25.当某种蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质的等电点为7.0( )
26.蛋白质的亚基(或称为亚单位)和肽是同义词( ) 四、解释下列名词
1.二面角 2.蛋白质一级结构 3.蛋白质二级结构 4.蛋白质三级结构 5.蛋白质四级结构 6.超二级结构 7.别构效应 8.同源蛋白质 9.简单蛋白质 10.结合蛋白质 11.蛋白质变性作用 12.蛋白质盐析作用 13.蛋白质分段盐析 14.结构域 15.寡聚蛋白 16.构象 17.构型 18.肽单位
19.肽平面 20.?—螺旋 21.?—折叠或?—折叠片 22.超二级结构 23.?—转角 24.蛋白质的变性作用 25.蛋白质的复性作用 26.亚基
五、问答题
1.组成蛋白质的20种氨基酸依据什么分类?各类氨基酸的共同特性是什么?这种分类在生物学上有何重要意义?
2.蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何? 3.Edman反应所有的试剂和反应的特点如何?
4.何谓蛋白质等电点?等电点时蛋白质的存在特点是什么? 5.何谓盐析?分段盐析粗分蛋白质的原理是什么?
6.哪些因素可引起蛋白质变性?变性后蛋白质的性质有哪些改变? 7.蛋白质分离分析技术常用的有哪几种,简述凝胶过滤、电泳基本原理。 8.有哪些沉淀蛋白质的方法?其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点? 9.溴化氰在多肽裂解中的作用部位,和裂解产物的末端氨酸残基为何物? 10.举例说明蛋白质一级结构与功能关系。 11.举例说明蛋白质变构效应与意义。
12.一样品液中蛋白质组分为A(30KD)、B(20KD)、C(60KD),分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时,各组分被洗脱出来的先后次序。
13.多聚赖氨酸(poly-Lys)在pH7时呈无规线团,在pH10时则呈?-螺旋;而多聚的谷氨酸酸(poly-Glu)在pH7时也呈无规线团,而在pH4时则呈?-螺旋,为什么? 14.简述胰蛋白酶原激活过程。
15.?-螺旋的特征是什么?如何以通式表示?
16.高浓度的硫酸铵(pH5时)可使麦清蛋白沉淀析出,并用于初步分离该种蛋白的早期步,简要说明其原理。
17.用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液(洗脱剂:pH3.25,0.2N柠檬酸钠),其结果如下:①各洗脱峰的面积大小或高度有何含义?②Asp比Glu先洗脱出来的原因? 18.为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂? 六、计算题
1.测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量的0.29%,计算该蛋白质的最低分子量(注:Trp的分子量为204Da)。
2.一种蛋白质按其重量含有1.65%亮氨酸和2.48%异亮氨酸,计算该蛋白质最低分子量。(注:两种氨基酸的分子量都是131Da)。
3.某种氨基酸?-COOHpK=2.4,?-NH3pK=9.6,?-NH3pK=10.6,计算该种氨基酸的等电点(pI)。
4.某种四肽?-COOHpK=2.4,?-NH3pK=9.8,侧链-NH3pK=10.6侧链-COOHpK=4.2,试计算此种多肽的等电点(pI)是多少?
5.有一种多肽,其侧链上羧基30个(pK=4.3),嘧唑基有10个(pK=7),?-N+H3(pK=10),设C末端?-羧基pK=3.5,N-末端氨基pK=9.5,计算此多肽的pI。
6.已知氨基酸平均分子量为120Da。有一种多肽的分子量是15120Da,如果此多肽完全以?-螺旋形式存在,试计算此?-螺旋的长度和圈数。
+
+
++
答 案:
一、填空 1. 20 非极性 极性 疏水 亲水 赖 精 天 冬 2.色 苯丙 酪 3. -OH -SH -COOH N NH 4.氨基 紫红 亮黄 5.肽 氢键 二硫键 疏水作用(键) 范德华力 二硫键 6. 谷 缬 极 非极 7.异硫氰酸苯酯 从N-端依次对氨基酸进行分析鉴定 8. ?-螺旋 ?-折叠 ?转角 无规卷曲 氢 氨基酸种类 数目排列次序 中断 9. 分子表面的水化膜 同性电荷斥力 10.溶解度最低 电场中无电泳行为 11.空间结构 二硫 氢 复性 12.正电 负电 13.谷 天冬 赖 精 细 15. b a c
二、选择填空 1.D 2.B 3.C 4.C 5.D 6.A 7.B 8.C 9.C 10.C 11.D 12.D 13.B 14.C 15.C 16.A 17.C 18.B 19.B 20.A 22.B 23.C 24.B 25.B 26.D
三、判断题 1.× 2.√ 3.√ 4.× 5.√ 6.× 7.× 8.× 9.× 10.√ 11.× 12.√ 13.× 14.√ 15.√ 16.× 17.√ 18.√ 19.√ 20.× 21.× 22.√ 六、计算题
1.解:Trp残基MW/蛋白质MW=0.29%,蛋白质MW=64138Da。 2.解:异亮氨酸/亮氨酸=2.48%/1.65%=1.5/1=3/2
所以,在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个,异亮氨酸至少有3个。由此推理出: 1.65%=2×(131-18)/蛋白质MW 答案:蛋白质MW=13697Da。
3.答案:pI=10.1 4.答案:pI=7.0
5.解:要计算多肽的等电点,首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有(30+1)个单位负电荷,而正电荷最多只有(15+10+1)个,相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等,只能让30个羧基(侧链-COOHpK=4.3)少带5个负电荷(?-COOHpK=3.5,它比侧链-COOH易于解离,难于接受质子),即在30个侧链-COOH中有25个处于解离状态(-COO-),5个不解离(-COOH)。因此:
pH=pKa+lg([碱]/[酸])=4.3+lg(25/5)=5.0。
6.解:答案:肽链长度=43.92(nm);该蛋白质(或多肽)分子量=14640Da