殖的少数细菌之一。本菌可产生耐热肠毒素，121℃30分钟不被破坏，对酸碱稳定，pH1～11不失活。 1、主要来源：HIV感染者 2、传播途径：性接触、母婴、输血感染， 3、易感性：免疫力低下者普遍易感， 人员感染 第3类 BSL-2 可以预防和治疗 可接受；不可接受 17 艾滋病毒 4、潜伏期及症状：一般为6-10年，破坏人体的细胞免疫和体液免疫，致使机体免疫力下降，并导致并发症。 5、对环境敏感性：在体外生存能力极差，不耐高温，对热敏感，在56℃条件下30分钟即失去活性，且病毒在离开体外的瞬间失去传染性。 人员感染 第2类 BSL-2 可以预防 可接受；不可接受