基因工程自测题 下载本文

您的答案:

点评:理解 Southern blotting 的工作原理。

选择题问题: Southern blotting 与 Northern blotting 的区别在于() 参考答案: A 印记的对象不同,前者是对 DNA ,后者是对 RNA 您的答案:

点评:Southern blotting 是针对 DNA 的检测手段。 Northern blotting 是针对 RNA 的检测手段, Western blotting 是针对蛋白质的检测手段。

选择题问题: 切口平移是指在()的作用下,使()带上放射性标记 参考答案: B DNA 聚合酶 Ⅰ , DNA 您的答案:

点评:掌握探针标记的方法。

选择题问题: 用免疫化学法筛选重组体的原理是() 参考答案: A 根据外源基因的表达 您的答案:

点评:免疫化学法筛选使用的是蛋白质的抗原抗体反应。 选择题问题: 以下不属于核酸探针的是() 参考答案: D 抗体 您的答案:

点评:抗体为蛋白质探针,用于 Western blotting 。

第五章 PCR技术与原理

填空题问题: PCR 是()的简称。 PCR 反应体系的基本要素有(),(),(),()等。 参考答案: polymerase chain reaction;模板;引物;dNTP;DNA 聚合酶 您的答案:

填空题问题: PCR 反应过程分为三个步骤,即(),()和()。 参考答案: 变性;复性;延伸 您的答案:

填空题问题: 在 PCR 反应体系中, Taq polymerase 的合成速率取决于(),(),dNTP 的浓度,(),()等。

参考答案: 温度;Mg2+ 浓度;去污剂;模板的二级结构 您的答案:

填空题问题: PCR 反应体系中往往要加入适量的矿物油,其作用是()。 参考答案: 防止反应液挥发 您的答案:

填空题问题: PCR反应过程的最适温度仅与()有关,其定义是指()。 参考答案: 模板Tm值;使DNA双链离解一半时温度称为解链温度(Tm) 您的答案:

填空题问题: 具有 reading proof 功能的高温 polymerase 有(),(),(),()等。 参考答案: Vent;Pwo;Pfu;Tth 您的答案:

填空题问题: 一般常规的 PCR 仅能扩增()kb 以下的 DNA 片段。 参考答案: 1kb 您的答案:

填空题问题: PCR 的标准缓冲液含()mmol/L KCl,()mmol/L Tirs.HCl,()mmol/L MgCl2。

参考答案: 1.5;10~50;1.5 您的答案:

填空题问题: A/T cloning 是利用()。

参考答案: Taq 酶扩增的产物一般要在 3' 末端加一个核苷酸且通常为 A 的性质 您的答案:

填空题问题: 随机引物(Random primer)是指()

参考答案: 即随机 DNA 六聚体,该六聚体能够结合在单链 DNA 上,并在合适的酶作用下,作为互补链合成的引物。 您的答案:

填空题问题: PCR 定点诱变可分为三类,包括()、()和()。 参考答案: 同源重组法;DpnⅠ 法;重叠延伸法 您的答案:

填空题问题: 通用引物(universal primer)是指()。 参考答案: 根据载体多克隆两端序列设计的一段引物序列 您的答案:

填空题问题: Inverse PCR 是指()。

参考答案: 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列的一项 PCR 技术。

您的答案:

填空题问题: PCR 介导的诱变包括()和 PCR 定点诱变。 参考答案: PCR 随机突变 您的答案:

填空题问题: 在简并引物的设计中,常常要用到 dI(次黄嘌呤),其原因是()。 参考答案: 次黄嘌呤可以和任何碱基配对 您的答案:

填空题问题: 热起始是一种在 PCR 反应中优化目标扩增产物的方法,它可抑制()扩增。 参考答案: 非特异性 您的答案:

选择题问题: 聚合酶链反应可表示为() 参考答案: D PCR 您的答案:

点评:聚合酶链反应,英文全称为 Polymerase Chain Reaction 缩写为 PCR 。 选择题问题: 催化聚合酶链反应的酶是() 参考答案: D Taq DNA 聚合酶 您的答案:

点评:Taq DNA 聚合酶耐高温。

选择题问题: 以下各项中不是 PCR 反应所必须的是() 参考答案: D 甘油 您的答案:

点评:甘油可以增加引物与 DNA 链的结合,但不是必需的。

选择题问题: 关于 PCR 技术的叙述,下列哪项是错误的?()。 参考答案: B 利用 PCR 技术可完全无误地扩增基因 您的答案:

点评:PCR 反应可能导致错配。

选择题问题: 有关 PCR 的描述下列哪项不正确:() 参考答案: C 扩增的对象是氨基酸序列 您的答案:

点评:理解 PCR 反应的工作原理。

选择题问题: 以下关于简并引物的描述中,正确的是()

参考答案: B 简并引物是根据已知蛋白质的氨基酸序列设计的引物群 您的答案:

点评:简并指三联体密码的第三位碱基具有一定的摆动性。

选择题问题: 以下对 PCR 出现平台效应原因的描述中不正确的是() 参考答案: D 退火温度过高 您的答案:

点评:平台效应是 PCR 反应后期,产物的积累按减弱的指数速率增长。

选择题问题: PCR 扩增有时会出现弥散的条带,以下原因阐述不正确的是() 参考答案: B 退火温度过高 您的答案:

点评:退火温度过低、 dNTP 浓度过高、循环次数过多都会引起非特异性扩增,导致出现弥散的条带。 选择题问题: 以下不属于 PCR 介导的克隆的为() 参考答案: D DpnⅠ 法 您的答案:

点评:DpnI 法是 PCR 介导的诱变方法。

选择题问题: 以下不属于 PCR 介导的诱变的为() 参考答案: B SOE 重叠延伸剪接法 您的答案:

点评:SOE 重叠延伸剪接法是 PCR 介导的定点连接。 选择题问题: 以下不属于 PCR 的应用的为() 参考答案: D S1 酶作图 您的答案:

点评:S1 酶作图是用来 RNA 端点分析的,与 PCR 无关。

选择题问题: 设计聚合酶链反应的引物时,应考虑引物与模板的() 参考答案: C 3' 端特定序列互补 您的答案:

点评:如果 3' 端不互补,则无法进行顺利的扩增。 您做对了0个

简答题问题: PCR 技术的原理是什么?从大的方面讲, PCR 技术可用于哪些领域?

参考答案: PCR 技术是一种 DNA 扩增技术。它通过温度的变化使得双链 DNA 解链、退火、延伸。通过多次这样的循环,模板 DNA 就可以按几何级数速度扩增。应用于分子生物学和基因工程及其他与 DNA 鉴定相关的领域。 您的答案:

第六章 DNA序列分析

填空题问题: ()年,()创立了测定 DNA 序列双脱氧终止法;同年, Maxam 和 Gilbert 发展了()。

参考答案: 1977;Sanger;化学降解测序法 您的答案:

填空题问题: ddNTP 与普通的 dNTP 的不同之处在于 ddNTP(),它们可以在 DNA 聚合酶的作用下,

通过其()掺入到正在增长的 DNA 链中,因()导致链延伸反应终止。

参考答案: 在脱氧核糖的 3' 位置缺少一个羟基; 5' 三磷酸基团,没有 3' 羟基,不能同后续的 dNTP 形成磷酸二酯键 您的答案:

填空题问题: 在开始测序前,必须根据待测序列区的长度,所要求的测序精确度以及现有的设施来制定测序总策略。根据测序的目的,通常可将测序分为()和()。 参考答案: 定向测序;随机测序 您的答案: 填空题问题: 常用的双脱氧终止法测定 DNA 序列,其长度一般不会超过 1Kb ,因此进行大分子 DNA 测序时,需(),常用的方法有()、()和()。

参考答案: 打断大段目标 DNA ,生成大小适合测序的小片断 DNA ;限制酶消化;超声处理;在 Mn2+ 存在下用胰 DNA 酶Ⅰ消化 您的答案:

填空题问题: 化学降解法进行 DNA 测序的原理是()。

参考答案: 特定化学试剂可对碱基进行特异性修饰,在修饰碱基处(5' 或 3')打断磷酸二酯键 您的答案:

填空题问题: 在 DNA 测序中, Primer walking 的定义是()。

参考答案: 从目的片段的一端开始,利用载体上的序列为依据,设计第一次反应的引物进行测序,然后,依次根据前一次测序结果,设计下一次反应引物,递进测序,直至完成。 您的答案:

选择题问题: 有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法的基本原理/优点是()

参考答案: C 一个合成引物的延伸和 DNA 修复合成的可靠终止 您的答案:

点评:理解两种测序方法的原理。

选择题问题: 有关 DNA 序列自动化测定的不正确叙述是() 参考答案: D 不再需要引物 您的答案:

点评:DNA 序列自动化测定与酶学序列分析法(Sanger)的原理是一样的,只是在标记物和检测手段上作了改进。

选择题问题: 在 DNA 测序的化学裂解法中需要() 参考答案: B 用同位素或荧光标记 DNA 5'端 您的答案:

点评:理解 DNA 测序的化学裂解法的原理。

第七章 定点突变

填空题问题: 基因突变(Gene mutation)的类型有(),(),()等。

参考答案: 简单的插入或缺失;单个碱基的置换;系统的缺失、插入或成串碱基的置换 您的答案:

填空题问题: dut- 是指(),细胞不能把 dUTP 转化为 dUMP 。 ung- 是指()。 参考答案: dUTP 酶缺陷;UDG 酶缺陷 您的答案:

填空题问题: 利用 PCR 技术介导的定点诱变(Site-directed mutagenesis)。较常用的方法一般有三种即(),()和()。

参考答案: 同源重组法;DpnⅠ 法;重叠延伸