9. DNA变性后理化性质有下述改变: A.对260nm紫外吸收减少 B.溶液粘度下降 C.磷酸二酯键断裂 D.核苷酸断裂
10.双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致:
A.A+G B.C+T C.A+T D.G+C E.A+C 11.密码子GψA,所识别的密码子是:
A.CAU B.UGC C.CGU D.UAC E.都不对
12.真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接,连接方式是: A.2?-5? B.3?-5? C.3?-3? D.5?-5? E.3?-3? 13.在pH3.5的缓冲液中带正电荷最多的是:
A.AMP B.GMP C.CMP D.UMP 14.下列对于环核苷酸的叙述,哪一项是错误的? A.cAMP与cGMP的生物学作用相反 B. 重要的环核苷酸有cAMP与cGMP C.cAMP是一种第二信使 D.cAMP分子内有环化的磷酸二酯键
15.真核生物DNA缠绕在组蛋白上构成核小体,核小体含有的蛋白质是
A.H1、H2、 H3、H4各两分子 B.H1A、H1B、H2B、H2A各两分子 C.H2A、H2B、H3A、H3B各两分子 D.H2A、H2B、H3、H4各两分子 E.H2A、H2B、H4A、H4B各两分子 (四)是非判断题
( )1.DNA是生物遗传物质,RNA则不是。
( )2.脱氧核糖核苷中的糖环3’位没有羟基。
( )3.原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。 ( )4.核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。
( )5.生物体的不同组织中的DNA,其碱基组成也不同。
( )6.核酸中的修饰成分(也叫稀有成分)大部分是在tRNA中发现的。 ( )7.DNA的Tm值和AT含量有关,AT含量高则Tm高。 ( )8.真核生物mRNA的5`端有一个多聚A的结构。
( )9.DNA的Tm值随(A+T)/(G+C)比值的增加而减少。
( )10.B-DNA代表细胞内DNA的基本构象,在某些情况下,还会呈现A型、Z型和三股螺旋的局部构象。
( )11.DNA复性(退火)一般在低于其Tm值约20℃的温度下进行的。 ( )12.用碱水解核酸时,可以得到2’和3’-核苷酸的混合物。 ( )13.生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。 ( )14.mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。
( )15.tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。 ( )16.对于提纯的DNA样品,测得OD260/OD280<1.8,则说明样品中含有RNA。 ( )17.基因表达的最终产物都是蛋白质。
( )18.两个核酸样品A和B,如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280,那么A的纯度大于B的纯度。
( )19.毫无例外,从结构基因中DNA序列可以推出相应的蛋白质序列。 ( )20.真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3’-OH。
(五)简答题
1.将核酸完全水解后可得到哪些组分?DNA和RNA的水解产物有何不同? 2.计算下列各题:
(1)T7噬菌体DNA,其双螺旋链的相对分子质量为2.5×10-7。计算DNA链的长度(设核苷酸的平均相对分子质量为650)。
(2)相对分子质量为130×106的病毒DNA分子,每微米的质量是多少? (3)编码88个核苷酸的tRNA的基因有多长? (4)编码细胞色素C(104个氨基酸)的基因有多长(不考虑起始和终止序列)? (5)编码相对分子质量为9.6万的蛋白质的mRNA,相对分子质量为多少(设每个氨基酸的平均相对分子量为120)?
3.对一双链DNA而言,若一条链中(A+G)/(T+C)= 0.7,则: (1)互补链中(A+G)/(T+C)= ?
(2)在整个DNA分子中(A+G)/(T+C)= ?
(3)若一条链中(A+ T)/(G +C)= 0.7,则互补链中(A+ T)/(G +C)= ? (4)在整个DNA分子中(A+ T)/(G +C)= ? 4.DNA热变性有何特点?Tm值表示什么?
5.在pH7.0,0.165mol/L NaCl条件下,测得某一DNA样品的Tm为89.3℃。求出四种碱基百分组成。
6. 述下列因素如何影响DNA的复性过程: (1)阳离子的存在;(2)低于Tm的温度;(2)高浓度的DNA链。 7.核酸分子中是通过什么键连接起来的? 8.DNA分子二级结构有哪些特点?
9.在稳定的DNA双螺旋中,哪两种力在维系分子立体结构方面起主要作用? 10.简述tRNA二级结构的组成特点及其每一部分的功能。
11.用1mol/L的KOH溶液水解核酸,两类核酸(DNA及RNA)的水解有何不同? 12.如何将分子量相同的单链DNA与单链RNA分开? 13.计算下列各核酸水溶液在pH7.0,通过1.0cm光径杯时的260nm处的A值(消光度)。已知AMP的摩尔消光系数A260 = 15400 GMP的摩尔消光系数A260 = 11700
CMP的摩尔消光系数A260 = 7500 UMP的摩尔消光系数A260 = 9900 dTMP的摩尔消光系数A260 = 9200 求:(1)32μmol/L AMP,(2)47.5μmol/L CMP,(3)6.0μmol/L UMP的消光度,(4)48μmol/L AMP和32μmol/L UMP混合物的A260消光度。(5) A260 = 0.325的GMP溶液的摩尔浓度(以摩尔/升表示,溶液pH7.0)。(6) A260 = 0.090的dTMP溶液的摩尔浓度(以摩尔/升表示,溶液pH7.0)。
14.如果人体有1014个细胞,每个体细胞的DNA量为6.4×109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少?是太阳-地球之间距离(2.2×109公里)的多少倍? 15.指出在pH2.5、pH3.5、pH6、pH8、pH11.4时,四种核苷酸所带的电荷数(或所带电荷数多少的比较),并回答下列问题: (1)电泳分离四种核苷酸时,缓冲液应取哪个pH值比较合适?此时它们是向哪一极移动?移动的快慢顺序如何? (2)当要把上述四种核苷酸吸附于阴离子交换树脂柱上时,应调到什么pH值? (3)如果用洗脱液对阴离子交换树脂上的四种核苷酸进行洗脱分离时,洗脱液应调到什么pH值?这四种核苷酸上的洗脱顺序如何?为什么?
参考答案: (一)名词解释
1. 单核苷酸(mononucleotide):核苷与磷酸缩合生成的磷酸酯称为单核苷酸。 2. 磷酸二酯键(phosphodiester bonds):单核苷酸中,核苷的戊糖与磷酸的羟基之间形成的磷酸酯键。
3. 不对称比率(dissymmetry ratio):不同生物的碱基组成由很大的差异,这可用不对称比率(A+T)/(G+C)表示。 4. 碱基互补规律(complementary base pairing):在形成双螺旋结构的过程中,由于各种碱基的大小与结构的不同,使得碱基之间的互补配对只能在G?C(或C?G)和A?T(或T?A)之间进行,这种碱基配对的规律就称为碱基配对规律(互补规律)。
5. 反密码子(anticodon):在tRNA链上有三个特定的碱基,组成一个密码子,由这些反密码子按碱基配对原则识别mRNA链上的密码子。反密码子与密码子的方向相反。
6. 顺反子(cistron):基因功能的单位;一段染色体,它是一种多肽链的密码;一种结构基因。
7. 核酸的变性、复性(denaturation、renaturation):当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时,其中的氢键便断开,双链DNA便脱解为单链,这叫做核酸的“溶解”或变性。在适宜的温度下,分散开的两条DNA链可以完全重新结合成和原来一样的双股螺旋。这个DNA螺旋的重组过程称为“复性”。 8. 退火(annealing):当将双股链呈分散状态的DNA溶液缓慢冷却时,它们可以发生不同程度的重新结合而形成双链螺旋结构,这现象称为“退火”。 9. 增色效应(hyper chromic effect):当DNA从双螺旋结构变为单链的无规则卷曲状态时,它在260nm处的吸收便增加,这叫“增色效应”。 10. 减色效应(hypo chromic effect):DNA在260nm处的光密度比在DNA分子中的各个碱基在260nm处吸收的光密度的总和小得多(约少35%~40%), 这现象称为“减色效应”。 11. 噬菌体(phage):一种病毒,它可破坏细菌,并在其中繁殖。也叫细菌的病毒。
12. 发夹结构(hairpin structure):RNA是单链线形分子,只有局部区域为双链结构。这些结构是由于RNA单链分子通过自身回折使得互补的碱基对相遇,形成氢键结合而成的,称为发夹结构。 13. DNA的熔解温度(Tm值):引起DNA发生“熔解”的温度变化范围只不过几度,这个温度变化范围的中点称为熔解温度(Tm)。 14. 分子杂交(molecular hybridization):不同的DNA片段之间,DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性,形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。
15. 环化核苷酸(cyclic nucleotide):单核苷酸中的磷酸基分别与戊糖的3’-OH及5’-OH形成酯键,这种磷酸内酯的结构称为环化核苷酸。 (二)填空题
1. Watson-Crick; 1953 2. 核苷酸 3. 2’
4. 细胞核;细胞质
5. β;糖苷;磷酸二酯键 6. 磷
7. 假尿嘧啶 8. 胸腺;尿 9. 胸腺;尿
10. 反向平行、互补 11. 胸腺嘧啶
12. 3.4nm;10;36° 13. 大;高 14. 退火
15. mRNA;tRNA
16. 分子大小;分子形状 17. 增加;下降;升高;丧失 18. 嘌呤;嘧啶;260 19. 增加;不变 20. 窄
21. 宽;低;高;1
22. 多;5%;DNA;蛋白质
23. 样品的均一度;DNA的浓度;DNA片段大小;温度的影响;溶液离子强度 24. 碱基堆积力;氢键;离子键;范德华力
25. 三叶草;倒L型;CCA;携带活化了的氨基酸 26. cAMP;cGMP;第二信使;3’;5’ 27. m7G;polyA;m7G识别起始信号的一部分;polyA对mRNA的稳定性具有一定影响
28. 单链;双链 (三)选择题
1.B:ATP分子中各组分的连接方式为:腺嘌呤-核糖-三磷酸,既A-R-P-P-P。 2.C:hnRNA是核不均一RNA,在真核生物细胞核中,为真核mRNA的前体。 3.E:tRNA的功能是以它的反密码子区与mRNA的密码子碱基互补配对,来决定携带氨基酸的特异性。
4.D:根据Watson-Crick模型,每对碱基间的距离为0.34nm,那么1μmDNA双螺旋平均含有1000nm/0.34nm个核苷酸对数,即2941对。 5.E:核苷酸是通过3`5`-磷酸二酯键连结成多核苷酸链的。
6.C:核酸是具有极性的分子,习惯上以5’→3’的方向表示核酸片段,TAGAp互补的片段也要按5’→3’的方向书写,即TCTAp。 7.C:tRNA含有稀有碱基比例较多的核酸。
8.B:真核细胞mRNA帽子结构最多见的是通过5’,5’-磷酸二酯键连接的甲基鸟嘌呤核苷酸,即m7GPPPNmP。
9.B:核酸的变性指核酸双螺旋区的氢键断裂,变成单链的无规则的线团,并不涉及共价键的断裂。一系列物化性质也随之发生改变:粘度降低,浮力密度升高等,同时改变二级结构,有时可以失去部分或全部生物活性。DNA变性后,由于双螺旋解体,碱基堆积已不存在,藏于螺旋内部的碱基暴露出来,这样就使得变性后的DNA对260nm紫外光的吸光率比变性前明显升高(增加),这种现象称为