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Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ¦Ë ÊɾúÌå Genome µÄ³¤¶ÈԼΪ£¨£©kb£¬Æä DNA ·Ö×ÓΪ£¨£©£¨Ìîµ¥»òË«£©Á´¡£ËüµÄ DNA ·Ö×ӼȿÉÒÔÒÔ£¨£©×´´æÔÚÒ²¿ÉÒÔÒÔ»·×´´æÔÚ£¬¶øÇÒ¿ÉÒÔ×ÔÈ»³É»·£¬ÆäÔÒòÊÇÔÚ ¦Ë ÊɾúÌåµÄÏßÐÔ·Ö×ÓµÄÁ½¶Ë¸÷ÓÐÒ»¸ö³¤¶ÈΪ£¨£©¸ö¼î»ùµÄÌìȻճÐÔÄ©¶Ë£¬ÕâÖÖÕ³ÐÔÄ©¶Ë¿ÉÒÔ×ÔÈ»³É»·£¬³É»·ºóµÄÕ³ÐÔÄ©¶Ë¾Í½Ð×ö£¨£©¡£
²Î¿¼´ð°¸£º 50£»Ë«£»Ïߣ»12£»cosλµã ÄúµÄ´ð°¸£º
Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ¦Ë ÊɾúÌåÔÚ¸ÐȾ´ó³¦¸Ë¾úÒԺ󣬿ÉÒÔ½øÈë Lytic growth Ò²¿ÉÒÔ½øÈë Lysogenic state ¡£Èç¹ûÆä»ùÒò×é DNA ͨ¹ýרһÐÔÖØ×éÕûºÏµ½ËÞÖ÷ȾɫÌåÖУ¬ÔòÆä½øÈ루£©£»ËüÒ²¿ÉÒÔÑ¡Ôñ½øÈ루£©£¬´óÁ¿¸´ÖƲ¢×é×°×Ó´úÊɾúÌå¿ÅÁ£¡£ ²Î¿¼´ð°¸£º Lysogenic state£»Lytic growth ÄúµÄ´ð°¸£º
Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ÔÚ ¦Ë ÊɾúÌåÔØÌåÖУ¬³£ÓõÄÑ¡Ôñ±ê¼ÇÓУ¨£©£¬c¢ñ»ùÒòʧ»î£¬ºÍ£¨£©µÈ¡£ ²Î¿¼´ð°¸£º LacZ£»spi ɸѡ ÄúµÄ´ð°¸£º
Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ¸ÄÔìºóµÄ ¦Ë ÊɾúÌå²Å¿ÉÓÃ×÷ÔØÌ壬°´ÕÕ¸ÄÔ췽ʽµÄ²»Í¬¿É½«Æä·ÖΪÁ½ÖÖÀàÐÍ£¬¼´²åÈëÐÍÔØÌ壨insertion vectors£©ºÍÌæ´úÐÍÔØÌ壨replacement vectors£©¡£ÆäÖÐ Insertion vectors ÊÇÖ¸£¨£©£»Replacement vectors ÊÇÖ¸£¨£©
²Î¿¼´ð°¸£º ͨ¹ýÌض¨µÄøÇÐλµãÔÊÐíÍâÔ´ DNA Ƭ¶Ï²åÈëµÄÔØÌ壻ÔÊÐíÍâÔ´ DNA Ƭ¶ÏÌæ»»ÔØÌåµÄ·Ç±ØÐë DNA Ƭ¶ÏµÄÔØÌå ÄúµÄ´ð°¸£º
Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ¦Ëgt10 ÊÇÒ»¸öÓÉ ¦Ë ÊɾúÌåÑÜÉú¶øÀ´µÄ insertion vectors £¬Ö÷ÒªÓÃÓÚ£¨£©¡£ËüȱʧÁ˺¬ÓÐÈÜÔ´ÕûºÏµÄ£¨£©£» ¦Ëgt11 ÔØÌåÒ²ÊÇÒ»ÖÖ insertion vectors £¬¸ÃÔØÌåµÄ×î´óÌصãÊÇÔÚ×î×ó²à¿ÉÌæ´úÇøÖû»ÁËÒ»¶Î£¨£©»ùÒò£¬¿É±àÂë ¦Â-°ëÈéÌÇÜÕø£¬ÔÚ IPTG/X-gal ƽ°åÉÏ¿ÉÐγɣ¨£©É«Êɾú°ß¡£
²Î¿¼´ð°¸£º ¿Ë¡СµÄ cDNA£»b257£»lacZ£»À¶ ÄúµÄ´ð°¸£º
Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ¦Ë ÊɾúÌåÓÉÓÚÊܵ½°ü×°µÄÏÞÖÆ£¬²åÈëÍâÔ´ DNA Ƭ¶Îºó£¬Æä×ÜµÄ DNA ³¤¶ÈÓ¦¸ÃÔÚÊɾúÌå genome µÄ£¨£©·¶Î§ÄÚ¡£ ²Î¿¼´ð°¸£º 78%¡«105% ÄúµÄ´ð°¸£º
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Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ Cosmid µÄ×é³É°üÀ¨Èý¸ö²¿·Ö£º£¨£©£¬£¨£©ºÍ£¨£©£¬ÆäÖи´ÖÆ×ÓÀ´Ô´ÓÚ£¨£©£¬cos ÐòÁÐÀ´Ô´ÓÚ£¨£©¡£
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Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ¦Ë ÊɾúÌåµÄ×î´ó¿Ë¡Ƭ¶ÎÊÇ£¨£©kb£¬ Cosmid µÄ×î´ó¿Ë¡Ƭ¶Î¿É´ïµ½£¨£©kb¡£ ²Î¿¼´ð°¸£º 23£»45
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Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ ÀûÓà ¦Ë ÊɾúÌåÔØÌå¹¹½¨µÄ gene library ÖУ¬ÎÄ¿âÊÇÒÔ£¨£©µÄÐÎʽ´æÔڵģ»ÓÃÖÊÁ£ÔØÌå¹¹½¨µÄ gene library ÊÇÒÔ£¨£©µÄÐÎʽ´æÔڵģ»Õ³Á£ÔØÌå¹¹½¨µÄ gene library ÊÇÒÔ£¨£©µÄÐÎʽ´æÔڵġ£
²Î¿¼´ð°¸£º Êɾú°ß£»¾úÂ䣻¾úÂä ÄúµÄ´ð°¸£º
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Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ M13 ÊɾúÌå½öÓÐÁ½¸ö´óµÄ»ùÒò¼ä¸ôÇø£¬·Ö±ðλÓÚ£¨£©Ó루£©Ö®¼äÒÔ¼°£¨£©ºÍ£¨£©Ö®¼ä£¬ÕâЩ»ùÒò¼ä¸ôÇøÄÚº¬ÓУ¨£©µÄÔª¼þ¡£ÆäÖУ¬£¨£©³ÆΪ IG Çø£¬ËüÓÐÈý¸ö×îÖØÒªµÄ¹¦Äܼ´£¨£©£¬£¨£©ºÍ£¨£©¡£
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Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ RFDNA ÊÇÖ¸£¨£©¡£ ²Î¿¼´ð°¸£º ¸´ÖÆÐÍ DNA £¬¸ÐȾÐԵĵ¥Á´ÊɾúÌå DNA £¨ÕýÁ´£©ÔÚËÞÖ÷øµÄ×÷ÓÃÏÂת±ä³É»·×´Ë«Á´ DNA £¬ÓÃÓÚ DNA µÄ¸´ÖÆ¡£ ÄúµÄ´ð°¸£º
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Ìî¿ÕÌâÎÊÌ⣺ YAC ÔØÌå»ù±¾×é³ÉÔª¼þÓУ¨£©£¬£¨£©£¬£¨£©£¬£¨£©ºÍ£¨£©¡£ ²Î¿¼´ð°¸£º ¸´ÖÆÆðµã£»×ÅË¿Á££»¶ËÁ££»MCS£»É¸Ñ¡±ê¼Ç ÄúµÄ´ð°¸£º
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µãÆÀ£ºÁ˽â pBluescript M13 ÔØÌåµÄ¹¤×÷ÔÀí¼°ÌØÐÔ¡£
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Ñ¡ÔñÌâÎÊÌ⣺ M13 µ¥Á´ÊɾúÌåµÄ¸´ÖÆ·ÖΪÈý¸ö½×¶Î£¬ÒÔÏÂÄÄÒ»Ïî²»ÊôÓÚ´Ë£¨£© ²Î¿¼´ð°¸£º D SS¡úSS ÄúµÄ´ð°¸£º
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µãÆÀ£º¦Ë ÊɾúÌå DNA ºÍ M13 µ¥Á´ÊɾúÌåÇÖȾËÞÖ÷ºó£¬¶¼ÊÇÏÈ ¦È ¸´ÖÆÄ£ÐÍ£¬ºóתΪ¹ö»·¸´ÖÆÄ£ÐÍ¡£ Ñ¡ÔñÌâÎÊÌ⣺ ÒÔÏÂ¶Ô pUC18 µÄÃèÊöÖУ¬´íÎóµÄΪ£¨£© ²Î¿¼´ð°¸£º C ¿ÉÒÔÔÚ¸¨ÖúÖÊÁ£µÄ°ïÖúϺϳɵ¥Á´ DNA ÄúµÄ´ð°¸£º
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Ñ¡ÔñÌâÎÊÌ⣺ ¦Ë ÊɾúÌåÏßÐÔ DNA ·Ö×ÓµÄÁ½¶Ë¸÷ÓÐÒ»¸ö£¨£©¸ö¼î»ù×é³ÉµÄÌìÈ»ð¤ÐÔÄ©¶Ë ²Î¿¼´ð°¸£º B 12 ÄúµÄ´ð°¸£º
µãÆÀ£º¦Ë ÊɾúÌåÏßÐÔ DNA ·Ö×ÓµÄÁ½¶Ë¸÷ÓÐÒ»¸ö 12 ¸ö¼î»ù×é³ÉµÄÌìȻճÐÔÄ©¶Ë£¬³ÆΪ cos λµã¡£ Ñ¡ÔñÌâÎÊÌ⣺ ÏÂÁйØÓÚϸ¾úÈ˹¤È¾É«Ì壨BAC£©µÄÌصãÃèÊö£¬³ý£¨£©ÒÔÍⶼÊÇÕýÈ·µÄ ²Î¿¼´ð°¸£º B BAC ÔØÌåÔڴ󳦸˾úÖÐΪ¸ß¿½±´ ÄúµÄ´ð°¸£º
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Ñ¡ÔñÌâÎÊÌ⣺ Õ³Á££¨cosmid£©ÊÇÒ»ÖÖÈ˹¤½¨ÔìµÄÔØÌ壬ÏÂÁжÔËüµÄÃèÊöÖÐÄÄÒ»ÏîÊDz»ÕýÈ·µÄ£¨£© ²Î¿¼´ð°¸£º D ½øÈëÊÜÌåϸ°ûºó£¬¿ÉÒýÆðÈÜÔ´»¯·´Ó¦ ÄúµÄ´ð°¸£º
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Ñ¡ÔñÌâÎÊÌ⣺ Ò»°ãÇé¿öÏ£¬ÖÊÁ£µÄ´æÔÚÇé¿öÒÔÏÂÃèÊöÕýÈ·µÄÊÇ£¨£© ²Î¿¼´ð°¸£º A ¶ÀÁ¢´æÔÚ ÄúµÄ´ð°¸£º
µãÆÀ£ºÖÊÁ£Ö¸Ï¸¾ú»òijЩµÍµÈÉúÎïÀïÃæ´æÔڵĶÀÁ¢ÓÚȾɫÌåÍâµÄË«Á´±ÕºÏ»·×´ DNA ·Ö×Ó£¨ÏÖÔÚÒ²·¢ÏÖÓÐÏß×´µÄ£©£¬Ëü¾³£Ð¯´øһЩ²»±ØÐèµÄÒÅ´«ÐÅÏ¢¡£ Ñ¡ÔñÌâÎÊÌ⣺ ת×ù×Ó²»°üÀ¨ÏÂÁÐÄĸö²¿·Ö£¨£© ²Î¿¼´ð°¸£º D Öظ´ÐòÁÐ