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9、临床上流脑标本的采集与送检应注意什么？为什么？

保暖、保湿、立即送检，培养基预温，最好床边接种。因抵抗力很弱。对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感。室温3h即死，55℃ 5min内被破坏。且能产生自溶酶。

10、根据所学的知识，请列举出6~8种常见性传播疾病（STD）的病原体极其所致的疾病。 ⑴ 淋病——淋病奈瑟氏菌

⑵ AIDS——HIV（人类免疫缺陷病毒） ⑶ 梅毒——梅毒螺旋体

⑷ 尖锐湿疣——HPV（人乳头瘤病毒）

⑸ 非淋菌性尿道炎——解脲支原体和沙眼衣原体等 ⑹ 性病淋巴肉芽舯——沙眼衣原体 ⑺ 软下疳——杜克嗜血杆菌

⑻ 生殖器疱疹——HSV-Ⅱ（单纯疱疹病毒Ⅱ）

11、简述淋病的病原学诊断与防治原则是什么？

淋病的病原学诊断：

淋病属性传播性疾病，要求及时进行微生物学检查、正确诊断。标本采取：用无菌棉拭子沾取泌尿生殖道脓性分泌物或官颈口表面分泌物。方法如下：

① 直接涂片镜检：将标本涂片，经革兰染色后镜检，如在中性粒细胞内外均发现革兰阴性双球菌时，可初步诊断；

② 分离与鉴定：将标本立即接种于预温的巧克力色血琼脂平板或T-M培养基上，置37％、5％C02下孵育36-48小时，取典型菌落作形态学检查、氧化酶试验、糖发酵试验等给予鉴定

③ 有条件者可采用核酸杂交技术或核酸扩增技术进行检测。 防治原则： ① 开展性病防治知识教育，避免不洁性关系，提倡使用安全套。

② 婴儿出生时，应常规使用1%硝酸银或用氯霉素链霉素合剂滴眼，以预防新生儿淋菌性结膜炎的发生。

③ 目前尚无有效的疫苗作特异性预防。

④ 治疗：根据药敏结果选用敏感抗生素（淋必治 / 壮观霉素、菌必治 / 头孢三嗪、美满霉素、多西环素等）治疗，但要注意耐药性问题。

第10章 肠杆菌科

1、名词解释：迁徙生长现象； KIA试验；肥达试验。

⑴ 迁徙生长现象：是指变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长，形成以接种部位为中心的厚薄交替、同心圆形的层层波状菌苔，称为迁徙生长现象。

⑵ KIA试验：即双糖铁—半固体培养基，它是一种复合性的检查生化反应的培养基，可检查4种反应即葡萄糖、乳糖的发酵反应，是否产生H2S，有无动力等。目前多使用国产双糖铁琼脂粉（KIA），比较方便，效果也好，但只能配制成斜面培养基，不能配成半固体培养基，因而无法观察细菌的动力。

⑶ 肥达试验：是用已知伤寒杆菌菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原以及甲型副伤寒杆菌（A）抗原和肖氏沙门菌鞭毛（B）抗原与受检者血清作试管或微孔板凝集试验，以测定受检者血清中有无相应抗体及其效价，为协助临床对肠热症诊断的一种血清学试验。

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2、肠杆菌科细菌在SS琼脂平板上的菌落特征。 肠道非致病菌：红色菌落，如大肠杆菌等。

肠道致病菌：无色菌落。如伤寒杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌等

3、大肠埃希菌所致的疾病的种类由于哪些？简述致腹泻大肠埃希菌的种类以及主要的临床意义。EHEC主要血清型以及引起的病种是什么？ 大肠埃希菌所致的疾病的种类有：

⑴ 肠外感染：以化脓性炎症多见。如：尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎、腹膜炎、阑尾炎、手术创口感染、新生儿败血症与脑膜炎。（条件致病，细菌居住部位改变引起的肠外感染以化脓性感染和尿路感染最为常见。） ⑵ 肠道感染：腹泻。

引起腹泻大肠埃希菌的种类及其所致疾病 （1）肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌（霍乱样腹泻）（2）肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：主要引起儿童和成人菌痢样腹泻。 （3）肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：是婴幼儿腹泻的主要病原体，严重者致死。 （4）肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。 （5）肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）：可引起婴儿持续性腹泻、脱水、血便。

肠出血型大肠埃希菌(EHEC)主要血清型是0157 ：H7，可引起出血性结肠炎、溶血性尿毒综合征（HUS）。

4、志贺菌属和沙门菌属的主要致病物质、主要临床特征与临床常见病种。 志贺菌属

致病物质：菌毛；内毒素；志贺毒素。

所致疾病：经肠道传染，引起细菌性痢疾，有3种临床类型，即急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢。

主要临床特征：发热；脓血粘液便；腹痛、里急后重；甚至神志障碍，中毒性休克。 沙门菌属

致病物质：菌毛、耐酸应答基因、Vi抗原、内毒素、肠毒素。 所致疾病：肠热症（Enteric fever/typhoid fever）：伤寒和副伤寒；肠炎型即食物中毒；败血症；带菌者。

主要临床特征：伤寒??持续高热、相对缓脉、肝脾肿大、玫瑰疹、外周血白细胞数下降。

5、细菌性痢疾与肠热症的标本如何采集？

细菌性痢疾标本采集：粪便或肛拭子；新鲜脓血黏液便；立即送检或床边接种；保存于30％甘油盐水或卡-布培养基。在治疗前采集粘液脓血便作床边接种，不能及时接种可置甘油缓冲盐水中送检。

肠热症的标本采集：发病第1周：血液；发病第2周起：粪便；发病第3周起：粪便、尿液；肠热症全程：骨髓。

6、肥达试验的结果如何分析？

⑴ 正常抗体水平：人们因沙门菌隐性感染或预防接种，血清中可含有一定量的有关抗体，其效价随地区而有差异。一般是O抗体（TO）凝集效价≥1：80，伤寒沙门菌H（TH）凝集效价≥1：160，引起副伤寒的沙门菌H（PA/PB/PC）凝集价≥1：80时才有诊断价值。

⑵ 动态观察：有时单次效价增高不能定论，可在病程中逐周复查。若效价逐次递增或恢复

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期效价比初期≥4倍才有意义。 ⑶ O与H抗体在诊断上的意义：

结果 O抗体高，H抗体高 O抗体不高，H抗体不高 意义 伤寒患者；近期接种伤寒疫苗 ① 未接触过伤寒抗原（未感染或接种）； ② 检测时间过早，O抗体还未产生； ③ 机体免疫机能缺失或低下 O抗体不高，H抗体高 O抗体高，H抗体不高 ① 感染史或接种史； ② 非特异性回忆反应 ① 伤寒感染或接种早期； ② 与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他 沙门菌（如肠炎沙门菌）感染。

⑷ 肥达试验阴性原因：

① 发病早期曾用大量或多种抗生素治疗；

② 患者免疫功能低下。故本试验阴性时，不宜匆忙地否定临床诊断。

7、简述肠杆菌科细菌的分离鉴定的一般程序。

IMViC U 动力 大肠杆菌 + + - - - + 肺炎杆菌 - - + + + - 动力试验 红色菌落 大肠杆菌 生化反应 粪便 中段尿液 肛拭子 血液 胆汁培养 骨髓 基（增菌） 鉴别培养基 如SS平板 肺炎杆菌 涂片革兰染色镜检…G-杆菌 无色菌落 痢疾杆菌 伤寒杆菌 变形杆菌 玻片凝集反应确定

菌种和菌型 克氏双糖铁（KIA） 初步鉴定 玻片凝集反应确定菌种和菌型

生化反应 MIU

8、伤寒沙门菌与痢疾志贺菌如何进行分离鉴定？

标本（粪便）接种于肠道鉴别培养基如SS选择培养基。37℃培养24h后，挑取无色半透明的乳糖不发酵菌落接种至双糖铁培养基。伤寒沙门菌与痢疾志贺菌均不发酵乳糖，发酵葡萄糖产酸不产气，但痢疾志贺菌没有鞭毛，无动力而伤寒沙门菌则有，再用伤寒沙门菌与痢疾志贺菌的抗血清作玻片凝集试验予以鉴定。

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9、列出伤寒沙门菌及志贺菌在KIA和MIU（动力-吲哚-尿素）的基本生化反应。 区别 志贺菌 伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌 变形杆菌 KIA KA - - KA - +/- KA + + KA++ MIU - -/+ - + - - + - - + + +

10、简述大肠埃希菌的生化特性。

氧化酶试验（－）

分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等（个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：AA＋－ MIU：＋＋－ IMViC：＋＋－－

第11章 弧菌属

1、名词解释：霍乱肠毒素；神奈川现象；霍乱红试验。 ⑴ 霍乱肠毒素（cholera toxin）：是目前已知的致泻毒素中最为强烈的毒素，是肠毒素的典型代表，它由1个A亚单位和5个相同的B亚单位组成。B亚单位可与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞发挥毒性作用，激活腺苷酸环化酶，使ATP转变成cAMP，肠粘膜上皮细胞分泌亢进，肠液大量分泌，大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻。

⑵ 神奈川现象（kanagawa phenomenon）：P178将副溶血性弧菌接种于含高盐（7%）的人O型血或兔血及以D-甘露醇做为碳源的我妻（Wagatsuma）琼脂平板上，可产生β溶血，称为神奈川现象，即神奈川试验阳性，是测定该菌是否有致病性的一个重要试验。 ⑶ 霍乱红试验：出现蔷薇色，为霍乱红试验阳性。霍乱弧菌含有色氨酸酶，能分解色氨酸产生吲哚，霍乱弧菌液能还原硝酸盐为亚硝酸盐，因此当霍乱弧菌培养在含有硝酸盐成分的蛋白胨水中，所产生的亚硝酸盐可与吲哚结合成亚硝酸吲哚，滴加浓硫酸即可出现蔷薇色，称为霍乱红试验阳性（由于霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应，故无特异性）。 2、霍乱由何菌所致（霍乱弧菌的哪些血清群可引起霍乱）？试述其致病物质及其致病机制。

霍乱弧菌O1群与O139群可引起霍乱。

致病物质：霍乱肠毒素；鞭毛；菌毛；黏液素酶等。

致病机制：霍乱弧菌主要是产生霍乱肠毒素，作用于小肠黏膜上皮细胞，使ATP转变为cAMP，使cAMP水平升高，上皮细胞分泌功能增加，肠腔内水钠储留而导致上吐下泻（呕吐与腹泻，米泔水样大便，内含黏液、上皮细胞和弧菌，无炎症细胞）。

3、对可疑霍乱患者应如何进行快速微生物学检查？

运动试验与制动试验（+）。

动力观察：采取病人“米泔水样”大便或呕吐物制成悬滴片，观察细菌动力，可见流星或穿梭状动力的细菌。

制动试验： 标本， 霍乱多价诊断血清（效价1：64），用暗视野镜观察，3分钟内运动被抑制的即为阳性。

4、试述霍乱的防治原则。

⑴ 必须贯彻预防为主的方针，作好国境检疫与交通检疫，防止本病从国外传入；

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