您的答案：
点评：理解 Southern blotting 的工作原理。
选择题问题： Southern blotting 与 Northern blotting 的区别在于（） 参考答案： A 印记的对象不同，前者是对 DNA ，后者是对 RNA 您的答案：
点评：Southern blotting 是针对 DNA 的检测手段。 Northern blotting 是针对 RNA 的检测手段， Western blotting 是针对蛋白质的检测手段。
选择题问题： 切口平移是指在（）的作用下，使（）带上放射性标记 参考答案： B DNA 聚合酶 Ⅰ ， DNA 您的答案：
点评：掌握探针标记的方法。
选择题问题： 用免疫化学法筛选重组体的原理是（） 参考答案： A 根据外源基因的表达 您的答案：
点评：免疫化学法筛选使用的是蛋白质的抗原抗体反应。 选择题问题： 以下不属于核酸探针的是（） 参考答案： D 抗体 您的答案：
点评：抗体为蛋白质探针，用于 Western blotting 。
第五章 PCR技术与原理
填空题问题： PCR 是（）的简称。 PCR 反应体系的基本要素有（），（），（），（）等。 参考答案： polymerase chain reaction；模板；引物；dNTP；DNA 聚合酶 您的答案：
填空题问题： PCR 反应过程分为三个步骤，即（），（）和（）。 参考答案： 变性；复性；延伸 您的答案：
填空题问题： 在 PCR 反应体系中， Taq polymerase 的合成速率取决于（），（），dNTP 的浓度，（），（）等。
参考答案： 温度；Mg2+ 浓度；去污剂；模板的二级结构 您的答案：
填空题问题： PCR 反应体系中往往要加入适量的矿物油，其作用是（）。 参考答案： 防止反应液挥发 您的答案：
填空题问题： PCR反应过程的最适温度仅与（）有关，其定义是指（）。 参考答案： 模板Tm值；使DNA双链离解一半时温度称为解链温度（Tm） 您的答案：
填空题问题： 具有 reading proof 功能的高温 polymerase 有（），（），（），（）等。 参考答案： Vent；Pwo；Pfu；Tth 您的答案：
填空题问题： 一般常规的 PCR 仅能扩增（）kb 以下的 DNA 片段。 参考答案： 1kb 您的答案：
填空题问题： PCR 的标准缓冲液含（）mmol/L KCl，（）mmol/L Tirs.HCl，（）mmol/L MgCl2。
参考答案： 1.5；10～50；1.5 您的答案：
填空题问题： A/T cloning 是利用（）。
参考答案： Taq 酶扩增的产物一般要在 3' 末端加一个核苷酸且通常为 A 的性质 您的答案：
填空题问题： 随机引物（Random primer）是指（）
参考答案： 即随机 DNA 六聚体，该六聚体能够结合在单链 DNA 上，并在合适的酶作用下，作为互补链合成的引物。 您的答案：
填空题问题： PCR 定点诱变可分为三类，包括（）、（）和（）。 参考答案： 同源重组法；DpnⅠ 法；重叠延伸法 您的答案：
填空题问题： 通用引物（universal primer）是指（）。 参考答案： 根据载体多克隆两端序列设计的一段引物序列 您的答案：
填空题问题： Inverse PCR 是指（）。
参考答案： 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列的一项 PCR 技术。
您的答案：
填空题问题： PCR 介导的诱变包括（）和 PCR 定点诱变。 参考答案： PCR 随机突变 您的答案：
填空题问题： 在简并引物的设计中，常常要用到 dI（次黄嘌呤），其原因是（）。 参考答案： 次黄嘌呤可以和任何碱基配对 您的答案：
填空题问题： 热起始是一种在 PCR 反应中优化目标扩增产物的方法，它可抑制（）扩增。 参考答案： 非特异性 您的答案：
选择题问题： 聚合酶链反应可表示为（） 参考答案： D PCR 您的答案：
点评：聚合酶链反应，英文全称为 Polymerase Chain Reaction 缩写为 PCR 。 选择题问题： 催化聚合酶链反应的酶是（） 参考答案： D Taq DNA 聚合酶 您的答案：
点评：Taq DNA 聚合酶耐高温。
选择题问题： 以下各项中不是 PCR 反应所必须的是（） 参考答案： D 甘油 您的答案：
点评：甘油可以增加引物与 DNA 链的结合，但不是必需的。
选择题问题： 关于 PCR 技术的叙述，下列哪项是错误的？（）。 参考答案： B 利用 PCR 技术可完全无误地扩增基因 您的答案：
点评：PCR 反应可能导致错配。
选择题问题： 有关 PCR 的描述下列哪项不正确：（） 参考答案： C 扩增的对象是氨基酸序列 您的答案：
点评：理解 PCR 反应的工作原理。
选择题问题： 以下关于简并引物的描述中，正确的是（）
参考答案： B 简并引物是根据已知蛋白质的氨基酸序列设计的引物群 您的答案：
点评：简并指三联体密码的第三位碱基具有一定的摆动性。
选择题问题： 以下对 PCR 出现平台效应原因的描述中不正确的是（） 参考答案： D 退火温度过高 您的答案：
点评：平台效应是 PCR 反应后期，产物的积累按减弱的指数速率增长。
选择题问题： PCR 扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（） 参考答案： B 退火温度过高 您的答案：
点评：退火温度过低、 dNTP 浓度过高、循环次数过多都会引起非特异性扩增，导致出现弥散的条带。 选择题问题： 以下不属于 PCR 介导的克隆的为（） 参考答案： D DpnⅠ 法 您的答案：
点评：DpnI 法是 PCR 介导的诱变方法。
选择题问题： 以下不属于 PCR 介导的诱变的为（） 参考答案： B SOE 重叠延伸剪接法 您的答案：
点评：SOE 重叠延伸剪接法是 PCR 介导的定点连接。 选择题问题： 以下不属于 PCR 的应用的为（） 参考答案： D S1 酶作图 您的答案：
点评：S1 酶作图是用来 RNA 端点分析的，与 PCR 无关。
选择题问题： 设计聚合酶链反应的引物时，应考虑引物与模板的（） 参考答案： C 3' 端特定序列互补 您的答案：
点评：如果 3' 端不互补，则无法进行顺利的扩增。 您做对了0个
简答题问题： PCR 技术的原理是什么？从大的方面讲， PCR 技术可用于哪些领域？
参考答案： PCR 技术是一种 DNA 扩增技术。它通过温度的变化使得双链 DNA 解链、退火、延伸。通过多次这样的循环，模板 DNA 就可以按几何级数速度扩增。应用于分子生物学和基因工程及其他与 DNA 鉴定相关的领域。 您的答案：
第六章 DNA序列分析
填空题问题： （）年，（）创立了测定 DNA 序列双脱氧终止法；同年， Maxam 和 Gilbert 发展了（）。
参考答案： 1977；Sanger；化学降解测序法 您的答案：
填空题问题： ddNTP 与普通的 dNTP 的不同之处在于 ddNTP（），它们可以在 DNA 聚合酶的作用下，
通过其（）掺入到正在增长的 DNA 链中，因（）导致链延伸反应终止。
参考答案： 在脱氧核糖的 3' 位置缺少一个羟基； 5' 三磷酸基团，没有 3' 羟基，不能同后续的 dNTP 形成磷酸二酯键 您的答案：
填空题问题： 在开始测序前，必须根据待测序列区的长度，所要求的测序精确度以及现有的设施来制定测序总策略。根据测序的目的，通常可将测序分为（）和（）。 参考答案： 定向测序；随机测序 您的答案： 填空题问题： 常用的双脱氧终止法测定 DNA 序列，其长度一般不会超过 1Kb ，因此进行大分子 DNA 测序时，需（），常用的方法有（）、（）和（）。
参考答案： 打断大段目标 DNA ，生成大小适合测序的小片断 DNA ；限制酶消化；超声处理；在 Mn2＋ 存在下用胰 DNA 酶Ⅰ消化 您的答案：
填空题问题： 化学降解法进行 DNA 测序的原理是（）。
参考答案： 特定化学试剂可对碱基进行特异性修饰，在修饰碱基处（5' 或 3'）打断磷酸二酯键 您的答案：
填空题问题： 在 DNA 测序中， Primer walking 的定义是（）。
参考答案： 从目的片段的一端开始，利用载体上的序列为依据，设计第一次反应的引物进行测序，然后，依次根据前一次测序结果，设计下一次反应引物，递进测序，直至完成。 您的答案：
选择题问题： 有两种确定核酸中核苷酸序列的方法：化学序列分析法（Maxam-Glbert）和酶学序列分析法（Sanger）。酶学测序法的基本原理/优点是（）
参考答案： C 一个合成引物的延伸和 DNA 修复合成的可靠终止 您的答案：
点评：理解两种测序方法的原理。
选择题问题： 有关 DNA 序列自动化测定的不正确叙述是（） 参考答案： D 不再需要引物 您的答案：
点评：DNA 序列自动化测定与酶学序列分析法（Sanger）的原理是一样的，只是在标记物和检测手段上作了改进。
选择题问题： 在 DNA 测序的化学裂解法中需要（） 参考答案： B 用同位素或荧光标记 DNA 5'端 您的答案：
点评：理解 DNA 测序的化学裂解法的原理。
第七章 定点突变
填空题问题： 基因突变（Gene mutation）的类型有（），（），（）等。
参考答案： 简单的插入或缺失；单个碱基的置换；系统的缺失、插入或成串碱基的置换 您的答案：
填空题问题： dut- 是指（），细胞不能把 dUTP 转化为 dUMP 。 ung- 是指（）。 参考答案： dUTP 酶缺陷；UDG 酶缺陷 您的答案：
填空题问题： 利用 PCR 技术介导的定点诱变（Site-directed mutagenesis）。较常用的方法一般有三种即（），（）和（）。
参考答案： 同源重组法；DpnⅠ 法；重叠延伸