ABCD人民医院检验科 PCR室作业指导书 主题内容

PCR实验室化学试剂配制程序 文件编号：ABCD-3-PR-13 版本/修订号：A/0 生效日期：20060808 第 25 页 共90 页 PCR实验室化学试剂配制程序

1．目的：保证实验中用到的各种溶液符合实验要求。

2．适用范围：核酸扩增荧光检测实验室常用溶液：4%NaOH溶液、75%酒精、消毒剂（三氯异氰尿酸或 二氯

异氰尿酸钠）、2%戊二醛溶液等。 3．负责人： 操作人： 4．程序：

4．4 化学试剂的配制：

4．4．1 用具：干燥洁净的250ml量桶一只，1000ml量桶一只，1000ml烧杯一只，三角烧瓶两只，天平一架，100ml塑料试剂瓶、2000ml广口瓶各一只。 4．4．2 配制步骤：

4．4．2．1 配制4%NaOH溶液:

a）用天平称取4克分析纯的NaOH固体，置于一只三角烧瓶中。

b）用250ml量桶准确取100ml水，缓缓注入盛放NaOH固体的三角烧瓶中。 c）摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解。

d）然后缓缓倾倒入100ml塑料试剂瓶中密封保存备用。 4．4．2．2 配制消毒剂:

a）一般桌面、器具和地面的消毒只要使有效氯达到500mg/L，即可达到消毒作用。

b）消毒剂为粉状（20克/袋），如配制一升的消毒剂溶液，则取500g，倒入烧杯中，缓缓加入1000ml水充分溶解，备用。

c）如需加大消毒力度，则有效氯浓度加大。 4．4．2．3 配制75%酒精溶液:

a）一般常规消毒的75%酒精由医院药剂科提供。

b）RNA提取的75%酒精的配制，试剂盒提供DEPC水，酒精用分析纯的无水酒精，根据当天的标本数量进行配制。

4．4．2．4 配制2%戊二醛溶液:

a）准确量取戊二醛原液20ml倒入1000ml烧杯中。

b）量取980ml水，缓缓倒入1000ml烧杯中，混匀，加至2000ml广口瓶中备用。 注意事项：每份配制好的溶液保质期为14天

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PCR实验室记录管理制度 文件编号：ABCD-3-PR-14 版本/修订号：A/0 生效日期：20060808 第 26 页 共90 页 PCR实验室记录管理制度

1、目的：确保检验资料的记录、保存状态在控 2、适用范围：实验过程中产生的数据、文本资料的记录 3．负责人： 操作人： 4、工作程序：

4.1 书面记录文件的管理： 4.1.1 本实验室的书面记录包括：

001 ABCD人民医院检验科基因检测实验室平面图------------编号ABCD/001 002实验室主要负责人简历表-----------------------------编号ABCD/002 003PCR实验室工作人员一览表----------------------------编号ABCD/003 004PCR扩增接收标本记录表------------------------------编号ABCD/004 005拒收标本记录本-------------------------------------编号ABCD/005 006标本超低温保存记录表-------------------------------编号ABCD/006 007PCR试剂购买记录表----------------------------------编号ABCD/007 008试剂验收记录表-------------------------------------编号ABCD/008 009PCR室特殊耗材验收记录表----------------------------编号ABCD/009 010普通耗材验收记录表---------------------------------编号ABCD/010 011室间质评记录表-------------------------------------编号ABCD/011 012PCR室内质控记录表----------------------------------编号ABCD/012 013室内质控图-----------------------------------------编号ABCD/013 014 PCR实验室环境温湿度记录表-------------------------编号ABCD/014 015冰箱温度质控图-------------------------------------编号ABCD/015 016仪器使用记录表-------------------------------------编号ABCD/016 017仪器设备维护和校准记录表---------------------------编号ABCD/017 018紫外消毒车消毒记录表-------------------------------编号ABCD/018 019应急处理登记表-------------------------------------编号ABCD/019 020 PCR废血标本处理交接表-----------------------------编号ABCD/020 021垃圾处理记录表-------------------------------------编号ABCD/021 022实验室清洁消毒记录表-------------------------------编号ABCD/022 023 PCR检验报告单-------------------------------------编号ABCD/023

ABCD人民医院检验科 PCR室作业指导书 主题内容 PCR实验室记录管理制度 文件编号：ABCD-3-PR-14 版本/修订号：A/0 生效日期：20060808 第 27 页 共90 页 024耗材进购记录表-------------------------------------编号ABCD/024 025试剂耗材供应商一览表-------------------------------编号ABCD/025

4.1.2 填写书面记录，需使用黑色墨水或圆珠笔，字迹清晰，如有涂改，在涂改处应有涂改人签名，不得在记录表上进行无关书写，保持记录表清洁、完整。实验记录表严格专用，不同实验区不得混用。

4.1.3 每个记录本要纳入档案管理，写完后及时放入档案柜，每月分类装订成册,并依照要求进行编号,如2003年5月的实验结果记录本、试剂消耗记录本、室内质控图分别编为200305SYJG、200305SJXH、200305SLZK，分别放于档案柜的不同位置以便查询。标本原始检测申请单最后保存于仓库2年，其它实验记录保存于各自实验操作区内，保存5年。

4.1.4 定期对保存的记录进行分析总结，形成总结报告，以便改进工作。

4.1.5 在没有实验室职责同意的情况下，不得随意将记录借出。在记录借出时需有实验室职责、经手人、借阅人的签名方可。

4.2 电脑上记录文件的管理

4.2.1记录文件必须保存在非系统分区中，如D盘，保存路径要清晰、便捷、易查找。

4.2.2文件夹目录结构要求层次分明，一整年的实验结果均保存在一个年度文件夹里，如“2003年”文件夹；每个年度文件夹包含12个月文件夹，如“Jan01”、“Feb02”，每天的实验结果就保存在当月文件夹里。 4.2.3 实验文件保存时以当天日期命名，若某天进行了多次实验，命名时在后面以a、b、c等字母标识，如2003年5月8日做的两次实验，分别保存为20030508a和20030508b。

4.2.4为了防止储存实验结果的电脑发生系统崩溃、硬件故障等问题导致实验结果丢失、无法查询等情况，每个月的实验结果记录文件都要用移动存储设备（如软盘、USB硬盘等）拷贝到另一部PC机上做备份；一年的数据要用刻录机刻制一张CD光盘备份储存，贴上标签，如“2003年实验结果备份”,放入档案柜妥善存放。

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PCR应急处理程序 文件编号：ABCD-3-PR-15 版本/修订号：A/0 生效日期：20060808 第 28 页 共90 页 PCR应急处理程序

1．目的：在实际工作中，仪器设备发生故障、试剂盒发生质量问题时，为保证检验结果的准确性、及时，应

正确采取应急措施，最大程度上避免或减轻不利影响。

2．适用范围：适用于满足核酸扩增荧光检测实验室检测需要并可能对检验结果造成误差的仪器设备和试剂盒。 3．负责人： 4．细则：

4．1 核酸扩增荧光检测实验室工作人员在职责范围内均有责任熟悉各种仪器和相关设备的性能、要求、维护

和保养、常见故障的排除、尤其要严格按照操作规程操作。

4．2 工作人员在职责范围内均有责任有意识地注意以求及时发现并报告仪器设备和试剂盒的异常情况。 4．3 作为应急处理，潜在着一定的可能影响检测质量的不确定因素。室负责人负责在第一时间检查核实应

急措施的有效性。 4．4 仪器设备故障

4．4．1 室负责人接到异常情况报警后，立即现场确认异常情况的性质：观察有误、误操作、偶发现象或

确属不能立即排除的故障。

4．4．2 用红牌故障标志标示故障仪器，以防被错误使用。

4．4．3有满足要求的替用设备的，启用替用设备（准用仪器）。借用其他部门仪器设备时，及时联系借用

并核实该设备的使用状态。替用、借用或备用设备的使用在满足质量要求的同时，必须同时满足实验室管理措施（特别是防污染）的要求。

4．4．4不能解决的问题，应及时与供应方会同解决。根据双方合同约定，及时通知供应方。供应方技术支

持人员将在规定的时间内随身携带备用设备到达现场。

4．4．5仪器维修后，必须经验收合格并供需双方签字，调试实验通过后才能重新启用。取下红色故障标示

（暂停使用），换上蓝色正常标示（正常使用）。 4．4．6 室主任须检查并随时跟踪所采取措施的有效性。

4．4．7对未能及时排除故障时，必须及时上报科室，在科主任批准下，应积极联系附近的其他已得到卫生

部临检中心认证的临床基因扩增检验实验室检验，以满足病人和临床或科研需求。

4．5 试剂盒质量发生问题，经核实后，及时通知供货商迅速更换另一批次试剂，使用前需先作质量检测，

合格后方可使用。

4．6 仪器设备故障或试剂质量问题不能得到解决，预期将会影响到检测报告的及时发出，可将标本送至其

它已得到卫生部临检中心认证的临床基因扩增检验实验室检查；如已影响到报告的及时发出，应在门