六、论述题

1.试述由乳酸生成葡萄糖的过程。 2.结合激素的作用机制，说明肾上腺素如何通过对有关酶类的活性的复杂调控，实现对血糖浓度的调控？

人在饥饿时，血糖浓度较低，促进肾上腺素髓质分泌肾上腺素，肾上腺素与靶细胞膜受体结合，活化了邻近的G蛋白，后者使膜上的腺苷酸环化酶活化，活化的腺苷酸环化酶催化ATP环化生成CAMP，CAMP作为激素在细胞内信号（第二信使）活化蛋白激酶A，蛋白激酶A可糖原磷酸化酶磷酸化生成有活性的糖原磷酸化酶，使糖原合成酶磷酸化失去活性，引起糖原分解加强，糖原合成减弱，达到维持血糖浓度的目的。

3．试述三羧酸循环代谢过程及特点。

4．三羧酸循环必须用再生的草酰乙酸起动，指出该化合物的可能来源（回补反应）。 （1）丙酮酸羧化反应

（2）磷酸烯醇式丙酮酸的羧化反应 （3）天冬氨酸的转氨基作用

5.用生化原理解释人体剧烈运动时肌肉有酸痛感。用代谢图表示。 6.在跑400米短跑之前、途中、之后，血浆中乳酸浓度如图所示？ （1）为什么乳酸的浓度会迅速上升？

（2）赛跑过后是什么原因使乳酸浓度降下来？为什么下降的速率比上升的速度缓慢？ （3）当处于休息状态时，乳酸的浓度为什么不等于零？

（1）糖酵解加速运转，丙酮酸和NADH的增加导致乳酸的增加。（2）乳酸经丙酮酸转化为葡萄糖，使乳酸浓度下降。这个糖异生过程较慢，因为丙酮酸的生成受NAD+的可利用性的限制，同时乳酸脱氢酶催化的反应有利于乳酸的生成，另外，由丙酮酸转化为葡萄糖需要能量。（3）因为乳酸脱氢酶催化的反应平衡有利于乳酸的生成。

umol/L -150 -100 -50

跑前 跑 跑后

7．有一组单亚基蛋白质，具有不同的分子量和等电点。分别为：A（45ku,pI5.4）,B(13ku,pI10.6),C(17ku,pI7.0),D(69ku,pI4.8),E(90ku,pI5.9)。（1）请指出经过SDS-PAGE后，从凝胶的上样孔到前沿指示剂方向蛋白质的条带顺序，并说明原因；（2）指出经过等电聚集电泳后，从负极到正极方向蛋白质在凝胶上的排列，并说明原因。 （1）E-D-A-C-B

原因：SDS-PAGE为变性电泳，蛋白质迁移速度只与分子质量有关，分子质量小的分子跑在最前面。

（2）B-C-E-A-D

原因：等电聚焦电泳是按等电点分离。进行曲等电聚集电泳时，从负极到正极方向凝胶的PH梯度从高到低，因此偏碱性条件下蛋白质样品中所有蛋白质均带负电荷，这样在电场中可向正极移动。蛋白质的PI越高，聚集条带越靠近负极；反之，则靠近正极。 8．试述根据分子大小分离蛋白质的方法有哪些？

9．试述根据蛋白质的溶解度分离蛋白质的方法有哪些？ 10．试述根据蛋白质电荷差异分离蛋白质的方法有哪些？ 11．试述蛋白质纯度及分子量测定的方法有哪些？ 12．试述蛋白质含量测定方法有哪些？